摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
一 前言 | 第9-20页 |
1 核酶简介 | 第9-16页 |
·核酶的发现及分类 | 第9页 |
·RNASEP简介及其作为分子剪刀的历史 | 第9-11页 |
·关于EGS | 第11-16页 |
2 HCMV简介 | 第16-18页 |
·HCMV的命名 | 第16页 |
·HCMV的病毒学特征 | 第16页 |
·DNA聚合酶UL54基因简介 | 第16-17页 |
·HCMV的流行病学 | 第17-18页 |
3 课题意义 | 第18页 |
4 本课题的研究基础 | 第18-20页 |
二 技术路线 | 第20-21页 |
三 材料与方法 | 第21-36页 |
1 主要仪器 | 第21-22页 |
2 实验材料 | 第22-24页 |
·细胞和病毒 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·其它主要试剂的配方 | 第23页 |
·其它实验材料 | 第23-24页 |
3 实验内容与方法 | 第24-36页 |
·细胞和病毒的培养 | 第24-25页 |
·病毒感染的鉴定 | 第25-27页 |
·病毒的滴度测定 | 第27页 |
·EGS的人工合成 | 第27-28页 |
·EGS的转染率实验 | 第28-29页 |
·EGS对HCMV基因表达的抑制作用 | 第29-34页 |
·EGS对病毒增殖曲线的影响 | 第34-36页 |
四 结果与分析 | 第36-46页 |
1 病毒HCMV AD169的培养、鉴定与滴度测定 | 第36-38页 |
·HFF细胞的培养 | 第36页 |
·感染病毒后人包皮细胞出现病变效应 | 第36-37页 |
·病毒感染的PCR鉴定 | 第37-38页 |
2 检测EGS的转染率 | 第38-42页 |
·荧光显微镜观察转染率 | 第38-40页 |
·流式细胞仪检测转染率 | 第40-42页 |
3 EGS对HCMV基因表达的抑制作用 | 第42-45页 |
·RNA的抽提与纯化 | 第42页 |
·逆转录产物的鉴定 | 第42-43页 |
·荧光定量PCR检测 | 第43-45页 |
4 EGS对病毒生长曲线的影响 | 第45-46页 |
五 讨论 | 第46-53页 |
1 EGS的设计 | 第46-48页 |
2 EGS的可能用途 | 第48-49页 |
3 EGS的不足 | 第49-50页 |
4 EGS的作用效果 | 第50-51页 |
5 EGS浓度的选择 | 第51-53页 |
六 结论 | 第53-54页 |
七 参考文献 | 第54-58页 |
八 附录 | 第58-64页 |
附录1 缩略词中英文对照 | 第58-59页 |
附录2 AD169的UL54基因全序列 | 第59-62页 |
附录3 AD169基因组序列和HSV-1的TK基因序列的BLAST结果 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |