| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-22页 |
| ·嗜盐微生物 | 第9-11页 |
| ·未培养微生物 | 第11-18页 |
| ·从未培养微生物DNA文库克隆淀粉酶基因 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-40页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·菌种保存 | 第22-23页 |
| ·培养基、培养条件和抗生素 | 第23-24页 |
| ·溶液、缓冲液和试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·质粒提取 | 第25-28页 |
| ·质粒DNA的纯化、定量与沉淀 | 第28-29页 |
| ·电泳 | 第29页 |
| ·DNA酶切 | 第29-30页 |
| ·DNA酶切片段的分离与回收 | 第30-32页 |
| ·DNA的连接 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第33-34页 |
| ·环境未培养微生物总DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·环境总DNA的纯化 | 第35-36页 |
| ·metagenomic Cosmid文库的构建 | 第36-37页 |
| ·文库的筛选(淀粉酶活性) | 第37-38页 |
| ·酶活测定方法 | 第38-40页 |
| 第三章 DNA的提取和纯化方法研究 | 第40-49页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·DNA的提取 | 第40-42页 |
| ·DNA的纯化 | 第42-44页 |
| ·DNA的提纯最佳方案 | 第44-45页 |
| ·DNA的提取质量 | 第45页 |
| ·对提纯的总DNA进行16SrDNA基因的序列分析 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第47-49页 |
| 第四章 metagenomic文库的构建 | 第49-53页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·构建metagenomic library | 第49-51页 |
| ·部分转化子双向测序结果和分析 | 第51页 |
| ·结论 | 第51-53页 |
| 第五章 淀粉酶基因的筛选及基因定位 | 第53-61页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·淀粉酶活性筛选文库 | 第53-54页 |
| ·淀粉酶基因的序列测定与分析 | 第54-59页 |
| ·结论 | 第59-61页 |
| 第六章 淀粉酶的特性研究 | 第61-66页 |
| ·前言 | 第61页 |
| ·amy14基因在大肠杆菌中的表达 | 第61-62页 |
| ·粗酶液的制备 | 第62页 |
| ·酶学特性分析 | 第62-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第七章 总结与讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第75页 |