摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 绪论 | 第9-22页 |
·白桦简介 | 第9-10页 |
·白桦的分类地位 | 第9页 |
·白桦地理分布 | 第9页 |
·白桦的经济作用 | 第9-10页 |
·白桦转基因研究的意义 | 第10页 |
·转基因植物中外源基因的整合特性 | 第10-14页 |
·外源基因在转基因植物中的整合方式及结构变化的多样性 | 第11-12页 |
·不同的整合方式对外源基因表达的影响 | 第12-14页 |
·转基因整合方式的研究策略 | 第14-17页 |
·Southern blot分析 | 第14-15页 |
·rpPCR(reverse primer polymerase chain reaction) | 第15-16页 |
·外源基因旁侧序列的克隆及测定 | 第16-17页 |
·外源基因的整合机制 | 第17-19页 |
·转基因植物的体细胞克隆变异 | 第19-20页 |
·表型多样性 | 第19页 |
·转基因植物的体细胞克隆变异的细胞学特征 | 第19-20页 |
·DNA多态性 | 第20页 |
·本研究的目的、意义 | 第20-22页 |
2 材料和方法 | 第22-36页 |
·试验材料 | 第22-23页 |
·材料来源 | 第22页 |
·主要生化试剂 | 第22页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·基本培养基 | 第22-23页 |
·常用溶液配制 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-36页 |
·根尖染色体的统计 | 第23-24页 |
·RAPD引物筛选 | 第24页 |
·PCR扩增及产物的鉴定 | 第24页 |
·数据统计与分析 | 第24-25页 |
·多态性指数(Polymorphism index) | 第25页 |
·菌种的活化保存 | 第25页 |
·大肠杆菌质粒的提取与纯化(碱裂解法) | 第25-26页 |
·转化植株GUS活性检测 | 第26页 |
·GUS检测液配方 | 第26-27页 |
·白桦转基因植株基因组DNA提取与纯化 | 第27-28页 |
·转基因白桦基因组DNA单酶切 | 第28-29页 |
·转基因白桦基因组DNA双酶切 | 第29页 |
·转化植株PCR检测: | 第29-30页 |
·杂交探针的制备 | 第30-32页 |
·Southern印迹杂交 | 第32-34页 |
·转基因植株mRNA表达检测 | 第34-35页 |
·转基因植株田间试验后的再繁殖 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-46页 |
·基因组DNA不同提取方法比较 | 第36-37页 |
·电泳检测结果 | 第36页 |
·紫外吸收检测结果 | 第36-37页 |
·限制性内切酶酶切分析 | 第37页 |
·转基因白桦的遗传变异分析 | 第37-40页 |
·转基因白桦的染色体变异 | 第37-38页 |
·转基因白桦的DNA多态性 | 第38-40页 |
·外源BT与蜘蛛杀虫肽嵌合基因在转基因抗虫白桦中的整合、拷贝数和稳定性的研究 | 第40-41页 |
·KpnI和BamHI限制性酶切基因组DNA检测BT嵌合基因在转基因白桦中的整合 | 第40页 |
·利用HpaI单酶切基因组DNA,检测bt嵌合基因在转基因白桦中整合的拷贝数 | 第40-41页 |
·BT嵌合基因在转基因白桦中的整合稳定性 | 第41页 |
·BT嵌合基因在转基因白桦中的表达特性 | 第41-44页 |
·转基因白桦RNA的提取 | 第41-42页 |
·bt基因的不同整合拷贝数对转基因白桦的mRNA的表达 | 第42-43页 |
·bt基因表达的时序性 | 第43页 |
·gus、nptⅡ、bt三个基因整合与转录表达的相关性 | 第43-44页 |
·转基因白桦gus表达的稳定性(3年) | 第44页 |
·优良转基因植株组培再繁殖的可行性 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-51页 |
·白桦成熟叶片DNA的提取方法 | 第46-47页 |
·转基因白桦的体细胞克隆变异的细胞学特征 | 第47页 |
·DNA多态性 | 第47-48页 |
·转基因植物产生变异的原因 | 第48-49页 |
·减小转基因植物变异程度的办法 | 第49页 |
·转基因白桦的整合与表达特性 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录 | 第61-62页 |
攻读学位期间已发表的与本研究相关的学术论文 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |