中文摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
引言 | 第16-36页 |
1 问题的提出 | 第16页 |
2 植物自交不亲和性研究进展 | 第16-34页 |
·植物自交不亲和性分类 | 第16-18页 |
·孢子体自交不亲和性研究进展 | 第18-19页 |
·配子体自交不亲和性研究进展 | 第19-28页 |
·罂粟属信号介导的自交不亲和性研究进展 | 第19-20页 |
·S-RNase 系统 SI 的雌蕊 S-基因研究进展 | 第20-24页 |
·S-RNase 系统 SI 的花粉 S-基因研究进展 | 第24-28页 |
·与自交不亲和相关的非 S-因子研究进展 | 第28-31页 |
·自交不亲和性的起源与进化 | 第31页 |
·蔷薇科果树及杏自交不亲和性研究进展 | 第31-34页 |
3 本研究的内容及目标 | 第34-36页 |
第一章 杏自交不亲和性相关生理特性研究 | 第36-44页 |
·材料与方法 | 第36-38页 |
·试验材料 | 第36页 |
·自交亲和性的田间鉴定 | 第36页 |
·花粉采集及发芽力的测定 | 第36页 |
·荧光显微镜观察花粉管生长 | 第36-37页 |
·可溶性蛋白含量的测定 | 第37页 |
·制作 BSA 蛋白含量标准曲线图和测定花柱可溶蛋白含量 | 第37页 |
·花柱 RNA 酶酶活力检测 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·自花授粉坐果率调查 | 第38-39页 |
·花粉发芽率 | 第39页 |
·荧光显微镜观察花粉萌发和花粉管生长状况 | 第39-40页 |
·气球期花柱蛋白含量 | 第40-41页 |
·气球期花柱蛋白 RNA 酶比活力 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·RNA 酶比活力与花粉管生长的关系 | 第41-42页 |
·花柱中 RNase 活性与自交不亲和性 | 第42页 |
·结论 | 第42-44页 |
第二章 自交不亲和性相关S-RNase 基因的检测及表达 | 第44-59页 |
·材料与方法 | 第44-48页 |
·试验材料 | 第44页 |
·基因组DNA 提取 | 第44页 |
·花柱RNA 的提取 | 第44-45页 |
·S-等位基因专一性PCR 扩增 | 第45-46页 |
·S-RNase 基因特异片段的克隆及序列分析 | 第46-48页 |
·连接反应 | 第46页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆的筛选测序 | 第47页 |
·序列分析 | 第47-48页 |
·实时荧光定量RT-PCR | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-55页 |
·凯特与新世纪S-RNase 基因的检测 | 第48-49页 |
·凯特与新世纪S-RNase 基因的RT-PCR 检测 | 第49页 |
·凯特、新世纪S-RNase 基因的核苷酸序列 | 第49-50页 |
·检测的新 S-RNase 基因推导的氨基酸序列及与已知的蔷薇科李属 S-RNase 基因的进化关系 | 第50-53页 |
·杏 S-RNase 基因在不同发育阶段转录水平表达特性 | 第53-54页 |
·S-RNase 基因在花柱各部位转录表达特性 | 第54页 |
·授粉对S-RNase 基因转录表达的影响 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
·关于杏S-RNase 基因的特异引物 | 第55页 |
·关于凯特 S-RNase 杏一条带的问题 | 第55-56页 |
·凯特、新世纪 S-RNase 基因的序列特征 | 第56页 |
·关于蔷薇科果树 S-RNase 基因的系统进化 | 第56页 |
·实时荧光定量PCR技术与S-RNase基因的表达 | 第56-57页 |
·关于自交亲和与不亲和杏 S-RNase 基因的表达模式 | 第57页 |
·授粉对自交不亲和性 S-RNase 基因转录水平表达模式的影响 | 第57-58页 |
·结论 | 第58-59页 |
第三章 杏杂种 F1代自交不亲和性差异的分子机理研究 | 第59-79页 |
·材料与方法 | 第59-62页 |
·试验材料 | 第59页 |
·基因组 DNA 提取 | 第59页 |
·花柱RNA 的提取 | 第59页 |
·S-等位基因专一性 PCR 扩增 | 第59页 |
·S-RNase 基因特异片段的克隆及序列分析 | 第59-60页 |
·实时荧光定量 RT-PCR | 第60页 |
·花柱蛋白的提取 | 第60页 |
·双向电泳及图像分析 | 第60-61页 |
·差异蛋白质点的酶解 | 第61页 |
·差异蛋白质点的鉴定 | 第61-62页 |
·结果与分析 | 第62-73页 |
·杏杂种F1 代S 基因型的鉴定 | 第62页 |
·凯特、新世纪及6 株F1 代S 基因m RNA 表达量的实时检测 | 第62-64页 |
·完全自交不亲和杏29 号自花与异花授粉后花柱蛋白质组比较 | 第64-67页 |
·完全自交不亲和杏29 号与自交亲和杏23 号自花授粉后花柱蛋白质组比较 | 第67-71页 |
·杏杂种29 号、23 号亲和与不亲和授粉后 S-RNase 表达量比较 | 第71-72页 |
·杏亲和与不亲和授粉后雌蕊差异蛋白质分析 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-76页 |
·S-基因转录表达量与自交不亲和性的相关性 | 第73页 |
·蛋白质组水平研究自交不亲和性的意义 | 第73-74页 |
·LC-ESI-MS/MS 检测差异蛋白的局限性 | 第74页 |
·鉴定的点表观分子量、等电点与理论计算值的偏差 | 第74页 |
·可能与自交不亲和性相关的差异蛋白. | 第74-75页 |
·其它差异蛋白在自交不亲和反应中可能的功能 | 第75-76页 |
·结论 | 第76-79页 |
小结 | 第79-82页 |
1 本论文的主要结论 | 第79-80页 |
2 本论文的主要创新点 | 第80-81页 |
3 下一步的工作设想 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-101页 |
附录 | 第101-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第105-106页 |