白菜病害生防多功能工程菌株的构建
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-25页 |
| 1.原生质体融合的优势 | 第11页 |
| 2.原生质体融合研究状况 | 第11-12页 |
| 3.原生质体融合技术在工、农业上的应用 | 第12-13页 |
| ·工业生产的应用 | 第12页 |
| ·农业生产的应用 | 第12-13页 |
| 4.原生质体融合步骤 | 第13-14页 |
| ·标记菌株筛选和稳定性验证 | 第14页 |
| ·原生质体制备 | 第14页 |
| ·原生质体再生 | 第14页 |
| ·原生质体融合 | 第14页 |
| ·融合子验证、分离 | 第14页 |
| 5.影响微生物原生质体制备、再生、和融合的因素 | 第14-20页 |
| ·影响原生质体制备的因素 | 第14-17页 |
| ·培养基成分对原生质体制备的影响 | 第15页 |
| ·培养方式对原生质体制备的影响 | 第15页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第15-16页 |
| ·菌体浓度对原生质体制备的影响 | 第16页 |
| ·酶系和酶浓度对原生质体制备的影响 | 第16页 |
| ·酶解时间对原生质体制备的影响 | 第16页 |
| ·温度对原生质体制备的影响 | 第16-17页 |
| ·pH值对原生质体制备的影响 | 第17页 |
| ·缓冲液和稳定剂对原生质体制备的影响 | 第17页 |
| ·酶解方式对原生质体制备的影响 | 第17页 |
| ·影响原生质体再生的因素 | 第17-19页 |
| ·培养基成分对原生质体再生的影响 | 第17-18页 |
| ·稳定剂对原生质体再生的影响 | 第18页 |
| ·酶解浓度和时间对原生质体再生的影响 | 第18页 |
| ·再生方式对原生质体再生的影响 | 第18页 |
| ·原生质体密度对原生质体再生的影响 | 第18-19页 |
| ·其他因素对原生质体再生的影响 | 第19页 |
| ·影响原生质体融合的因素 | 第19-20页 |
| ·融合剂PEG对原生质体融合的影响 | 第19页 |
| ·融合时间和温度对原生质体融合的影响 | 第19页 |
| ·融合菌株的亲和力对原生质体融合的影响 | 第19页 |
| ·无机离子对原生质体融合的影响 | 第19-20页 |
| 6.本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-25页 |
| 第二章 原生质体制备 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-27页 |
| ·菌体培养 | 第26页 |
| ·两菌株生长曲线的测定 | 第26页 |
| ·酶解前计数 | 第26页 |
| ·原生质体制备 | 第26页 |
| ·酶浓度对原生质体制备的影响 | 第26-27页 |
| ·酶解时间对原生质体制备的影响 | 第27页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第27页 |
| ·稳定剂对原生质体制备的影响 | 第27页 |
| ·pH值对原生质体制备的影响 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-32页 |
| ·生长曲线 | 第27-28页 |
| ·酶浓度对原生质体制备的影响 | 第28-29页 |
| ·酶解时间对原生质体制备的影响 | 第29-30页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第30-31页 |
| ·稳定剂对原生质体制备的影响 | 第31-32页 |
| ·pH值对原生质体制备的影响 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第三章 原生质体再生 | 第35-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·菌体培养 | 第36页 |
| ·酶解前计数 | 第36页 |
| ·原生质体制备和再生 | 第36页 |
| ·酶解时间对两菌株原生质体再生率的影响 | 第36页 |
| ·再生方式对两菌株原生质体再生的影响 | 第36-37页 |
| ·稳定剂对两菌株原生质体再生的影响 | 第37页 |
| ·Ca~(2+)对两菌株原生质体再生的影响 | 第37页 |
| ·Mg~(2+)对两菌株原生质体再生的影响 | 第37页 |
| ·L-色氨酸对两菌株原生质体再生的影响 | 第37页 |
| ·再生培养基放置时间对两菌株原生质体再生的影响 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·酶解时间对两菌株原生质体再生率的影响 | 第37-38页 |
| ·再生方式对两菌株原生质体再生的影响 | 第38-39页 |
| ·稳定剂对两菌株原生质体再生的影响 | 第39-40页 |
| ·Ca~(2+)对两菌株原生质体再生的影响 | 第40-41页 |
| ·Mg~(2+)对两菌株原生质体再生的影响 | 第41页 |
| ·L-色氨酸对两菌株原生质体再生的影响 | 第41-42页 |
| ·再生培养基放置时间对两菌株原生质体再生的影响 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第四章 遗传标记和原生质体融合 | 第44-53页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44-45页 |
| ·抗生素 | 第45页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·两菌株耐药性遗传标记筛选 | 第45-46页 |
| ·两菌株对不同抗生素耐药性比较 | 第45-46页 |
| ·抗硫酸妥布霉素KR突变菌株的筛选 | 第46页 |
| ·融合子筛选条件研究 | 第46-47页 |
| ·融合子筛选及遗传稳定性鉴定 | 第46页 |
| ·PEG分子量对原生质体融合的影响 | 第46页 |
| ·PEG浓度对原生质体融合的影响 | 第46-47页 |
| ·PEG处理时间对原生质体融合的影响 | 第47页 |
| ·融合温度对原生质体融合的影响 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·两菌株对不同抗生素耐药性比较 | 第47-48页 |
| ·融合子的筛选 | 第48-50页 |
| ·PEG分子量对原生质体融合的影响 | 第48-49页 |
| ·PEG浓度对原生质体融合的影响 | 第49页 |
| ·PEG处理时间对原生质体融合的影响 | 第49-50页 |
| ·融合温度对原生质体融合的影响 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| ·遗传标记筛选 | 第50页 |
| ·原生质体融合 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第五章 融合子的特性研究 | 第53-68页 |
| 1 材料与方法 | 第53-58页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·形态学特征及生理生化特征研究 | 第53-56页 |
| ·菌落特征 | 第53-54页 |
| ·形态学特征 | 第54页 |
| ·细菌的生理生化特性鉴定 | 第54-56页 |
| ·生物学特性研究 | 第56-58页 |
| ·抗软腐病效果 | 第56-57页 |
| ·不同发酵液对抑菌活性的影响 | 第56-57页 |
| ·不同温度对抑菌活性的影响 | 第57页 |
| ·不同pH值对抑菌活性的影响 | 第57页 |
| ·培养时间对抑菌活性的影响 | 第57页 |
| ·抗黑斑病效果 | 第57-58页 |
| ·不同发酵液对抑菌活性的影响 | 第57-58页 |
| ·发酵液含量对抑菌活性的影响 | 第58页 |
| ·不同温度对抑菌活性的影响 | 第58页 |
| ·不同pH值对抑菌活性的影响 | 第58页 |
| ·培养时间对抑菌活性的影响 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-66页 |
| ·形态学特征及生理生化特征 | 第58-60页 |
| ·菌落特征 | 第58页 |
| ·菌体大小 | 第58-59页 |
| ·革兰氏染色、鞭毛及芽孢染色结果 | 第59页 |
| ·生理生化特征 | 第59-60页 |
| ·融合子生物学特性研究 | 第60-66页 |
| ·抗软腐病效果 | 第60-63页 |
| ·不同发酵液对抑菌活性的影响 | 第60-61页 |
| ·不同培养温度对抑菌活性的影响 | 第61-62页 |
| ·不同pH值发酵液对抑菌活性的影响 | 第62页 |
| ·不同培养时间对抑菌活性的影响 | 第62-63页 |
| ·抗黑斑病效果 | 第63-66页 |
| ·不同发酵液对抑菌活性的影响 | 第63-64页 |
| ·发酵液含量对抑菌活性的影响 | 第64页 |
| ·不同培养温度对抑菌活性的影响 | 第64-65页 |
| ·不同pH值发酵液对抑菌活性的影响 | 第65-66页 |
| ·培养时间对抑菌活性的影响 | 第66页 |
| 3.讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| 第六章 全文总结 | 第68-69页 |
| 1 总结 | 第68页 |
| 2 结论 | 第68页 |
| 3 创新点 | 第68页 |
| 4 下一步工作设想 | 第68-69页 |
| 附图 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简介 | 第72页 |
