| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-26页 |
| ·番茄病毒病危害现状 | 第15-16页 |
| ·防治番茄病毒病的方法 | 第16页 |
| ·抗病毒基因工程主要策略研究进展 | 第16-19页 |
| ·病毒来源基因介导的病毒病抗性 | 第16-18页 |
| ·非病毒来源基因介导的病毒抗性 | 第18-19页 |
| ·利用同源序列分离植物抗病基因研究进展 | 第19-24页 |
| ·抗病基因(R gene)研究进展 | 第19-21页 |
| ·抗病基因类似序列(RGA)研究进展 | 第21-24页 |
| ·酶活性变化与植物抗病性关系的研究概况 | 第24页 |
| ·同工酶在蔬菜病理研究中的应用 | 第24-25页 |
| ·cDNA文库的作用及研究进展 | 第25-26页 |
| 第2章 引言 | 第26-29页 |
| ·研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| ·主要研究内容 | 第27页 |
| ·番茄材料抗ToMV的田间筛选鉴定 | 第27页 |
| ·番茄材料抗ToMV的室内接种及其生化分析鉴定 | 第27页 |
| ·番茄材料RAPD聚类分析 | 第27页 |
| ·构建抗ToMV番茄cDNA文库 | 第27页 |
| ·番茄材料RGA分析 | 第27页 |
| ·采用的技术路线 | 第27-29页 |
| ·实验步骤 | 第27页 |
| ·技术路线 | 第27-29页 |
| 第3章 材料与方法 | 第29-53页 |
| ·番茄抗ToMV材料的田间筛选 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试验和筛选方法 | 第29-30页 |
| ·室内ToMV接种鉴定 | 第30-31页 |
| ·材料及其播种 | 第30页 |
| ·供试ToMV病毒源与接种方法 | 第30-31页 |
| ·生化指标测定 | 第31-34页 |
| ·不同pH提取液对POD和PPO活力的影响 | 第31-32页 |
| ·PPO最佳波长和最佳反应时间的选择 | 第32页 |
| ·接种与未接种ToMV番茄材料POD、PPO活性测定 | 第32页 |
| ·接种与未接种ToMV番茄材料PAL酶液提取及活性测定 | 第32页 |
| ·酶比活力计算 | 第32页 |
| ·不同凝胶浓度POD和PPO同工酶电泳 | 第32-34页 |
| ·接种与未接种ToMV番茄材料POD和PPO同工酶电泳 | 第34页 |
| ·抗ToMV番茄cDNA文库构建 | 第34-47页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·方法 | 第36-47页 |
| ·番茄材料遗传多样性RAPD分析 | 第47-49页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·抗病基因类似物(RGA)的分离鉴定 | 第49-53页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| 第4章 结果与分析 | 第53-77页 |
| ·番茄材料田间ToMV抗性比较 | 第53-54页 |
| ·番茄生长发育状况 | 第53页 |
| ·番茄材料田间ToMV抗性比较 | 第53-54页 |
| ·室内接种ToMV和生化鉴定 | 第54-66页 |
| ·苗期接种ToMV发病率调查 | 第54-55页 |
| ·苗期接种ToMV病情指数调查 | 第55-56页 |
| ·POD和PPO反应适宜发件 | 第56-58页 |
| ·番茄材料POD同工酶分析 | 第58-59页 |
| ·POD活性与ToMV抗病性的关系 | 第59-60页 |
| ·PPO活性与ToMV抗病性的关系 | 第60-62页 |
| ·PAL活性与抗病性的关系 | 第62-63页 |
| ·同工酶电泳结果分析 | 第63-66页 |
| ·抗ToMV番茄cDNA文库构建 | 第66-70页 |
| ·RNA提取 | 第67页 |
| ·mRNA分离 | 第67页 |
| ·cDNA合成和文库构建 | 第67-69页 |
| ·原库滴度及重组率测定 | 第69页 |
| ·cDNA文库的扩增及扩增文库滴度测定 | 第69-70页 |
| ·番茄材料RAPD分析 | 第70-75页 |
| ·模板DNA提取效果 | 第70-71页 |
| ·引物筛选 | 第71-72页 |
| ·RAPD标记的多态性分析 | 第72页 |
| ·遗传距离和树型分析 | 第72-74页 |
| ·供试番茄材料的遗传变异特性 | 第74-75页 |
| ·番茄RGA的PCR扩增 | 第75-77页 |
| ·简并引物的设计 | 第75页 |
| ·番茄基因组DNA RGA的PCR扩增效果 | 第75-77页 |
| 第5章 讨论 | 第77-90页 |
| ·番茄材料田间抗病性和室内接种ToMV抗病性鉴定 | 第77页 |
| ·番茄材料生化特性与ToMV抗病性 | 第77-79页 |
| ·POD和PPO反应最佳条件 | 第77页 |
| ·POD与番茄材料ToMV抗性的关系 | 第77-78页 |
| ·PPO与番茄材料ToMV抗病性的关系 | 第78页 |
| ·PAL与番茄材料ToMV抗病性的关系 | 第78-79页 |
| ·不同分离胶浓度对电泳效果的影响 | 第79页 |
| ·POD和PPO同工酶与番茄材料ToMV抗病性的关系 | 第79页 |
| ·抗ToMV番茄cDNA文库构建 | 第79-84页 |
| ·RAN的提取 | 第79-80页 |
| ·cDNA的合成 | 第80-81页 |
| ·XL1-Blue MRF‘菌株的特点 | 第81-82页 |
| ·铺盘噬菌体细胞的生长 | 第82页 |
| ·用IPTG和X-gal选择重组体 | 第82页 |
| ·辅助噬菌体及其贮存 | 第82-83页 |
| ·cDNA文库构建和扩增 | 第83-84页 |
| ·番茄材料RAPD分析 | 第84-86页 |
| ·DNA提取 | 第84页 |
| ·RAPD技术的可靠性 | 第84-85页 |
| ·RAPD标记带中的强带和弱带 | 第85页 |
| ·对照中出现的带 | 第85-86页 |
| ·番茄材料遗传多样性 | 第86页 |
| ·RAG分析 | 第86-90页 |
| ·同源序列简并引物的设计 | 第86页 |
| ·同源序列法分离RGA | 第86-88页 |
| ·同源序列法分析的优越性、稳定性和重复性 | 第88-89页 |
| ·同源序列法分离RGA的意义 | 第89-90页 |
| 第6章 结论 | 第90-93页 |
| ·番茄材料ToMV抗性分类 | 第90页 |
| ·氧化酶最佳反应条件研究 | 第90页 |
| ·氧化酶活性与抗病性关系 | 第90页 |
| ·POD和PPO同工酶与ToMV抗性关系 | 第90-91页 |
| ·抗ToMV番茄cDNA文库构建 | 第91页 |
| ·RAPD分析 | 第91-92页 |
| ·RAG分析 | 第92-93页 |
| 第7章 研究的创新点和需进一步研究的内容 | 第93-94页 |
| ·研究的创新点 | 第93页 |
| ·需进一步研究的内容 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 附录1： | 第102-104页 |
| 附录2： | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 在读期间发表论文及承担科研课题 | 第107页 |
