枯草芽孢杆菌B11菌株拮抗物质的生物合成基因的克隆及鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·芽孢杆菌与植物病害生物防治 | 第10-11页 |
| ·枯草芽孢杆菌产生的抗菌物质及其生物合成基因 | 第11-15页 |
| ·枯草芽孢杆菌及其产生的抗菌物质 | 第11-13页 |
| ·枯草芽孢杆菌抗生素的生物合成基因 | 第13-15页 |
| ·抗生素生物合成基因的克隆方法 | 第15-18页 |
| ·基因组文库筛选法 | 第15-17页 |
| ·常用的基因文库筛选方法 | 第17-18页 |
| ·其它的抗生素生物合成基因克隆方法 | 第18页 |
| ·本工作的基础和目的 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-43页 |
| ·材料 | 第20-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第20-22页 |
| ·菌种保存 | 第22-23页 |
| ·培养基、培养条件和抗生素 | 第23-25页 |
| ·常规溶液、缓冲液、酶及试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-43页 |
| ·总 DNA的提取 | 第26-28页 |
| ·质粒的提取 | 第28-30页 |
| ·质粒 DNA的纯化、定量与沉淀 | 第30-31页 |
| ·DNA的酶切、电泳及 DNA片段浓度测算 | 第31-32页 |
| ·总 DNA的部分消化 | 第32-33页 |
| ·DNA片段的回收 | 第33-34页 |
| ·载体的脱磷酸化 | 第34-35页 |
| ·DNA连接 | 第35页 |
| ·质粒 DNA以及 DNA连接产物的转化 | 第35-38页 |
| ·PCR反应 | 第38页 |
| ·Cosmid文库的构建和筛选 | 第38-41页 |
| ·拮抗物质基因的鉴定 | 第41-42页 |
| ·拮抗物质的提取 | 第42页 |
| ·拮抗活性检测 | 第42-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-63页 |
| ·基因文库的构建 | 第43-45页 |
| ·枯草芽孢杆菌菌株 B11总 DNA的提取 | 第44-45页 |
| ·菌株 B11文库的构建 | 第45页 |
| ·文库的筛选 | 第45-47页 |
| ·克隆 GXN9527的抗菌谱分析 | 第47-48页 |
| ·拮抗物质生物合成基因的克隆与鉴定 | 第48-63页 |
| ·pGXN9527的一级亚克隆及分析 | 第48-50页 |
| ·pGXN9527的二级亚克隆及分析 | 第50-53页 |
| ·序列拼接 | 第53-55页 |
| ·填补缺口和 PCR验证 | 第55-57页 |
| ·与拮抗物质生物合成相关的基因序列分析 | 第57-63页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录:参与的科研、取得的成果和发表的文章 | 第78页 |
