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转基因油菜的遗传稳定性与环境生态安全研究

中文摘要第1-13页
Abstract第13-16页
前言第16-38页
 1 六个转基因作物的生物安全事件第16-19页
   ·Pusztai土豆事件第16-17页
   ·斑蝶事件第17-18页
   ·“超级杂草”事件第18页
   ·墨西哥玉米事件第18页
   ·中国Bt抗虫棉事件第18页
   ·野生油葵事件第18-19页
 2 国内外转基因作物安全管理第19-21页
   ·国外转基因作物安全的管理第19-20页
     ·美国模式第19-20页
     ·欧盟模式第20页
   ·我国转基因技术产品安全管理模式第20-21页
 3 转基因作物安全性评价第21-36页
   ·转基因作物的遗传稳定性第21-24页
     ·转基因作物的分子检测第21-24页
       ·PCR检测技术第21-22页
       ·Southern blot检测技术第22-23页
       ·其它形式的分子检测技术第23-24页
     ·外源基因在转基因作物后代中的遗传稳定性第24页
   ·外源基因对受体作物的影响第24-25页
   ·对非靶生物的影响第25-26页
   ·防止基因漂流第26-35页
     ·基因漂流的涵义第26-27页
     ·影响基因漂流的因素第27-29页
       ·花粉源大小第27-28页
       ·传粉载体第28页
       ·环境因素第28页
       ·天气第28页
       ·当地环境第28页
       ·物理隔离第28页
       ·花粉活力与竞争力第28-29页
       ·作物远缘杂交水平第29页
       ·花期相遇程度第29页
     ·基因漂流对环境的影响第29-30页
     ·转基因作物的基因漂流第30-32页
       ·转基因基因作物与非转基因作物间的基因漂流第30-31页
       ·转基因基因漂流的途径第31页
       ·转基因作物隔离距离的研究第31-32页
     ·转基因油菜的基因漂流第32-35页
       ·转基因油菜与芸薹属油料作物间的基因漂流第32-33页
       ·转基因油菜与其它芸薹属或植物的基因漂流第33页
       ·转基因油菜与其它十字花科植物间的基因漂流第33-34页
       ·转基因油菜的生殖隔离距离第34-35页
   ·食品安全性第35-36页
 4 转基因作物安全性争论的实质第36页
 5 存在的问题和展望第36-38页
   ·存在的问题与建议:第36-37页
   ·展望第37-38页
第一章 转基因油菜的遗传稳定性研究第38-55页
 1 材料与方法第38-40页
   ·材料第38页
   ·仪器第38页
   ·药品第38-39页
   ·常用试剂的配制第39-40页
     ·油菜基因组提取液的配制第39页
     ·电泳缓冲液的配置第39页
     ·质粒DNA提取液的配制第39-40页
     ·DNA快速回收试剂第40页
     ·Southern blot清洗缓冲液第40页
   ·细菌培养基的配制第40页
 2 方法第40-47页
   ·转基因油菜的分子检测第40-47页
     ·转基因油菜的PCR检测第40-43页
       ·油菜基因组的提取第40-41页
       ·DNA纯度检测与浓度估算第41页
       ·质粒DNA的提取第41-42页
       ·转基因油菜的PCR检测第42-43页
         ·PCR检测条件的优化第42-43页
         ·转基因油菜的PCR检测第43页
     ·转基因油菜的PCR-Southern Blot第43-47页
       ·用限制酶消化DNA酶切检测第43-44页
       ·从琼脂糖凝胶中纯化和回收DNA片段第44页
       ·探针标记第44页
       ·PCR-Southern blot杂交检测第44-47页
         ·样品DNA凝胶电泳第45页
         ·迅速进行转移第45页
         ·DNA的碱性转移第45页
         ·预杂交/杂交第45-46页
         ·PCR-Southern杂交检测第46-47页
   ·转基因不育系油菜15A花粉的染色观察第47页
     ·甲烯蓝染色第47页
     ·醋酸洋红染色第47页
   ·转基因抗虫油菜抗虫的田间表现第47页
 3 结果与讨论第47-53页
   ·转基因不育系油菜15A PCR检测退火温度的优化第47-48页
   ·转基因恢复系油菜T742 PCR检测退火温度的优化第48页
   ·转基因抗虫油菜T5 PCR退火温度的优化第48-49页
   ·转基因不育油菜15A的PCR检测第49页
   ·转基因恢复系油菜T742的PCR检测第49-50页
   ·转基因抗虫油菜T5的PCR检测第50页
   ·转基因油菜的PCR-Southern blot第50-51页
   ·转基因不育系油菜15A花粉的染色第51-52页
     ·15A花粉甲烯蓝染色第51-52页
     ·15A花粉醋酸洋红染色第52页
     ·15A与对照形态的比较第52页
   ·转基因抗虫油菜抗虫的田间表现第52-53页
 3 小结与讨论第53-55页
   ·转基因油菜的分子检测第53-54页
   ·转基因不育系油菜15A花粉的染色第54页
   ·转基因抗虫油菜田间抗虫性较好第54-55页
第二章 转基因油菜的植物学性状、农艺与品质性状以及减数分裂行为的观察研究第55-63页
 1 材料与方法第55-56页
   ·材料第55页
   ·方法第55-56页
     ·试验地点第55页
     ·转基因油菜生育期的观察第55-56页
     ·转基因油菜农艺性状观察第56页
     ·转基因油菜与非转基因油菜对照品质的比较第56页
     ·染色体减数分裂行为的观察第56页
 2 结果与分析第56-61页
   ·转基因油菜的生育期第56-57页
   ·转基因油菜与对照品种的农艺性状的比较第57-59页
   ·转基因油菜与非转基因油菜对照品质的比较第59页
   ·转基因油菜与非转基因油菜农艺性状与品质的比较第59-60页
   ·转基因油菜对染色体减数分裂行为的影响第60-61页
 3 小结和讨论第61-63页
   ·转基因油菜的目的基因对油菜生育期的影响第61页
   ·转基因油菜对油菜农艺性状以及品质的影响第61-62页
   ·转基因油菜对染色体减数分裂行为的影响第62-63页
第三章 转基因油菜生存竞争能力的研究第63-74页
 1 材料与方法第63-65页
   ·材料第63页
   ·方法第63-65页
     ·转基因油菜苗期抗旱能力的观察第63-64页
     ·转基因油菜抗寒苗期能力的观察第64页
     ·转基因油菜种子休眠期的研究第64-65页
 2 结果与分析第65-72页
   ·转基因油菜与对照品种在苗期抗旱能力的比较第65-66页
   ·2004年转基因油菜苗期抗寒能力的比较第66-67页
   ·2005年转基因油菜与非转基因油菜抗寒性比较第67-69页
   ·2004,2005年转基因油菜与非转基因油菜抗寒性的比较第69页
   ·转基因油菜与非转基因油菜对照品种在土壤中浅埋3cm休眠比较第69-70页
   ·转基因油菜与非转基因油菜对照品种在土壤中20cm的休眠比较第70-71页
   ·2004-2005年转基因油菜与非转基因油菜对照在土壤中3cm,20cm休眠比较第71-72页
 3 小结与讨论第72-74页
   ·转基因油菜的抗旱能力第72页
   ·转基因油菜的抗寒能力第72页
   ·转基因油菜休眠能力第72-74页
第四章 转基因油菜对非目标生物(蜜蜂)的影响第74-80页
 1 材料和方法第74-75页
   ·材料第74-75页
   ·方法第75页
     ·转Bt基因抗虫油菜(B.napus.L.)花粉对蜜蜂生存的影响第75页
     ·转基因油菜地与非转基因油菜对照地中蜜蜂数量的比较第75页
 2 结果和分析第75-77页
   ·转Bt基因抗虫油菜(B.napus.L.)花粉对蜜蜂生存的影响第75-76页
   ·转基因油菜地与非转基因油菜地中的蜜蜂数量的比较第76-77页
 3 讨论第77-80页
   ·转Bt基因抗虫油菜(B.napus.L.)花粉对蜜蜂生存的影响第77-78页
   ·花期转基因油菜(B.napus.L)与非转基因油菜地中蜜蜂数量的比较第78页
   ·转基因油菜(B.napus.L)对非目标昆虫的影响第78-80页
第五章 转基因油菜的基因漂流研究第80-90页
 1 材料与方法第81-83页
   ·材料第81页
   ·方法第81-83页
     ·试验地设置第81-82页
     ·转基因油菜T742的外源基因向周围非转基因油菜的转移研究第82页
     ·转基因油菜的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移研究第82-83页
       ·通过人工杂交途径进行研究第82页
       ·田间条件下转基因油菜的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移研究第82-83页
 2 结果与分析第83-88页
   ·转基因油菜的外源基因向周围非转基因油菜的转移研究第83-85页
     ·转基因恢复系油菜T742的外源基因向周围非转基因油菜的转移研究第83-84页
     ·转基因抗虫油菜T5的外源基因向周围非转基因油菜的转移研究第84-85页
   ·转基因油菜的外源基因转移到其它芸苔属、十字花科植物的可能性研究第85-88页
     ·T742的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移研究第85-86页
     ·转基因抗虫油菜T5的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移研究第86-87页
     ·田间条件下转基因油菜的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移研究第87-88页
 3 小结与讨论第88-90页
   ·转基因油菜的外源基因向周围非转基因油菜的转移是存在的第88-89页
   ·转基因油菜的外源基因向其它芸苔属、十字花科植物的转移在田间条件下是较难发生的第89-90页
第六章 转基因油菜基因漂流距离的研究第90-102页
 1 材料与方法第90-92页
   ·材料第90页
   ·方法第90-92页
     ·转基因油菜基因漂流距离的试验设计第90-91页
     ·油菜开花期风力风向的记录第91页
     ·田间蜜蜂发生数第91-92页
 2 结果与分析第92-100页
   ·油菜开花期风力风向第92页
   ·转基因恢复系油菜T742的基因漂流距离研究第92-96页
   ·转基因抗虫油菜T5在不同方向不同距离的基因漂流频率第96-99页
   ·转基因油菜在不同距离的基因漂流频率第99-100页
 3 小结与讨论第100-102页
   ·在转基因油菜基因漂流影响因素的比值第100页
   ·转基因油菜在不同距离的基因漂流频率及最大漂流距离第100-101页
   ·基因漂流频率的急剧下降的拐点第101-102页
第七章 本论文的总讨论第102-109页
   ·关于转基因油菜的遗传稳定性问题第102-103页
   ·关于转基因油菜的基因漂流问题第103-105页
   ·关于转Bt基因油菜T5对非目标昆虫的影响第105-107页
   ·关于转基因油菜的分子检测的问题第107-109页
本论文的主要结论与创新点第109-110页
参考文献第110-122页
致谢第122-123页
作者简介第123页

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