| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-28页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·研究背景 | 第13页 |
| ·海藻糖的生物学功能和特性 | 第13-16页 |
| ·海藻糖保护机制的四种假说 | 第16-17页 |
| ·“稳定态” | 第16页 |
| ·“优先结合” | 第16页 |
| ·“玻璃态” | 第16页 |
| ·“水替代” | 第16-17页 |
| ·海藻糖的检测 | 第17-19页 |
| ·薄层层析(TLC) | 第17页 |
| ·纸层析(PC) | 第17-18页 |
| ·高效液相色谱(HPLC) | 第18页 |
| ·蒽酮比色法 | 第18页 |
| ·气相色谱(GC) | 第18-19页 |
| ·酶法 | 第19页 |
| ·海藻糖的生产方法及研究进展 | 第19-25页 |
| ·微生物抽提法 | 第19-20页 |
| ·重组植物生产法 | 第20页 |
| ·微生物发酵法 | 第20-21页 |
| ·酶法合成海藻糖 | 第21-24页 |
| ·制备透性静息细胞生产海藻糖研究进展 | 第24-25页 |
| ·论文选题的背景、意义及思路 | 第25-28页 |
| ·透性化静息细胞制备海藻糖的意义 | 第25-26页 |
| ·论文的主要研究内容和任务 | 第26-28页 |
| 第2章 恶臭假单胞菌透性静息细胞的制备 | 第28-38页 |
| ·引言 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·菌种 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·菌种培养方法 | 第31页 |
| ·静息细胞的制备 | 第31页 |
| ·透性化细胞海藻糖合酶(粗酶液)的制备 | 第31-32页 |
| ·酶活的测定 | 第32页 |
| ·超声破碎细胞 | 第32页 |
| ·菌体量的测定 | 第32页 |
| ·海藻糖的检测方法 | 第32-34页 |
| ·实验结果和讨论 | 第34-37页 |
| ·最佳渗透剂的选择 | 第34-35页 |
| ·最佳渗透剂浓度和渗透时间的选择 | 第35页 |
| ·最佳渗透温度的选择 | 第35-36页 |
| ·细胞渗透效果的验证 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 透性静息细胞产酶条件和发酵工艺的优化 | 第38-54页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·菌种 | 第38页 |
| 3,2,2 主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·菌种培养方法 | 第39页 |
| ·透性化细胞海藻糖合酶(粗酶液)的制备 | 第39页 |
| ·酶活的测定 | 第39页 |
| ·菌体量的测定 | 第39页 |
| ·平板菌落计数 | 第39-40页 |
| ·海藻糖的检测方法 | 第40页 |
| ·发酵液中还原糖的检测方法 | 第40-41页 |
| ·实验结果和讨论 | 第41-53页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第41-46页 |
| ·碳源对酶活和菌体量的影响 | 第41-44页 |
| ·氮源对酶活和菌体量的影响 | 第44-45页 |
| ·无机盐对酶活和菌体量的影响 | 第45-46页 |
| ·发酵工艺的优化 | 第46-53页 |
| ·发酵温度对酶活和菌体量的影响 | 第46-47页 |
| ·发酵初始pH 对酶活和菌体量的影响 | 第47页 |
| ·转速对酶活和菌体量的影响 | 第47-48页 |
| ·装液量对酶活和菌体量的影响 | 第48-49页 |
| ·接种量对酶活和菌体量的影响 | 第49-50页 |
| ·种子培养时间的确定 | 第50页 |
| ·发酵终点的确定 | 第50-51页 |
| ·正交试验优化发酵工艺 | 第51-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第4章 渗透压对静息细胞的透性和酶活力的影响 | 第54-64页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·菌种 | 第54页 |
| 4,2,2 主要仪器 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·培养基 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-56页 |
| ·菌种培养方法 | 第55页 |
| ·静息细胞(细胞液)的制备 | 第55页 |
| ·透性化细胞海藻糖合酶(粗酶液)的制备 | 第55页 |
| ·酶活的测定 | 第55页 |
| ·细胞透性的计算 | 第55页 |
| ·菌体量的测定 | 第55-56页 |
| ·海藻糖的检测方法 | 第56页 |
| ·发酵液残糖测定 | 第56页 |
| ·环境扫描电镜观察菌体形态 | 第56页 |
| ·实验结果和讨论 | 第56-62页 |
| ·渗透压对细胞透性和酶活影响的发现 | 第56页 |
| ·渗透压对细胞透性和酶活影响的验证 | 第56-57页 |
| ·NaCl 流加浓度的优化 | 第57-58页 |
| ·NaCl 流加时间的优化 | 第58-59页 |
| ·NaCl 和KCl 对细胞透性和海藻糖合酶酶活的影响 | 第59-60页 |
| ·渗透压影响细胞透性和酶活机理的探讨 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 第5章 透性细胞海藻糖合酶酶反应工艺和其特性研究 | 第64-74页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·菌种 | 第64页 |
| 5,2,2 主要仪器 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·培养基 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·菌种培养方法 | 第64页 |
| ·粗酶液的制备 | 第64页 |
| ·酶活的测定 | 第64-65页 |
| ·海藻糖的检测方法 | 第65页 |
| ·实验结果和讨论 | 第65-72页 |
| ·酶催化工艺的优化 | 第65-70页 |
| ·酶反应pH 对酶活的影响 | 第65页 |
| ·震荡转速对酶活的影响 | 第65-66页 |
| ·酶反应温度对酶活的影响 | 第66-67页 |
| ·酶反应时间对酶活的影响 | 第67-68页 |
| ·麦芽糖浓度对海藻糖转化率的影响 | 第68-69页 |
| ·正交实验优化酶反应工艺 | 第69-70页 |
| ·透性化细胞海藻糖合酶的特性研究 | 第70-72页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第70页 |
| ·酶的底物特异性研究 | 第70-71页 |
| ·透性化海藻糖合酶保存的稳定性 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72-74页 |
| 第6章 结论和展望 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第74-75页 |
| ·恶臭假单胞菌透性静息细胞的制备 | 第74页 |
| ·透性静息细胞产酶条件和发酵工艺的优化 | 第74页 |
| ·渗透压对静息细胞的透性和酶活力的影响 | 第74-75页 |
| ·透性细胞海藻糖合酶酶反应工艺和其特性研究 | 第75页 |
| ·展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82页 |