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番茄抗叶霉病分子机理及抗病相关基因分离技术体系的建立

致谢第1-10页
缩写词(Abbreviation)第10-13页
摘要第13-15页
Abstract第15-18页
前言第18-22页
1 文献综述第22-40页
   ·番茄与叶霉菌互作机理的研究进展第22-29页
     ·番茄和C.fulvum的亲和互作第22页
     ·番茄和C.fulvum的非亲和互作第22页
     ·C.fulvum的致病性和毒性因子第22-23页
     ·番茄和C.fulvum非亲和互作的分子生物学第23-29页
   ·cDNA-AFLP技术的原理及其应用第29-33页
     ·cDNA-AFLP技术的原理与方法第30页
     ·cDNA-AFLP技术的优点第30-31页
     ·cDNA-AFLP技术的应用第31-33页
     ·cDNA-AFLP技术的发展第33页
   ·病毒诱导基因沉默的原理、方法与应用第33-40页
     ·VIGS作用的机理第33-34页
     ·VIGS技术的发展第34-35页
     ·VIGS操作方法及其关键影响因子第35-36页
     ·VIGS技术的优点第36-37页
     ·VIGS技术在植物病理学研究中的应用第37-40页
2 Avr/Cf基因型番茄苗降温处理后过敏性坏死的显微观察第40-46页
   ·材料与方法第40-41页
     ·植株培养及采样第40-41页
     ·锥虫蓝染色第41页
   ·结果与分析第41-44页
   ·讨论第44-46页
3 番茄Cf-4和Cf-9介导的抗病信号传导途径相关基因表达的cDNA-AFLP分析第46-98页
   ·材料与方法第47-55页
     ·植株培养及取样第47页
     ·总RNA提取第47-48页
     ·cDNA-AFLP第48-51页
     ·差异表达片段的回收、克隆与测序第51-52页
     ·Reverse Northern杂交分析第52-53页
     ·Northern杂交分析第53页
     ·差异表达片段全长cDNA序列的扩增第53-55页
     ·序列分析第55页
   ·结果与分析第55-83页
     ·不同基因型番茄幼苗产生HR的情况第55页
     ·cDNA合成及预扩第55页
     ·cDNA-AFLP差异显示第55-56页
     ·差异TDFs的克隆、测序和序列分析第56-57页
     ·差异表达片段的Reverse Northern检测第57-61页
     ·典型差异表达片段的Northern验证第61页
     ·部分差异片段全长序列获取以及序列分析第61-73页
     ·差异片段全长序列分析第73-83页
   ·讨论第83-98页
     ·Cf-4和Cf-9信号传导途径的比较第83页
     ·Cf-4和Cf-9介导的抗病性激发的基因转录本积累水平改变第83页
     ·适合cDNA-AFLP分析的HR产生材料系统第83-84页
     ·通过cDNA-AFLP分析植物抗病性的优点第84页
     ·番茄EST资源的利用第84-98页
4 HR和逆境条件下ACI29的表达分析第98-102页
   ·材料与方法第98-99页
     ·植株培养及取样第98页
     ·总RNA提取第98页
     ·Northern杂交第98-99页
   ·结果与分析第99-100页
     ·ACI29在Avr9、Cf-9、Avr4或Cf-4番茄苗中的表达差异第99页
     ·ACI29在不同胁迫处理后的表达有显著差异第99-100页
   ·讨论第100-102页
     ·ACI29基因可能与植株发育有关并参与Cf介导的HR的调控第100页
     ·ACI29可能参与对胁迫反应的调节第100-102页
5 差异表达片段TDF29和TDF14的基因沉默分析第102-106页
   ·材料与方法第102-103页
     ·重组pYL156基因沉默载体的构建第102-103页
     ·农杆菌接种和接种后植株的培养第103页
   ·结果与分析第103-104页
   ·讨论第104-106页
6 番茄发育过程中互补无毒基因和温度对抗叶霉菌基因Cf-9和Cf-4表达的影响第106-112页
   ·材料与方法第106页
     ·植株培养及取样第106页
     ·总RNA提取第106页
     ·Northern杂交第106页
   ·结果与分析第106-108页
   ·讨论第108-112页
     ·Avr9基因和温度显著影响Cf-9基因的表达第109页
     ·在植株不同发育时期,温度对Cf-9基因和Cf-4基因表达的影响程度不同第109页
     ·无毒基因对Cf-9和Cf-4表达的影响程度不同第109-110页
     ·Cf基因表达与Avr/Cf番茄幼苗中HR的产生和发展呈密切正相关第110-112页
结论第112-114页
参考文献第114-122页

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