| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-18页 |
| 第一篇 中国沙棘体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立 | 第18-70页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 1 文献综述 | 第20-38页 |
| ·体细胞胚胎发生的研究现状 | 第20-27页 |
| ·体细胞胚胎的起源及发生方式 | 第20-21页 |
| ·体细胞胚发生的特点 | 第21-22页 |
| ·体细胞胚发生及形态建成的研究 | 第22-23页 |
| ·体细胞胚发生或建成的假说 | 第23-24页 |
| ·体细胞胚发生的影响因素 | 第24-26页 |
| ·内部因素 | 第24-25页 |
| ·外部因素 | 第25-26页 |
| ·体细胞胚胎发生的广泛应用 | 第26-27页 |
| ·林木体细胞胚的研究进展 | 第27-29页 |
| ·体细胞胚发生途径再生林木的情况 | 第27-28页 |
| ·林木体细胞胚发生体系的应用 | 第28-29页 |
| ·沙棘概况及应用研究价值 | 第29-32页 |
| ·沙棘的起源、分类及分布 | 第29页 |
| ·沙棘的应用价值 | 第29-32页 |
| ·沙棘的生态价值 | 第30页 |
| ·沙棘的食用价值 | 第30-31页 |
| ·沙棘的医疗价值 | 第31-32页 |
| ·沙棘的其它价值 | 第32页 |
| ·沙棘的大面积死亡问题 | 第32页 |
| ·沙棘繁殖技术研究现状 | 第32-38页 |
| ·有性繁殖 | 第32-33页 |
| ·无性繁殖 | 第33-38页 |
| ·组织培养繁殖方式 | 第33-36页 |
| ·其它无性繁殖方式 | 第36-38页 |
| 2 本研究的目的及意义 | 第38页 |
| 3 试验方法与内容 | 第38-43页 |
| ·试验材料与处理方法 | 第38-39页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·处理方法 | 第38页 |
| ·培养条件 | 第38-39页 |
| ·试验设计 | 第39-42页 |
| ·技术路线 | 第39页 |
| ·试验内容 | 第39-42页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚胎发生 | 第39-41页 |
| ·体细胞胚胎发育及植株再生 | 第41-42页 |
| ·炼苗移栽 | 第42页 |
| ·试验结果的观测 | 第42-43页 |
| ·数据统计与分析 | 第43页 |
| 4 试验结果与分析 | 第43-63页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚胎的发生 | 第43-59页 |
| ·愈伤组织和胚性愈伤组织诱导 | 第43-54页 |
| ·愈伤组织和胚性愈伤组织诱导试验方案Ⅰ | 第43-49页 |
| ·愈伤组织和胚性愈伤组织诱导试验方案Ⅱ | 第49-54页 |
| ·胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎的发生 | 第54-57页 |
| ·外植体接种方式对愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响 | 第57-58页 |
| ·外植体类型对愈伤组织及胚性愈伤组织诱导的影响 | 第58-59页 |
| ·体细胞胚发育及植株再生 | 第59-62页 |
| ·基本培养基和KT对中国沙棘体细胞胚植株再生的影响 | 第59-61页 |
| ·KT和白砂糖对中国沙棘体细胞胚植株再生的影响 | 第61-62页 |
| ·体细胞胚胎发生动态 | 第62-63页 |
| ·炼苗移栽 | 第63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 讨论 | 第64-68页 |
| ·培养基中还原性氮的影响 | 第64-65页 |
| ·外源激素的影响 | 第65-66页 |
| ·培养基中糖的种类及浓度的影响 | 第66-67页 |
| ·不同外植体的影响 | 第67-68页 |
| 7 创新点及进一步研究思路 | 第68-70页 |
| ·创新点 | 第68页 |
| ·进一步研究思路 | 第68-70页 |
| 第二篇 BADH基因的克隆、转化拟南芥及其作为生物安全标记基因的探索研究 | 第70-136页 |
| 前言 | 第70-72页 |
| 1 文献综述 | 第72-93页 |
| ·转基因生物的安全性 | 第72-74页 |
| ·转基因食品安全性状况 | 第73页 |
| ·转基因生态安全性状况 | 第73-74页 |
| ·抗性标记基因的生物安全性问题 | 第74页 |
| ·标记基因研究概况 | 第74-80页 |
| ·传统的选择标记基因 | 第75-76页 |
| ·生物安全性标记基因 | 第76-79页 |
| ·与激素代谢相关的基因 | 第76页 |
| ·与氨基酸代谢相关的基因 | 第76页 |
| ·与糖类代谢相关的基因 | 第76-77页 |
| ·能解除化合物毒性或胁迫相关的基因 | 第77页 |
| ·能发出特定荧光物质的蛋白酶类 | 第77-78页 |
| ·利用颜色差异性筛选转化体的相关基因 | 第78页 |
| ·抗性标记基因的剔除技术 | 第78-79页 |
| ·标记基因的综合应用 | 第79-80页 |
| ·与组织或器官特异性启动子的结合应用 | 第79页 |
| ·与MAT载体系统的结合应用 | 第79页 |
| ·β-葡萄糖苷酸酶作为标记基因的综合应用 | 第79-80页 |
| ·生物安全标记基因发展前景 | 第80页 |
| ·抗逆性基因研究进展 | 第80-83页 |
| ·抗生物胁迫基因工程研究 | 第81-82页 |
| ·抗非生物胁迫基因工程研究 | 第82-83页 |
| ·BADH基因的研究概况 | 第83-93页 |
| ·基因的功能特性与抗逆机制 | 第83-87页 |
| ·甜菜碱的生理功能 | 第84页 |
| ·甜菜碱合成途径 | 第84-85页 |
| ·BADH的功能特性 | 第85-86页 |
| ·BADH与耐盐、抗旱机制的关系 | 第86-87页 |
| ·存在BADH基因的植物种类及相应克隆 | 第87-88页 |
| ·BADH作为抗逆目的基因的转化研究 | 第88-92页 |
| ·作为生物安全标记基因的研究进展 | 第92-93页 |
| 2 本研究的目的及意义 | 第93页 |
| 3 试验方法与内容 | 第93-110页 |
| ·材料 | 第93页 |
| ·试验材料 | 第93页 |
| ·酶以及生化试剂 | 第93页 |
| ·主要仪器设备 | 第93-94页 |
| ·常用溶液配制 | 第94页 |
| ·培养基的配制 | 第94页 |
| ·试验试剂的配制 | 第94页 |
| ·试验方法 | 第94-110页 |
| ·菠菜BADH基因的cDNA克隆 | 第94-99页 |
| ·菠菜总RNA的提取 | 第95页 |
| ·从基因组中克隆目的基因 | 第95-97页 |
| ·PCR扩增产物的电泳、切胶回收并检测 | 第97-98页 |
| ·回收的PCR产物与T载体的连接 | 第98页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞Top10 | 第98页 |
| ·重组质粒的抗生素筛选及单克隆菌落活化培养 | 第98-99页 |
| ·重组质粒的菌落PCR检测 | 第99页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第99页 |
| ·表达载体的构建 | 第99-104页 |
| ·酶切位点的分析 | 第100-101页 |
| ·BADH基因两端酶切位点的加入 | 第101-102页 |
| ·DNA质粒的提取 | 第102-103页 |
| ·质粒的酶切 | 第103页 |
| ·酶切产物的连接 | 第103-104页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞Top10 | 第104页 |
| ·重组质粒的抗生素筛选及单克隆菌落活化培养 | 第104页 |
| ·重组质粒的菌落PCR检测 | 第104页 |
| ·BADH基因片段与表达载体连接的DNA序列测定与分析 | 第104页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的转化 | 第104-106页 |
| ·待浸染拟南芥植株的培养 | 第104页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第104-105页 |
| ·表达载体质粒转化农杆菌 | 第105页 |
| ·农杆菌浸染液的制备 | 第105-106页 |
| ·拟南芥花序浸染农杆菌及培养 | 第106页 |
| ·T_0代拟南芥转基因植株的筛选与PCR鉴定 | 第106-108页 |
| ·野生型拟南芥对甜菜碱醛的敏感性试验 | 第106页 |
| ·拟南芥T_0代种子筛选 | 第106-107页 |
| ·拟南芥T_0代转基因株系的PCR检测 | 第107-108页 |
| ·T_1代拟南芥转基因株系的筛选及相关抗逆性研究 | 第108-110页 |
| ·潮霉素筛选拟南芥T_1代种子 | 第108页 |
| ·拟南芥T_1代阳性植株及种子逆境处理下的表型分析试验 | 第108-110页 |
| 4 试验结果与分析 | 第110-130页 |
| ·菠菜BADH基因的cDNA克隆 | 第110-112页 |
| ·菠菜总RNA的提取 | 第110页 |
| ·从基因组中扩增基因的结果 | 第110-112页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第112页 |
| ·表达载体的构建 | 第112-116页 |
| ·表达载体的选择及酶切位点的分析 | 第112页 |
| ·加入酶切位点的BADH基因的克隆 | 第112-114页 |
| ·DNA测序结果 | 第114页 |
| ·DNA质粒的提取 | 第114页 |
| ·插入BADH基因的DNA片段与表达载体的连接、构建 | 第114-116页 |
| ·DNA测序结果 | 第116页 |
| ·农杆菌介导拟南芥的转化 | 第116-118页 |
| ·待浸染拟南芥植株的培养 | 第116页 |
| ·表达载体质粒转化农杆菌及重组质粒的PCR检测 | 第116-118页 |
| ·拟南芥转基因植株的筛选 | 第118-130页 |
| ·野生型拟南芥对甜菜碱醛的敏感性试验 | 第118-120页 |
| ·拟南芥T_0代种子筛选与转基因株系的PCR鉴定 | 第120-123页 |
| ·潮霉素筛选试验 | 第120页 |
| ·甜菜碱醛筛选试验 | 第120-121页 |
| ·移栽培养 | 第121页 |
| ·拟南芥T_0代转基因植株的PCR检测 | 第121-123页 |
| ·T_1代拟南芥转基因株系的筛选及相关抗逆性研究 | 第123-130页 |
| ·潮霉素筛选拟南芥T_1代种子 | 第123-124页 |
| ·转基因拟南芥表型变化分析及抗逆功能验证 | 第124-130页 |
| 5 结论 | 第130-131页 |
| 6 讨论 | 第131-133页 |
| ·抗性标记基因的生物安全性问题 | 第131页 |
| ·启动子对于BADH基因表达的影响 | 第131-132页 |
| ·叶绿体遗传转化的局限性及与试验相关的改进 | 第132-133页 |
| 7 创新点及进一步研究思路 | 第133-136页 |
| ·创新点 | 第133-134页 |
| ·进一步研究思路 | 第134-136页 |
| 图版Ⅰ | 第136-137页 |
| 图版Ⅱ | 第137-140页 |
| 参考文献 | 第140-163页 |
| 个人简介 | 第163-164页 |
| 导师简介 | 第164-165页 |
| 致谢 | 第165页 |
