| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-29页 |
| ·概述 | 第13-14页 |
| ·青霉素类抗生素概述 | 第13页 |
| ·氨苄青霉素概述 | 第13-14页 |
| ·牛奶中青霉素类抗生素残留的现状及危害 | 第14-17页 |
| ·牛奶中青霉素类抗生素残留的渠道 | 第14-15页 |
| ·牛奶中青霉素类抗生素残留的现状 | 第15-16页 |
| ·牛奶中氨苄青霉素残留的影响及危害 | 第16-17页 |
| ·对抗生素残留的管理 | 第17-18页 |
| ·国内外检测抗生素残留方法研究的现状 | 第18-21页 |
| ·微生物受阻检测法 | 第18-19页 |
| ·理化检测法 | 第19页 |
| ·免疫分析法 | 第19-20页 |
| ·ELISA技术在食品安全检测领域的应用概况 | 第20-21页 |
| ·ELISA方法两种重要试剂概述 | 第21-25页 |
| ·人工抗原 | 第21-23页 |
| ·单克隆抗体 | 第23-25页 |
| ·本课题的意义、主要研究内容和创新点 | 第25-29页 |
| ·本课题的意义 | 第25页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第25-28页 |
| ·本课题的创新点 | 第28-29页 |
| 第2章 AMP人工抗原的合成与鉴定 | 第29-48页 |
| ·概述 | 第29-30页 |
| ·实验试剂与器材 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器与材料 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-37页 |
| ·AMP人工抗原的合成 | 第31-32页 |
| ·抗原浓度的测定 | 第32页 |
| ·氨苄青霉素人工抗原的鉴定 | 第32-34页 |
| ·改良的BCA-紫外结合法测定AMP人工抗原偶联比 | 第34-36页 |
| ·免疫抗原最佳偶联条件的选择 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-47页 |
| ·氨苄青霉素人工抗原的鉴定 | 第37-41页 |
| ·改良BCA─紫外结合法测定AMP人工抗原偶联比 | 第41-44页 |
| ·免疫抗原最佳偶联条件的选择 | 第44-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| ·AMP人工抗原的制备 | 第47页 |
| ·改良BCA─紫外结合法测定AMP人工抗原的偶联比 | 第47页 |
| ·最佳偶联条件的选择 | 第47-48页 |
| 第3章 抗氨苄青霉素单克隆抗体的制备与鉴定 | 第48-67页 |
| ·概述 | 第48页 |
| ·试验试剂与器材 | 第48-50页 |
| ·试验试剂 | 第48-49页 |
| ·主要材料和仪器 | 第49-50页 |
| ·试验方法 | 第50-57页 |
| ·主要试剂的配制 | 第50页 |
| ·动物免疫 | 第50-52页 |
| ·细胞融合 | 第52-54页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选与克隆化培养 | 第54-55页 |
| ·阳性单克隆杂交瘤细胞的扩增与冻存 | 第55页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第55页 |
| ·腹水的纯化 | 第55-56页 |
| ·抗AMP单克隆抗体的鉴定 | 第56-57页 |
| ·实验结果与讨论 | 第57-65页 |
| ·抗原包被最适浓度及血清效价的测定结果 | 第57-58页 |
| ·小鼠血清敏感性测定结果 | 第58-59页 |
| ·杂交瘤细胞融合实验结果 | 第59-62页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第62-63页 |
| ·腹水纯化及浓度测定结果 | 第63页 |
| ·单抗腹水最佳抗原浓度及效价的测定结果 | 第63-64页 |
| ·抗AMP单抗敏感性测定(IC_(50)值)结果 | 第64页 |
| ·抗氨苄青霉素单克隆抗体特异性的测定(交叉反应)结果 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| ·动物免疫 | 第65-66页 |
| ·杂交瘤细胞筛选 | 第66页 |
| ·抗AMP单抗鉴定 | 第66-67页 |
| 第4章 牛奶中AMP残留ELISA检测方法的建立 | 第67-88页 |
| ·概述 | 第67页 |
| ·实验试剂与器材 | 第67-68页 |
| ·主要试剂 | 第67-68页 |
| ·主要仪器和材料 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-73页 |
| ·主要试剂的配制 | 第68-69页 |
| ·间接ELISA方法实验条件的优化 | 第69-71页 |
| ·AMP残留ELISA检测方法的建立 | 第71-72页 |
| ·牛奶中AMP残留间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第72-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-86页 |
| ·ELISA实验缓冲体系的选择 | 第73-74页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第74-75页 |
| ·封闭液的确定 | 第75-76页 |
| ·封闭时间的确定 | 第76-77页 |
| ·抗原抗体反应时间的确定 | 第77页 |
| ·酶标二抗反应时间的确定 | 第77-78页 |
| ·洗液中Tween-20浓度的确定 | 第78-79页 |
| ·显色终止时间的确定 | 第79-80页 |
| ·重新确定抗原抗体最佳反应浓度 | 第80-81页 |
| ·最佳抗原种类的确定 | 第81页 |
| ·AMP残留检测间接竞争ELISA竞争抑制标准曲线的建立 | 第81-82页 |
| ·灵敏度与最低检测线 | 第82-83页 |
| ·精确度 | 第83-84页 |
| ·牛奶中AMP残留检测ELISA竞争抑制标准曲线的建立 | 第84-85页 |
| ·灵敏度与最低检测线 | 第85页 |
| ·精确度 | 第85-86页 |
| ·加标回收实验 | 第86页 |
| ·本章小结 | 第86-88页 |
| ·对ELISA实验各条件的优化 | 第86-87页 |
| ·AMP残留检测间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第87页 |
| ·牛奶中AMP残留检测间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第87-88页 |
| 第五章 结论与展望 | 第88-91页 |
| ·结论 | 第88-89页 |
| ·展望 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-97页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第97页 |
