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大豆子叶节受体系统的建立及农杆菌转化的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-9页
1. 前言第9-22页
 1.1 研究目的与意义第9页
 1.2 文献综述第9-22页
  1.2.1 植物遗传转化研究第9-15页
   1.2.1.1 植物遗传转化方法第9-13页
   1.2.1.2 报告基因和选择标记基因第13-14页
   1.2.1.3 植物转化体的筛选与检测第14-15页
  1.3.1 大豆遗传转化研究进展第15-18页
   1.3.1.1 大豆的再生系统第15-17页
   1.3.1.2 大豆遗传转化方法及进展第17-18页
  1.4.1 植物抗病虫基因第18-22页
   1.4.1.1 Chi基因在植物抗真菌病基因工程中的应用第19-20页
   1.4.1.2 Bt基因在植物抗虫基因工程中的应用第20-22页
2. 材料与方法第22-28页
 2.1 试验材料第22页
  2.1.1 植物材料第22页
  2.1.2 农杆菌菌株第22页
 2.2 试验方法第22-25页
  2.2.1 大豆子叶节再生系统的建立第22-23页
   2.2.1.1 外植体的获得第22-23页
   2.2.1.2 基因型的筛选第23页
   2.2.1.3 激素浓度的筛选第23页
  2.2.2 大豆子叶节的农杆菌转化及影响因素的筛选第23-25页
   2.2.2.1 菌液的制备第23-24页
   2.2.2.2 菌株生长曲线的确定第24页
   2.2.2.3 选择剂适宜浓度的筛选第24页
   2.2.2.4 杀菌剂适宜浓度的筛选第24页
   2.2.2.5 预培养、侵染和共培养时间的筛选第24页
   2.2.2.6 农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化第24-25页
   2.2.2.7 GUS基因的检测第25页
 2.3 转化体的PCR检测第25-28页
  2.3.1 碱裂解法提取质粒DNA第25-26页
  2.3.2 SDS法提取大豆总DNA第26页
  2.3.3 PCR检测第26-28页
   2.3.3.1 Chi基因检测第26-27页
   2.3.3.2 Bt基因检测第27-28页
3. 结果与分析第28-44页
 3.1 大豆子叶节再生系统的建立第28-44页
  3.1.1 大豆基因型的筛选第28页
  3.1.2 大豆再生系统激素浓度的确定第28-34页
   3.1.2.1 分化培养基激素浓度的确定第28-33页
   3.1.2.2 生根培养基激素浓度的确定第33-34页
  3.1.3 农杆菌转化大豆子叶节及影响因素的确定第34-40页
   3.1.3.1 菌株活化时间的确定第34-35页
   3.1.3.2 选择剂适宜浓度的确定第35页
   3.1.3.3 杀菌剂适宜浓度的确定第35页
   3.1.3.4 预培养、侵染和共培养时间的确定第35-40页
  3.1.4 PCR检测结果第40-44页
   3.1.4.1 抗性芽的PCR检测第40页
   3.1.4.2 抗性植株的PCR检测第40-44页
4. 讨论第44-47页
 4.1 大豆再生频率较高的基因型筛选第44页
 4.2 激素浓度的筛选第44页
 4.3 影响农杆菌遗传转化效率的因素第44-47页
  4.3.1 组织的来源及其发育状态第45页
  4.3.2 预培养、侵染和共培养时间第45页
  4.3.3 Vir区的诱导活化第45-46页
  4.3.4 选择剂的使用第46-47页
5. 结论第47-48页
参考文献第48-54页
附录第54-56页
图版第56-61页
致谢第61页

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