| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 前言 | 第12-32页 |
| 1 哈维氏弧菌的研究进展 | 第12-16页 |
| ·哈维氏弧菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·分类地位与形态 | 第12页 |
| ·生长与栖息环境 | 第12页 |
| ·培养特性 | 第12-13页 |
| ·哈维氏弧菌的致病性 | 第13-14页 |
| ·哈维氏弧菌的致病机制 | 第14-15页 |
| ·哈维氏弧菌的防治 | 第15-16页 |
| 2 活性氧（ROS）和抗氧化系统 | 第16-21页 |
| ·活性氧的分类 | 第16-17页 |
| ·活性氧的来源 | 第17-18页 |
| ·活性氧的生物学功能 | 第18页 |
| ·活性氧对机体的损伤 | 第18-19页 |
| ·抗氧化系统 | 第19-21页 |
| 3 超氧化物歧化酶的研究进展 | 第21-30页 |
| ·超氧化物歧化酶的发现与命名 | 第21页 |
| ·超氧化物歧化酶的种类与分布 | 第21-22页 |
| ·超氧化物歧化酶的理化特性 | 第22-23页 |
| ·超氧化物歧化酶的分子结构 | 第23-24页 |
| ·超氧化物歧化酶的活性测定 | 第24-26页 |
| ·超氧化物歧化酶的生物学功能 | 第26-27页 |
| ·超氧化物歧化酶修饰改造的研究进展 | 第27-30页 |
| ·超氧化物歧化酶的修饰改造 | 第27-29页 |
| ·修饰改造后酶的特性 | 第29-30页 |
| 4 本论文研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-33页 |
| ·培养基和配制 | 第33页 |
| ·试剂和仪器 | 第33-34页 |
| ·哈维氏弧菌SF-1 的sod 基因的克隆与序列分析 | 第34-38页 |
| ·哈维氏弧菌基因组DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·引物设计及合成 | 第35页 |
| ·PCR 扩增哈维氏弧菌sod 基因 | 第35页 |
| ·PCR 扩增产物的检测和纯化 | 第35-36页 |
| ·质粒与DNA 连接 | 第36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·重组质粒的转化 | 第36-37页 |
| ·碱裂解法提取克隆质粒 | 第37-38页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·超氧化物歧化酶的原核表达，纯化与检测 | 第38-42页 |
| ·超氧化物歧化酶表达质粒构建 | 第38-39页 |
| ·sod 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39页 |
| ·从菌体中纯化SOD | 第39页 |
| ·从培养上清液中纯化SOD | 第39页 |
| ·Ni 琼脂糖亲和柱亲和层析 | 第39-40页 |
| ·Ni 琼脂糖的处理与再生 | 第40页 |
| ·表达蛋白的纯度鉴定-SDS-PAGE 检测 | 第40-41页 |
| ·表达蛋白的含量测定 | 第41-42页 |
| ·超氧化物歧化酶的性质 | 第42-43页 |
| ·表达超氧化物歧化酶的活性测定 | 第42页 |
| ·超氧化物歧化酶的吸收光谱测定 | 第42页 |
| ·超氧化物歧化酶的类型鉴定 | 第42-43页 |
| ·pH 对超氧化物歧化酶活力的影响 | 第43页 |
| ·温度对超氧化物歧化酶活力的影响 | 第43页 |
| ·大菱鲆的免疫和感染实验 | 第43-44页 |
| ·大菱鲆的准备 | 第43页 |
| ·感染菌液和免疫佐剂的准备 | 第43页 |
| ·纯化蛋白免疫大菱鲆 | 第43-44页 |
| ·大菱鲆血清样品的制备 | 第44页 |
| ·人工感染和免疫保护率的测定 | 第44页 |
| ·重组蛋白的免疫学活性分析-Western blotting | 第44-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-54页 |
| ·超氧化物歧化酶基因克隆与序列分析 | 第46-48页 |
| ·sod 基因的PCR 扩增 | 第46页 |
| ·sod 基因的序列分析 | 第46-48页 |
| ·哈维氏弧菌sod 基因的原核表达与纯化 | 第48-50页 |
| ·sod 基因表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·SOD 蛋白的检测与纯化 | 第49-50页 |
| ·超氧化物歧化酶的性质 | 第50-52页 |
| ·超氧化物歧化酶的类型鉴定 | 第50页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·pH 对酶活性的影响 | 第51-52页 |
| ·大菱鲆的免疫和攻毒 | 第52-54页 |
| ·大菱鲆免疫保护率的测定 | 第52页 |
| ·重组蛋白的Western Blot 检测 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 4 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 溶液配方 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |