| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 参考文献 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 顶复门原虫Ⅱ型脂肪酸合成代谢研究进展 | 第12-16页 |
| 2 顶复门原虫Ⅱ型脂肪酸合成代谢酶与相关抑制物的研究 | 第16-18页 |
| 3 β-酮脂酰-ACP还原酶(KR)的研究现状 | 第18-24页 |
| 参考文献 | 第24-30页 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫Ⅱ型脂肪酸合成代谢关键酶—β-酮脂酰-ACP还原酶(EtKR)基因的预测、克隆与序列分析 | 第30-56页 |
| 1 材料与方法 | 第30-37页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-50页 |
| ·EtKR ORF预测结果 | 第37-38页 |
| ·EtKR基因部分片段的克隆及序列分析 | 第38-40页 |
| ·5'-RACE扩增产物及重组质粒的PCR鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·3'-RACE扩增产物及重组质粒的PCR鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·包含EtKR完整ORF序列的扩增与重组质粒的PCR鉴定结果 | 第42页 |
| ·EtKR序列分析 | 第42-48页 |
| ·EtKR结构分析 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| ·EtKR ORF序列的预测 | 第50页 |
| ·EtKR全长序列的扩增 | 第50页 |
| ·EtKR的引导肽 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 第三章 EtKR重组表达及其在子孢子内亚细胞定位研究 | 第56-72页 |
| 1 材料和方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·主要仪器 | 第56-57页 |
| ·常用分子生物学试剂和试剂盒 | 第57页 |
| ·亚细胞定位所需材料 | 第57页 |
| ·菌株、载体 | 第57页 |
| ·引物 | 第57页 |
| ·试验动物 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-66页 |
| ·EtKR成熟基因片段的扩增结果 | 第61页 |
| ·重组表达质粒的PCR与酶切鉴定 | 第61-62页 |
| ·EtKR重组表达质粒在大肠杆菌的诱导表达 | 第62-64页 |
| ·pMAL-c2x标签蛋白的诱导表达 | 第64-65页 |
| ·EtKR在E.tenella子孢子内的亚细胞定位的研究 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| ·EtKR的蛋白表达 | 第66-67页 |
| ·亚细胞定位的研究 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
| 第四章 EtKR的酶动力学及抑制动力学研究 | 第72-88页 |
| 1 材料和方法 | 第72-74页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-83页 |
| ·NADH/NADPH标准曲线的建立 | 第74-76页 |
| ·rETKR催化底物的确定 | 第76-77页 |
| ·rEtKR酶活性的测定 | 第77-78页 |
| ·rEtKR对NADH的Km和Vmax值的计算 | 第78-80页 |
| ·Hexachlorophene对rEtKR酶活性的影响 | 第80-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 全文总结 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
