| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-43页 |
| ·柑橘遗传育种研究进展 | 第14-18页 |
| ·柑橘遗传育种的目标和成果 | 第14-16页 |
| ·育种手段 | 第16-18页 |
| ·柑橘生物技术研究概况 | 第18-23页 |
| ·组织培养技术 | 第18页 |
| ·原生质体培养及融合 | 第18-20页 |
| ·基因工程 | 第20-22页 |
| ·分子标记技术 | 第22-23页 |
| ·柑橘童期改良研究进展 | 第23-24页 |
| ·类胡萝卜素代谢相关基因克隆及基因工程研究进展 | 第24-36页 |
| ·类胡萝卜素的生物学功能 | 第25页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第25-26页 |
| ·高等植物类胡萝卜素生物合成途径中主要酶及其基因的研究进展 | 第26-29页 |
| ·类胡萝卜素代谢调控的主要途径及分子生物学 | 第29-31页 |
| ·类胡萝卜素生物合成相关基因在植物基因工程中的应用 | 第31-34页 |
| ·柑橘果实类胡萝卜素代谢研究进展 | 第34-36页 |
| ·柑橘果实色泽突变体及其主要呈色色素 | 第34-35页 |
| ·柑橘果实类胡萝卜素合成代谢途径及其分子基础 | 第35-36页 |
| ·反义 RNA及 RNAi技术研究进展 | 第36-42页 |
| ·反义 RNA研究进展 | 第36-38页 |
| ·反义 RNA作用机理 | 第36-37页 |
| ·反义 RNA技术在植物上的应用 | 第37-38页 |
| ·RNAi研究进展 | 第38-42页 |
| ·RNAi的发现和命名 | 第38-39页 |
| ·RNAi的作用机制和特点 | 第39-40页 |
| ·RNAi在植物遗传改良上的应用 | 第40-42页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第42-43页 |
| 第二章 早实枳和 Cocktail葡萄柚遗传转化体系的建立 | 第43-65页 |
| ·材料和方法 | 第43-50页 |
| ·转化植物材料 | 第43-44页 |
| ·菌株、质粒及试剂 | 第44页 |
| ·实验所用培养基配方 | 第44页 |
| ·遗传转化外植体再生体系的建立 | 第44页 |
| ·根癌农杆菌介导的柑橘遗传转化 | 第44-46页 |
| ·柑橘外植体材料的处理 | 第44-45页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第45页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化率的影响 | 第45页 |
| ·转化和共培养 | 第45页 |
| ·抗生素敏感性试验 | 第45-46页 |
| ·卡那霉素梯度添加试验 | 第46页 |
| ·早实枳茎段腋芽的去除 | 第46页 |
| ·不定芽的再生 | 第46页 |
| ·GUS染色及组织化学分析 | 第46-47页 |
| ·数据统计与分析 | 第47页 |
| ·DNA提取 | 第47-48页 |
| ·PCR检测 | 第48-49页 |
| ·Southern blotting检测 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-62页 |
| ·筛选培养基的确定和再生体系的建立 | 第50-51页 |
| ·低温处理对种子发芽率和生长势的影响 | 第51-52页 |
| ·光照处理对外植体再生能力的影响 | 第52页 |
| ·农杆菌菌液浓度对发芽率和转化率的影响 | 第52-53页 |
| ·共培养条件对再生能力和转化率的影响 | 第53-54页 |
| ·卡那霉素添加浓度的确认及添加方式对不定芽再生的影响 | 第54-55页 |
| ·柑橘不同外植体对潮霉素筛选的反应 | 第55-56页 |
| ·早实枳茎段腋芽的处理 | 第56页 |
| ·抗性芽再生 | 第56-58页 |
| ·以Cocktail子叶为外植体的转化 | 第58-59页 |
| ·抗性植株的分子检测和鉴定 | 第59-61页 |
| ·转基因植株的 GUS染色 | 第61-62页 |
| ·转基因早实枳开花结果 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·早实枳在柑橘等木本植物功能基因组和遗传育种研究中的优势 | 第62-63页 |
| ·早实枳与枳转化和再生的差异 | 第63-65页 |
| 第三章 BCH，CRTISO，LCYB，LCYE RNAi(或反义)载体的构建和转化 | 第65-84页 |
| ·材料和方法 | 第65-72页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·引物设计 | 第65-66页 |
| ·植物表达载体构建 | 第66-68页 |
| ·BCH，CRTISO基因反义植物表达载体构建 | 第66-68页 |
| ·LCYB，LCYE基因 RNAi植物表达载体的构建 | 第68页 |
| ·CABCH载体转化伏令夏橙胚性愈伤组织 | 第68页 |
| ·BICI载体转化早实枳 | 第68页 |
| ·LCYE和 LCYB RNAi载体转化早实枳和Cocktail葡萄柚 | 第68页 |
| ·抗性愈伤和转基因植株 PCR测定 | 第68-69页 |
| ·抗性愈伤和转基因植株 Southern杂交分析 | 第69页 |
| ·抗性愈伤和转基因植株叶片类胡萝卜素含量测定 | 第69-70页 |
| ·转基因植株 Real-time PCR分析 | 第70-72页 |
| ·植物组织 RNA提取 | 第70-71页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-81页 |
| ·载体构建 | 第72-74页 |
| ·转基因愈伤或植株的获得 | 第74-76页 |
| ·PCR检测和 Southern分析 | 第76-78页 |
| ·转化 BCH反义基因的抗性愈伤组织中类胡萝卜素含量的变化 | 第78页 |
| ·抑制 LCYE基因表达对早实枳和 Cocktail葡萄柚叶片类胡萝卜素含量和基因表达的影响 | 第78-80页 |
| ·抑制 LCYB基因表达对早实枳叶片中基因表达和类胡萝卜素含量的影响 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·转基因植株叶片中类胡萝卜素的合成及相关基因的表达 | 第81-82页 |
| ·RNAi技术在柑橘功能基因研究及类胡萝卜素代谢调控中的应用潜力 | 第82-83页 |
| ·研究展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-106页 |
| 博士期间发表的论文 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
