中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-44页 |
·细胞色素P450酶系与细胞色素P450 | 第16-22页 |
·细胞色素P450酶系 | 第16页 |
·细胞色素P450 | 第16-22页 |
·P450的结构特征 | 第17-18页 |
·P450的类型 | 第18-20页 |
·P450的命名 | 第20-21页 |
·P450种类的多样性 | 第21-22页 |
·昆虫细胞色素P450的研究进展 | 第22-36页 |
·昆虫细胞色素P450蛋白的序列特征 | 第22-23页 |
·昆虫细胞色素P450基因的基本特性 | 第23-26页 |
·昆虫细胞色素P450基因的多样性 | 第23-25页 |
·昆虫细胞色素P450基因的可诱导性 | 第25-26页 |
·昆虫细胞色素P450基因的功能 | 第26-34页 |
·蜕皮激素的合成与代谢 | 第26-30页 |
·保幼激素的合成与代谢 | 第30-31页 |
·信息激素的代谢 | 第31页 |
·植物次生物质的代谢 | 第31-33页 |
·杀虫剂的代谢 | 第33-34页 |
·家蚕细胞色素P450的研究进展 | 第34-36页 |
·昆虫细胞色素P450基因的进化 | 第36-39页 |
·基因簇 | 第36页 |
·假基因 | 第36页 |
·内含子与外显子 | 第36-37页 |
·直向同源基因 | 第37页 |
·种系发生 | 第37-39页 |
·进化机制 | 第39页 |
·基因组学在昆虫细胞色素P450研究中的应用与进展 | 第39-44页 |
·基因组研究技术与P450s的分离 | 第40-42页 |
·基因组测序 | 第40-41页 |
·表达序列标签技术 | 第41页 |
·DNA微阵列技术 | 第41页 |
·差异显示反转录PCR技术 | 第41-42页 |
·基因组作图与功能基因定位 | 第42页 |
·比较基因组学在基因的预测与进化研究中的应用 | 第42-43页 |
·P450基因结构与内含子起源 | 第43-44页 |
第二章 引言 | 第44-48页 |
·研究目的和意义 | 第44-45页 |
·主要研究内容 | 第45-46页 |
·研究路线 | 第46-48页 |
第三章 家蚕细胞色素P450基因的生物信息分析 | 第48-66页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·数据来源 | 第48-49页 |
·方法与步骤 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-63页 |
·家蚕细胞色素P450s的分析 | 第49-51页 |
·假基因 | 第51-54页 |
·基因分类与序列间系统发生关系 | 第54-56页 |
·家蚕P450s的内含子分析 | 第56-57页 |
·家蚕P450s的基因组分布与成簇排列状况 | 第57-59页 |
·家蚕P450s的主要结构域的保守性分析 | 第59-60页 |
·家蚕P450s的表达分析 | 第60-62页 |
·家蚕P450s的EST表达分析 | 第60页 |
·家蚕P450s芯片数据的表达分析 | 第60-62页 |
·参与保幼激素合成的环氧化酶(epoxidatase)基因预测 | 第62-63页 |
·结论与讨论 | 第63-66页 |
第四章 家蚕细胞色素P450基因的比较基因组学分析 | 第66-82页 |
·材料与方法 | 第66-67页 |
·数据来源 | 第66页 |
·软件与程序 | 第66页 |
·方法 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-75页 |
·家蚕和果蝇的进化树构建 | 第67页 |
·蜜蜂P450s进化树和基因结构图的构建 | 第67-69页 |
·P450基因的共线性 | 第69-70页 |
·Clan3基因的结构分析 | 第70-71页 |
·Clan4基因的结构分析 | 第71-73页 |
·Clan2基因的结构分析 | 第73页 |
·线粒体集团基因的结构分析 | 第73-74页 |
·三个昆虫P450s的内含子分布对比分析 | 第74-75页 |
·结论与讨论 | 第75-82页 |
·昆虫P450s的分布差异及其功能分析 | 第76-78页 |
·三个昆虫P450s的共线性分析 | 第78页 |
·昆虫P450s的基因结构比较分析 | 第78-79页 |
·昆虫P450s与其基因组的关系 | 第79-82页 |
第五章 家蚕CYP9A基因簇的基因克隆及进化分析 | 第82-98页 |
·材料与方法 | 第82-88页 |
·材料 | 第82-84页 |
·方法 | 第84-88页 |
·RNA的提取 | 第84-85页 |
·cDNA第一链的合成 | 第85页 |
·引物设计和PCR反应 | 第85-86页 |
·目的片段的回收 | 第86页 |
·目的片段与载体的连接 | 第86页 |
·感受态细胞的制备 | 第86-87页 |
·转化 | 第87页 |
·阳性克隆的筛选和验证 | 第87-88页 |
·克隆基因的序列分析 | 第88页 |
·RT-PCR | 第88页 |
·结果与分析 | 第88-96页 |
·CYP9A基因cDNA的克隆和序列分析 | 第88-92页 |
·CYP9A基因在各组织器官的表达谱分析 | 第92页 |
·CYP9A基因的进化分析 | 第92-96页 |
·结论与讨论 | 第96-98页 |
第六章 家蚕P450基因CYPl8Al的表达分析与功能研究 | 第98-114页 |
·材料与方法 | 第98-101页 |
·材料 | 第98页 |
·实验材料 | 第98页 |
·主要试剂及其配制 | 第98页 |
·主要仪器设备 | 第98页 |
·方法 | 第98-101页 |
·引物设计和PCR反应 | 第98-99页 |
·RT-PCR | 第99页 |
·RNA干涉载体的构建 | 第99-100页 |
·dsRNA的合成 | 第100页 |
·荧光定量PCR检测 | 第100-101页 |
·结果与分析 | 第101-109页 |
·CYPl8Al基因cDNA的克隆和序列分析 | 第101-104页 |
·CYPl8Al基因表达活性分析 | 第104-106页 |
·RT-PCR检测 | 第104-105页 |
·家蚕CYPl8Al在蛹、蛾期表达的芯片数据分析 | 第105-106页 |
·直向同源基因CYPl8Al的同源性分析 | 第106页 |
·家蚕CYPl8Al和其它与类固醇调节相关基因的同源性分析 | 第106-108页 |
·虫体dsRNA注射及后期观察 | 第108-109页 |
·RNAi效果分子检测 | 第109页 |
·结论与讨论 | 第109-114页 |
第七章 综合和结论 | 第114-118页 |
参考文献 | 第118-138页 |
附录 | 第138-142页 |
博士在读期间发表文章及参加课题情况 | 第142-144页 |
致谢 | 第144页 |