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沙棘几丁质酶基因的克隆和序列分析

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 文献综述第9-23页
   ·沙棘研究进展第9-13页
     ·沙棘概述第9-10页
     ·沙棘组成成分及作用第10-11页
     ·沙棘病虫害现状第11-13页
   ·植物几丁质酶研究进展第13-21页
     ·几丁质酶的分类第13页
     ·几丁质酶的结构第13-15页
     ·植物几丁质酶的特性第15-16页
     ·植物几丁质酶的生物学作用第16-18页
     ·植物几丁质酶基因表达调控第18-19页
     ·植物几丁质酶基因工程研究第19-21页
   ·本研究的目的和意义第21-23页
第二章 材料和方法第23-32页
   ·试验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·酶及生化试剂第23页
     ·PCR引物序列第23-24页
   ·试验方法第24-32页
     ·沙棘基因组DNA的提取(CTAB法)第24页
     ·病原真菌筛选第24-25页
     ·真菌悬浮液的制备第25页
     ·真菌胁迫沙棘植株第25页
     ·牛津杯法测几丁质酶的抗真菌活性第25-26页
     ·粗酶液的制备第26页
     ·几丁质酶的初步纯化第26页
     ·沙棘RNA的提取(Trizol法和抽提试剂盒)第26-27页
     ·电泳检测RNA第27页
     ·设计沙棘几丁质酶基因片段兼并引物第27页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶基因中间片段的分离第27-28页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶基因的旁侧片段的分离第28-29页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶基因全长的分离第29-30页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因中间片段的分离第30-31页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因的旁侧片段的分离第31页
     ·从琼脂糖凝胶中回收目的片段的PCR产物并测序第31-32页
第三章 结果与分析第32-72页
   ·沙棘干缩病病原菌及几丁质酶蛋白抑菌试验第32-34页
   ·沙棘基因组DNA的提取第34页
   ·沙棘总RNA的提取第34-35页
   ·沙棘几丁质酶基因引物的设计第35-37页
   ·RT-PCR对沙棘ClassIII几丁质酶基因中间片段的分离第37-39页
   ·反向PCR对沙棘ClassIII几丁质酶基因旁侧片段的分离第39-43页
   ·沙棘ClassIII几丁质酶基因全长DNA及cDNA的克隆第43-45页
   ·沙棘ClassIII几丁质酶基因的氨基酸序列第45-46页
   ·RT-PCR对沙棘ClassI几丁质酶基因中间片段的分离第46-48页
   ·反向PCR对沙棘ClassI几丁质酶基因旁侧片段的分离第48-50页
   ·沙棘ClassI几丁质酶基因的氨基酸序列第50-51页
   ·沙棘ClassIII几丁质酶蛋白的几个性质第51-60页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶核苷酸序列分析第51-52页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶氨基酸序列组成分析第52-54页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶蛋白的功能区第54-55页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶基因的跨膜螺旋信号分析第55-57页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶蛋白二级结构的预测第57-58页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶蛋白三级结构的预测第58-59页
     ·沙棘ClassIII几丁质酶基因氨基酸序列同源性聚类分析第59-60页
   ·沙棘ClassI几丁质酶蛋白的几个性质第60-69页
     ·沙棘ClassI几丁质酶核苷酸序列分析第60-62页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因氨基酸组成分析第62-63页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因的功能区第63-65页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因的跨膜螺旋信号分析第65-67页
     ·沙棘ClassI几丁质酶蛋白二级结构的预测第67-68页
     ·沙棘ClassI几丁质酶蛋白三级结构的预测第68-69页
     ·沙棘ClassI几丁质酶基因氨基酸序列同源性聚类分析第69页
   ·几丁质酶基因系统发育树第69-72页
第四章 讨论第72-77页
   ·沙棘几丁质酶蛋白的抑菌效果第72页
   ·基因克隆第72-74页
   ·沙棘几丁质酶基因的序列分析第74-75页
   ·沙棘总RNA提取第75-76页
   ·沙棘基因组DNA提取第76-77页
第五章 结论第77-79页
参考文献第79-86页
作者简介及发表文章目录第86-87页
致谢第87页

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