| 中文摘要 | 第1-16页 |
| 英文摘要 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-36页 |
| 1 肿瘤细胞诱导分化机理研究及其深入方向 | 第18-23页 |
| ·肿瘤细胞诱导分化机理研究的重要意义 | 第18-19页 |
| ·肿瘤细胞诱导分化的研究现状及进展 | 第19-21页 |
| ·肿瘤细胞诱导分化机理研究所存在的问题 | 第21-22页 |
| ·肿瘤细胞诱导分化机理研究的深入方向 | 第22-23页 |
| 2 核基质与核基质蛋白研究 | 第23-27页 |
| ·核基质的结构与功能 | 第23-24页 |
| ·核基质蛋白 | 第24-26页 |
| ·核基质蛋白和细胞增殖分化的研究 | 第26-27页 |
| 3 细胞核基质异常与细胞癌变的关系 | 第27-31页 |
| 4 神经母细胞瘤细胞诱导分化研究及其存在问题 | 第31-33页 |
| 5 本论文具体研究工作及其科学意义 | 第33-36页 |
| 材料和方法 | 第36-54页 |
| 1 试剂与材料 | 第36-37页 |
| 2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3 细胞培养与诱导分化处理 | 第38-39页 |
| ·人神经母细胞瘤细胞培养 | 第38-39页 |
| ·诱导分化剂与诱导分化处理 | 第39页 |
| 4 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞诱导分化过程中生长曲线的测定 | 第39-40页 |
| 5 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞诱导分化前后细胞周期分布的测定 | 第40页 |
| 6 苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及光镜观察 | 第40-41页 |
| 7 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的扫描及透射电镜样品制备观察 | 第41-42页 |
| ·扫描电镜样品制备观察 | 第41页 |
| ·透射电镜样品制备观察 | 第41-42页 |
| 8 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞相关癌基因、抑癌基因表达产物的免疫细胞化学检测 | 第42-43页 |
| ·相关癌基因表达产物的免疫细胞化学检测 | 第42页 |
| ·相关抑癌基因表达产物的免疫细胞化学检测 | 第42-43页 |
| 9 人神经母细胞瘤分化标志物的观察 | 第43-44页 |
| ·NSE表达样品的制备与观察 | 第43页 |
| ·Synaptophysin表达样品的制备与观察 | 第43-44页 |
| ·MAP2表达样品的制备与观察 | 第44页 |
| 10 人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞核基质-中间纤维系统的选择性抽提样品的制备与观察 | 第44-46页 |
| ·核基质-中间纤维系统的选择性抽提 | 第44-45页 |
| ·核基质-中间纤维系统的整装光镜样品制备与观察 | 第45页 |
| ·核基质-中间纤维系统的整装扫描电镜样品制备与观察 | 第45页 |
| ·核基质-中间纤维系统的整装透射电镜样品制备与观察 | 第45-46页 |
| 11 核基质蛋白的提取 | 第46-47页 |
| 12 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47页 |
| 13 凝胶染色及图像分析 | 第47-48页 |
| ·凝胶染色 | 第47-48页 |
| ·凝胶图像分析 | 第48页 |
| 14 诱导分化前后差异核基质蛋白的胶内酶解 | 第48-49页 |
| 15 质谱分析及数据库检索 | 第49-50页 |
| 16 Western Blotting检测 | 第50-51页 |
| 17 免疫荧光染色 | 第51页 |
| 18 激光共聚焦显微镜样品的制备与观察 | 第51-54页 |
| 实验结果 | 第54-92页 |
| 1 RA对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的诱导效果 | 第54-60页 |
| ·RA诱导分化前后SK-N-SH细胞的生长曲线观察结果 | 第54-55页 |
| ·RA诱导分化过程中SK-N-SH细胞周期的测定结果 | 第55-56页 |
| ·RA诱导分化前后SK-N-SH细胞形态和超微结构的观察结果 | 第56-58页 |
| ·RA对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞相关癌基因、抑癌基因表达的影响 | 第58-59页 |
| ·RA对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化特异标志物表达的影响 | 第59-60页 |
| 2 RA对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质-中间纤维系统构型的影响 | 第60-62页 |
| ·核基质-中间纤维系统的光镜观察结果 | 第60页 |
| ·核基质-中间纤维系统的扫描电镜观察结果 | 第60-61页 |
| ·核基质-中间纤维系统的透射电镜观察结果 | 第61-62页 |
| 3 RA诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中核基质蛋白表达的变化 | 第62-74页 |
| ·双向电泳与凝胶图像分析结果 | 第62-65页 |
| ·质谱鉴定与数据库查询结果 | 第65-74页 |
| 4 SK-N-SH细胞经RA诱导分化前后特异核基质蛋白表达变化的确证 | 第74-77页 |
| ·差异表达核基质蛋白Western-blot结果 | 第74-76页 |
| ·核基质蛋白免疫荧光染色观察结果 | 第76-77页 |
| 5 RA诱导SK-N-SH细胞分化过程中特异核基质蛋白与相关癌基因、抑癌基因的共定位观察 | 第77-84页 |
| ·NPM与癌基因c-myc、c-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第77-79页 |
| ·PHB与癌基因c-myc、c-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第79-81页 |
| ·hnRNP A2/B1与癌基因c-myc、C-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第81-84页 |
| 6 RA诱导SK-N-SH细胞分化过程中神经细胞特异表达标志物与相关癌基因、抑癌基因的的共定位观察 | 第84-92页 |
| ·NSE与癌基因c-myc、c-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第84-86页 |
| ·SYP与癌基因c-myc、c-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第86-88页 |
| ·MAP2与癌基因c-myc、c-fos以及抑癌基因p53、Rb表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第88-92页 |
| 讨论 | 第92-150页 |
| 1 RA对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的诱导分化效果 | 第92-99页 |
| ·RA对SK-N-SH细胞增殖与细胞周期的影响 | 第92-93页 |
| ·RA对SK-N-SH细胞形态与超微结构的影响 | 第93-95页 |
| ·RA对SK-N-SH细胞相关癌基因与抑癌基因表达的影响 | 第95-97页 |
| ·RA对SK-N-SH细胞分化标志物表达的影响 | 第97-98页 |
| 小结: | 第98-99页 |
| 2 RA对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中核基质构型变化的影响 | 第99-101页 |
| 3 差异表达核基质蛋白与RA诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的关系 | 第101-137页 |
| ·人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞诱导分化前后差异表达的核基质蛋白 | 第102-104页 |
| ·共同差异表达核基质蛋白的功能分析 | 第104-112页 |
| ·其他差异表达核基质蛋白的功能分析 | 第112-121页 |
| 小结 | 第121-122页 |
| ·共同差异核基质蛋白在人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中与相关基因产物的关系 | 第122-137页 |
| 4 神经细胞特异表达蛋白在人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中与相关基因产物的关系 | 第137-144页 |
| ·NSE与SK-N-SH细胞中相关癌基因及抑癌基因产物的关系 | 第137-139页 |
| ·Synaptophysin与SK-N-SH细胞中相关癌基因及抑癌基因产物的关系 | 第139-141页 |
| ·MAP2与SK-N-SH细胞中相关癌基因及抑癌基因产物的关系 | 第141-144页 |
| 小结: | 第144页 |
| 5 RA诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的调控机制 | 第144-150页 |
| 结论 | 第150-151页 |
| 论文创新点 | 第151-153页 |
| 图版及说明 | 第153-191页 |
| 参考文献 | 第191-214页 |
| 缩略语及中英文对照 | 第214-216页 |
| 在学期间发表论文 | 第216-218页 |
| 致谢 | 第218页 |
