| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·生物农药 | 第9页 |
| ·多杀菌素的研究进展 | 第9-20页 |
| ·多杀菌素的产生菌 | 第10页 |
| ·多杀菌素的结构 | 第10-12页 |
| ·多杀菌素的理化性质 | 第12-13页 |
| ·多杀菌素的生物合成 | 第13-15页 |
| ·多杀菌素的生物合成基因 | 第13-15页 |
| ·聚酮链的生物合成途径 | 第15页 |
| ·多杀菌素的生物活性 | 第15-17页 |
| ·多杀菌素的构效关系 | 第17-19页 |
| ·多杀菌素的作用机理 | 第19页 |
| ·多杀菌素的剂型 | 第19-20页 |
| ·多杀菌素产生菌育种的研究 | 第20-21页 |
| ·常规诱变育种 | 第20页 |
| ·原生质体融合育种 | 第20-21页 |
| ·本试验研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-28页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·斜面培养基 | 第22页 |
| ·种子培养基 | 第22页 |
| ·发酵培养基 | 第22页 |
| ·高渗溶液(P培养液) | 第22页 |
| ·原生质体再生培养基 | 第22页 |
| ·供试菌种 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-26页 |
| ·培养条件 | 第23页 |
| ·斜面菌种培养条件 | 第23页 |
| ·种子培养条件 | 第23页 |
| ·发酵条件 | 第23页 |
| ·原生质体再生培养条件 | 第23页 |
| ·分析方法 | 第23-24页 |
| ·初筛(菌块—TLC法) | 第23页 |
| ·复筛(HPLC法) | 第23-24页 |
| ·菌丝量的测定 | 第24页 |
| ·种子液和发酵液中还原糖测定(DNS分光光度法) | 第24页 |
| ·发酵液中总糖的测定 | 第24页 |
| ·发酵液中NH_4~+的测定(纳氏试剂分光光度法) | 第24页 |
| ·发酵液中磷的测定(氯化亚锡分光光度法) | 第24页 |
| ·诱变处理方法 | 第24-25页 |
| ·斜面菌种制备 | 第24页 |
| ·孢子悬液的制备 | 第24页 |
| ·发酵后处理 | 第24-25页 |
| ·高产菌株的选育及选育方法比较 | 第25-26页 |
| ·出发菌株的复壮 | 第25页 |
| ·预萌发孢子悬液的紫外诱变 | 第25页 |
| ·NTG诱变 | 第25页 |
| ·~(60)Co-γ射线诱变处理 | 第25页 |
| ·原生质体紫外诱变处理 | 第25页 |
| ·链霉素诱变选育 | 第25-26页 |
| ·最小抑制浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·链霉素诱变处理 | 第26页 |
| ·原生质体的制备与再生 | 第26-28页 |
| ·制备方法 | 第26页 |
| ·计数观察方法 | 第26页 |
| ·原生质膜的裂解 | 第26页 |
| ·原生质体再生培养基的选择 | 第26-27页 |
| ·原生质体的灭活 | 第27页 |
| ·原生质体融合 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-44页 |
| ·出发菌株的选择 | 第28页 |
| ·预萌发孢子悬液的紫外诱变 | 第28-29页 |
| ·紫外线照射不同时间的诱变效果比较 | 第28页 |
| ·紫外诱变菌株的筛选 | 第28-29页 |
| ·菌株UV125的NTG诱变 | 第29-30页 |
| ·不同NTG浓度下的诱变效果比较 | 第29页 |
| ·NTG诱变菌株的复筛 | 第29-30页 |
| ·~(60)Co-γ射线对菌株N263的诱变 | 第30-31页 |
| ·不同照射剂量下的诱变效果比较 | 第30页 |
| ·~(60)Co-γ射线诱变菌株复筛 | 第30-31页 |
| ·原生质体紫外诱变菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·不同照射剂量下的诱变效果比较 | 第31页 |
| ·原生质体紫外诱变菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·菌株PU446的硫酸链霉素诱变 | 第32-33页 |
| ·最小抑制浓度曲线的确定 | 第32页 |
| ·链霉素诱变菌株的筛选 | 第32-33页 |
| ·原生质体技术 | 第33-38页 |
| ·原生质体制备 | 第33-36页 |
| ·多杀菌素产生菌的菌丝生长曲线 | 第33-34页 |
| ·甘氨酸对原生质体形成的影响 | 第34页 |
| ·酶解时间及温度对原生质体形成的影响 | 第34-36页 |
| ·原生质体再生培养基的选择结果 | 第36页 |
| ·原生质体融合 | 第36-38页 |
| ·热灭活与紫外灭活剂量的确定 | 第36-37页 |
| ·原生质体融合效果 | 第37-38页 |
| ·不同分子量及不同浓度PEG对原生质体融合的影响 | 第37-38页 |
| ·融合后再生菌落的筛选 | 第38页 |
| ·传代稳定性试验 | 第38-40页 |
| ·菌株R287的发酵参数测定 | 第40-44页 |
| ·葡萄糖溶液吸光度标准曲线的制定 | 第40页 |
| ·种子液代谢测定结果 | 第40-41页 |
| ·NH_4~+和可溶性磷吸光度标准曲线的制定 | 第41-42页 |
| ·发酵液代谢测定结果 | 第42-44页 |
| 4 讨论与分析 | 第44-46页 |
| ·菌株诱变 | 第44页 |
| ·抗性筛选对菌株产素水平的影响 | 第44页 |
| ·原生质体的制备及再生研究 | 第44页 |
| ·原生质体灭活的应用 | 第44-45页 |
| ·原生质体融合的研究 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |