英文缩略词及中文对照表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 引言 | 第14-34页 |
·辣椒疫霉菌研究进展 | 第14-18页 |
·辣椒疫病的发生危害及症状 | 第14-15页 |
·辣椒疫霉菌的形态特征 | 第15页 |
·辣椒疫霉菌的发病规律 | 第15页 |
·辣椒疫霉的发病原因 | 第15-16页 |
·与病残体的关系 | 第15页 |
·与环境因子的关系 | 第15-16页 |
·不同病菌菌株与致病性的关系 | 第16页 |
·其他因素 | 第16页 |
·辣椒疫病的防治技术 | 第16-18页 |
·农业防治 | 第16-17页 |
·物理防治 | 第17页 |
·化学防治 | 第17页 |
·生物防治 | 第17-18页 |
·辣椒疫霉菌的基因组学研究 | 第18页 |
·卵菌效应蛋白(effectors)的研究进展 | 第18-28页 |
·基因对基因假说 | 第19-20页 |
·效应蛋白的发现 | 第20页 |
·卵菌中效应蛋白的研究 | 第20-28页 |
·卵菌中效应蛋白的确认 | 第20-21页 |
·卵菌质外体效应蛋白的研究 | 第21-23页 |
·卵菌胞质效应蛋白的研究 | 第23-24页 |
·卵菌效应蛋白的特点 | 第24-27页 |
·卵菌效应蛋白的国内最新成果 | 第27-28页 |
·皱缩坏死蛋白(crinkling and necrosis protein)的研究进展 | 第28-29页 |
·皱缩坏死基因(CRN)的发现 | 第28页 |
·皱缩坏死基因(CRN)序列特点 | 第28页 |
·皱缩坏死基因(CRN)研究概况 | 第28-29页 |
·PVX 介导的农杆菌瞬时表达系统 | 第29-30页 |
·病毒载体的建立 | 第29页 |
·农杆菌概况 | 第29-30页 |
·农杆菌介导的瞬时表达 | 第30页 |
·转化农杆菌的方法 | 第30页 |
·基因沉默 | 第30-32页 |
·卵菌转化技术和基因沉默 | 第31页 |
·基因沉默类型 | 第31页 |
·基因沉默机制 | 第31-32页 |
·荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第32-33页 |
·实验目的及意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-53页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·常用的菌株、载体与质粒 | 第34页 |
·常用试剂 | 第34页 |
·相关耗材和仪器 | 第34-35页 |
·常用培养基及有关溶液的配制 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-53页 |
·生物信息学分析 | 第36-37页 |
·皱缩坏死蛋白基因的筛选 | 第36页 |
·筛选的序列进行在线比对 | 第36页 |
·信号肽预测 | 第36-37页 |
·基因克隆与分离 | 第37-40页 |
·提取辣椒疫霉菌丝RNA | 第37页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
·PCR 验证CRN 基因是否为真基因 | 第38-39页 |
·PcCRN1 基因的克隆 | 第39-40页 |
·同源性分析 | 第40页 |
·基因的初期表达量检测 | 第40-43页 |
·诱导游动孢子 | 第40-41页 |
·辣椒组织RNA 提取 | 第41页 |
·反转录cDNA 第一链的合成 | 第41页 |
·荧光定量PCR | 第41-43页 |
·基因保守位点的突变 | 第43页 |
·表达载体的构建 | 第43-48页 |
·PVX 表达载体的构建 | 第44-47页 |
·pHam34 载体的构建 | 第47-48页 |
·农杆菌瞬时表达 | 第48-49页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第48页 |
·液氮冻融法转化农杆菌 | 第48-49页 |
·农杆菌接种 | 第49页 |
·PEG 介导的原生质体转化 | 第49-53页 |
·辣椒疫霉的活化培养 | 第49页 |
·原生质体转化步骤 | 第49-51页 |
·RT-PCR 检测 | 第51页 |
·荧光定量PCR 检测 | 第51-52页 |
·致病性检测 | 第52页 |
·生物学性状观察 | 第52-53页 |
3 结果与讨论 | 第53-74页 |
·实验结果 | 第53-70页 |
·PcCRN1 和PcCRN2 生物信息学分析结果 | 第53-56页 |
·辣椒疫霉中CRN 基因的特点 | 第53-55页 |
·98651 和21733 信号肽预测 | 第55-56页 |
·基因克隆 | 第56-61页 |
·RT-PCR 验证 | 第56-57页 |
·基因克隆 | 第57-60页 |
·同源性分析 | 第60-61页 |
·辣椒疫霉菌中CRN 基因初期表达量 | 第61页 |
·保守位点的突变 | 第61-63页 |
·载体构建 | 第63-64页 |
·PVX 载体构建 | 第63-64页 |
·pHam34 载体构建 | 第64页 |
·农杆菌接种 | 第64-67页 |
·转化农杆菌验证 | 第64-65页 |
·农杆菌接种症状观察 | 第65-67页 |
·基因沉默 | 第67-70页 |
·原生质体的制备 | 第67-68页 |
·RT-PCR 验证 | 第68页 |
·荧光定量PCR 验证 | 第68-69页 |
·致病性检测 | 第69页 |
·形态学观察 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-74页 |
·基因的筛选和克隆 | 第70-71页 |
·初期表达水平检测 | 第71页 |
·PcCRN1 和 PcCRN2 及突变基因的功能体外检测 | 第71-72页 |
·PcCRN1 和 PcCRN2 的沉默 | 第72页 |
·植物免疫反应 | 第72-74页 |
4 结论与建议 | 第74-76页 |
·结论 | 第74-75页 |
·建议 | 第75-76页 |
5 参考文献 | 第76-84页 |
6 附录 | 第84-85页 |
7 致谢 | 第85-86页 |
8 攻读学位期间发表论文情况 | 第86-87页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第87页 |