| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-39页 |
| 1 文献综述 | 第10-38页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化方法 | 第10-15页 |
| ·发展现状 | 第10-12页 |
| ·建立高效的籼稻组织培养体系 | 第12-15页 |
| ·影响植物组织培养过程的各个因素 | 第12-13页 |
| ·籼稻组织培养的发展现状 | 第13-15页 |
| ·同源序列法克隆抗病基因 | 第15-24页 |
| ·抗病基因的保守结构域 | 第16-19页 |
| ·RGAs在克隆抗病基因中的应用 | 第19-24页 |
| ·RGAs作为分子标记 | 第20页 |
| ·RGAs与抗病基因紧密连锁 | 第20-21页 |
| ·利用RGAs成功克隆R基因 | 第21页 |
| ·在基因组水平上研究RGAs | 第21-24页 |
| ·RGAs的其它应用 | 第24页 |
| ·植物抗病的分子机制研究进展 | 第24-38页 |
| ·植物抗病基因(resistance genes,R genes) | 第25-27页 |
| ·病原物无毒基因(avirulence genes,Avr genes) | 第27-28页 |
| ·R蛋白与Avr蛋白的识别过程 | 第28-30页 |
| ·NBS-LRR类蛋白与其无毒蛋白的识别过程 | 第28-30页 |
| ·Pto与其无毒蛋白的识别过程 | 第30页 |
| ·系统的诱导抗病(induced defence responses) | 第30-33页 |
| ·系统获得抗病性(systemic acquired resistance,SAR) | 第31-33页 |
| ·诱导的系统抗性(induced systemic resistance,ISR) | 第33页 |
| ·植物抗病反应中的信号传导途径 | 第33-36页 |
| ·植物抗病反应中的信号传导网络 | 第33-35页 |
| ·促分裂原活化蛋白激酶 | 第35-36页 |
| ·植物的非寄主抗性(nonhost resistance) | 第36-37页 |
| ·植物抗病机理研究在生产上的应用 | 第37-38页 |
| 2 研究目的与意义 | 第38-39页 |
| 材料和方法 | 第39-47页 |
| 1 材料 | 第39-42页 |
| ·组织培养系统优化中使用的籼稻品种 | 第39页 |
| ·组织培养系统优化中使用的培养基 | 第39-40页 |
| ·载体构建所用质粒 | 第40-41页 |
| ·遗传转化中的农杆菌菌株和受体品种 | 第41页 |
| ·遗传转化中使用的培养基 | 第41-42页 |
| ·接种用白叶枯病菌株和水稻品种 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-47页 |
| ·组织培养系统优化中愈伤的诱导、继代和分化 | 第42页 |
| ·组织培养系统优化中数据分析 | 第42-43页 |
| ·组织细胞学观察 | 第43页 |
| ·总RNA的抽提 | 第43页 |
| ·22E6EI14的RT-PCR和3’-RACE分析 | 第43-44页 |
| ·双链RNA表达抑制转化载体的构建 | 第44页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第44-45页 |
| ·转基因植株的PCR阳性检测 | 第45页 |
| ·病原菌接种转基因植株 | 第45页 |
| ·Southern blot杂交分析外源片段的插入拷贝数 | 第45页 |
| ·T_0代转基因植株22E6EI14表达分析 | 第45-46页 |
| ·T_1代转基因植株共分离检测 | 第46-47页 |
| 结果和分析 | 第47-63页 |
| 1 籼稻组织培养体系的优化 | 第47-54页 |
| ·诱导培养基的优化 | 第47-49页 |
| ·继代培养基的优化 | 第49-53页 |
| ·诱导培养基、继代培养基和基因型三个因素对于愈伤再生能力的影 | 第53-54页 |
| 2 双链RNA表达抑制验证22E6EI14的功能 | 第54-63页 |
| ·22E6EI14结构的预测 | 第54-55页 |
| ·22E6EI14转录序列分析 | 第55-56页 |
| ·双链RNA表达抑制载体ds22E6EI14的构建 | 第56页 |
| ·双链RNA表达抑制的遗传转化 | 第56-57页 |
| ·T_0代转基因植物的PCR阳性检测 | 第57页 |
| ·T_0代转基因植株接种白叶枯致病菌PXO99 | 第57-59页 |
| ·Southern Blot杂交分析外源片段的插入拷贝数 | 第59-60页 |
| ·T_0代转基因植株22E6EI14表达分析 | 第60-61页 |
| ·T_1代转基因植株共分离检测 | 第61-63页 |
| 讨论 | 第63-71页 |
| 1 成熟种子作为水稻组织培养的外植体 | 第63页 |
| 2 诱导培养基对于愈伤再生能力的影响 | 第63-64页 |
| 3 植物生长调节因子 | 第64页 |
| 4 水稻基因型对于组织培养的影响 | 第64-65页 |
| 5 缺少LRR结构域的NBS-LRR类蛋白 | 第65-67页 |
| 6 利用同源序列法克隆抗病基因 | 第67-69页 |
| 7 关于22E6EI14的功能 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-88页 |
| 附录 | 第88-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
