| 第1章 前言 | 第1-22页 |
| ·细胞因子的简介 | 第7-10页 |
| ·细胞因子的产生 | 第7页 |
| ·结构特点 | 第7-8页 |
| ·细胞因子的应用 | 第8-10页 |
| ·IL-18 的相关生物学背景 | 第10-20页 |
| ·发现及命名 | 第10-11页 |
| ·IL-18 的来源及在不同组织中的分布 | 第11页 |
| ·分子结构及生物学功能 | 第11-14页 |
| ·IL-18 的信号传导途径 | 第14-16页 |
| ·重组IL-18 的纯化与安全性 | 第16-17页 |
| ·IL-18 的临床应用前景 | 第17-20页 |
| ·本论文设计的构思 | 第20-22页 |
| ·本论文的立题依据 | 第20-21页 |
| ·实验程序 | 第21-22页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第22-37页 |
| ·材料、仪器和试剂 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·常用试剂配制 | 第23-26页 |
| ·方法 | 第26-37页 |
| ·质粒的小量提取 | 第26-27页 |
| ·限制性内切酶作用 | 第27页 |
| ·PCR | 第27-28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·大肠杆菌E.coli 感受态的制备 | 第28-29页 |
| ·连接产物转化E.coli 感受态细胞 | 第29页 |
| ·酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30页 |
| ·大肠杆菌表达的预实验 | 第30-32页 |
| ·Western Blot | 第32页 |
| ·重组质粒的大量表达 | 第32-33页 |
| ·样品纯化前处理 | 第33页 |
| ·His Trap 柱亲和层析 | 第33-34页 |
| ·阴离子交换层析 | 第34页 |
| ·Sephacryl S-100 柱层析 | 第34-35页 |
| ·纯化蛋白的复性 | 第35页 |
| ·BCA 法定量检测蛋白浓度 | 第35-37页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第37-69页 |
| ·人白细胞介素18 基因的设计合成和克隆 | 第37-40页 |
| ·白细胞介素18 基因的设计 | 第37-39页 |
| ·hIL-18 基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·表达载体的构建和鉴定 | 第40-46页 |
| ·pET206(+)/IL-18 质粒的构建和鉴定 | 第40-43页 |
| ·pPL450/IL-18 表达载体的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| ·pBV220/IL-18 载体的构建和鉴定 | 第44-46页 |
| ·重组hIL-18 的表达及鉴定 | 第46-49页 |
| ·最适表达载体的选择 | 第46-48页 |
| ·最佳诱导时间的选择 | 第48-49页 |
| ·同一表达载体不同基因的表达量比较 | 第49页 |
| ·rhIL-18 的分离纯化 | 第49-54页 |
| ·包涵体的提取 | 第50页 |
| ·包涵体的洗涤和溶解 | 第50-51页 |
| ·包涵体蛋白的纯化 | 第51-54页 |
| ·hIl-18 多克隆抗体的制备 | 第54-58页 |
| ·pRSETB(his)/IL-18 质粒的构建 | 第54-56页 |
| ·IL-18 蛋白的表达和纯化 | 第56-57页 |
| ·hIL-18 抗体的获得 | 第57-58页 |
| ·结论 | 第58-69页 |
| 中文摘要 | 第69-71页 |
| Abstract | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |