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几个梅花品种花色的时空变化、花色苷的分子结构和F3H克隆的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
英文缩写符号及中英文对照表第14-15页
第一部分 文献综述第15-53页
 第一章 植物花色的形成及其调控机理第15-31页
 第二章 植物花色呈现的生物化学、分子生物学机制及其基因工程改良第31-50页
 第三章 研究背景与研究思路第50-53页
第二部分 试验研究第53-129页
 第一章 几个梅花品种花色时空变化的研究第53-62页
  梅花‘南京红须’、‘南京红’花色的呈现特征第53-62页
   1 材料与方法第54-55页
    1.1 一般方法第54页
    1.2 植物材料第54页
    1.3 两个梅花品种花色色素化学本质预试:特征颜色反应第54页
    1.4 两个梅花品种花色的时间变化:花发育阶段对花色的效应第54-55页
     1.4.1 花发育阶段的划分第54页
     1.4.2 花瓣层次的划分第54-55页
     1.4.3 花色变化的测定第55页
    1.5 两个梅花品种花色的空间变化:花朵在树冠中的着生位点对花色的效应第55页
   2 结果与分析第55-59页
    2.1 两个梅花品种花色色素的特征颜色反应第55页
    2.2 两个梅花品种花朵在不同花发育阶段的视觉特征第55-56页
    2.3 花发育阶段对两个梅花品种花色的效应第56-59页
     2.3.1 两个梅花品种花色随花发育阶段的变化第56-58页
     2.3.2 两个梅花品种花瓣总黄酮含量随花发育阶段的变化第58页
     2.3.3 两个梅花品种花瓣MDA含量随花发育阶段的变化第58-59页
    2.4 花朵在树冠中的着生位点对两个梅花品种花色的效应第59页
   3 讨论第59-62页
 第二章 几个梅花品种花色色素花色苷分子结构的研究第62-99页
  第一节 梅花花色色素种类和含量的初步研究第62-72页
   1 材料与方法第62-64页
    1.1 花朵采集与处理第62-63页
    1.2 梅花花色色素的定性鉴定和定量测定第63-64页
     1.2.1 色素化学成分的系统预试:特征颜色反应第63-64页
     1.2.2 色素中叶绿素、类胡萝卜素的鉴定第64页
     1.2.3 色素的紫外—可见光谱和‘南京红’、‘南京红须’、‘复瓣跳枝’粉红花瓣的色价与花色苷含量第64页
     1.2.4 花色色素的总黄酮含量第64页
   2 结果与分析第64-68页
    2.1 梅花花色色素的特征颜色反应第64-66页
     2.1.1 石油醚、盐酸和氨水测试第64-65页
     2.1.2 浓盐酸——镁粉反应第65页
     2.1.3 浓盐酸——锌粉反应第65页
     2.1.4 三氯化铁反应第65页
     2.1.5 醋酸铅反应第65页
     2.1.6 三氯化铝反应第65页
     2.1.7 浓硫酸反应第65-66页
     2.1.8 四氢硼钠反应第66页
     2.1.9 碱性试剂反应第66页
     2.1.10 氨性氯化锶反应第66页
     2.1.11 硼酸反应第66页
    2.2 花色色素中叶绿素、类胡萝卜素的鉴定第66页
    2.3 花色色素的紫外-可见光谱第66-67页
    2.4 ‘南京红’、‘南京红须’和‘复瓣跳枝’粉红花瓣花色色素的色价和花色苷含量第67-68页
    2.5 花色色素的总黄酮含量第68页
   3 讨论第68-72页
  第二节 理化因子导致梅花‘南京红’花色色素的颜色变化第72-81页
   1 材料与方法第73-74页
    1.1 植物材料第73页
    1.2 花色色素的分离第73页
    1.3 物理因素导致花色色素的颜色变化第73页
    1.4 化学因素导致花色色素的颜色变化第73-74页
     1.4.1 pH对色素颜色呈现的效应第73-74页
     1.4.2 金属离子、氧化剂、还原剂、螯合剂、糖、苯甲酸钠和柠檬酸对色素颜色呈现的效应第74页
   2 结果与分析第74-78页
    2.1 花色色素提取液的颜色第74页
    2.2 光、温导致花色色素的颜色变化第74-75页
    2.3 化学因素导致花色色素的颜色变化第75-78页
     2.3.1 pH的效应第75页
     2.3.2 金属离子的效应第75-77页
     2.3.3 氧化剂、还原剂的效应第77页
     2.3.4 螯合剂的效应第77页
     2.3.5 苯甲酸钠和柠檬酸的效应第77-78页
     2.3.6 糖的效应第78页
   3 讨论第78-81页
  第三节 梅花‘南京红须’花色色素花色苷的分离与结构鉴定第81-91页
   1 材料与方法第81-84页
    1.1 植物材料第81-82页
    1.2 一般方法第82页
    1.3 花色色素花色苷的提取、初步鉴定和纯化第82-83页
     1.3.1 花色苷的粗提和粗提物的TLC检测第82-83页
     1.3.2 花色苷的纯化第83页
    1.4 通过特征颜色反应、层析和光谱鉴定花色苷的分子结构第83-84页
     1.4.1 特征颜色反应第83页
     1.4.2 PC和紫外——可见光谱第83页
     1.4.3 花色苷的完全水解和相应苷元、糖、脂肪酸和酚酸的鉴定第83-84页
   2 结果与分析第84-88页
   3 讨论第88-91页
  第四节 梅花‘南京红’花色色素花色苷的分子结构第91-99页
   1 材料与方法第91-92页
    1.1 植物材料第91-92页
    1.2 一般方法第92页
    1.3 花色苷的提取、初步鉴定和纯化第92页
    1.4 通过特征颜色反应、层析和光谱鉴定花色苷的分子结构第92页
   2 结果与分析第92-96页
   3 讨论第96-99页
 第三章 几个梅花品种F3′H克隆的研究第99-129页
  第一节 梅花gDNA提取的方法学研究第99-107页
   1 材料与方法第100-102页
    1.1 一般方法和试剂第100页
    1.2 植物材料第100页
    1.3 叶片gDNA的提取第100-101页
    1.4 提取DNA的质量检测第101-102页
     1.4.1 紫外分光光度法检测第101-102页
     1.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测第102页
     1.4.3 限制性内切酶酶切反应检测第102页
   2 结果与分析第102-104页
   3 讨论第104-107页
  第二节 几个梅花品种F3′H片段的简并PCR法克隆第107-116页
   1 材料与方法第108-110页
    1.1 材料第108-109页
     1.1.1 植物材料第108页
     1.1.2 质粒与菌株第108页
     1.1.3 酶与试剂第108-109页
    1.2 方法第109-110页
     1.2.1 一般方法第109页
     1.2.2 简并引物设计第109页
     1.2.3 梅花3个品种F3′H片段的简并PCR法扩增第109-110页
     1.2.4 简并PCR产物的检测、纯化与克隆第110页
     1.2.5 阳性克隆的选择与鉴定第110页
     1.2.6 DNA测序和分析第110页
   2 结果与分析第110-113页
    2.1 基于多重比对的简并引物设计第111-112页
    2.2 有效引物的筛选第112-113页
    2.3 pMD18-T载体的重组效率及对大肠杆菌的转化效率第113页
    2.4 DNA序列分析第113页
   3 讨论第113-116页
  第三节 梅花‘南京红须’F3′H的简并PCR和TAIL-PCR法克隆第116-129页
   1 材料与方法第117-119页
    1.1 材料第117-118页
     1.1.1 植物材料第117-118页
     1.1.2 质粒与菌株第118页
     1.1.3 酶与试剂第118页
    1.2 方法第118-119页
     1.2.1 一般方法第118页
     1.2.2 用于TAIL-PCR的引物设计第118页
     1.2.3 运用TAIL-PCR分别扩增‘南京红须’F3′H片段的3′和5′旁侧序列第118-119页
     1.2.4 TAIL-PCR产物的回收、纯化、克隆以及序列的测定、拼接和分析第119页
   2 结果与分析第119-122页
    2.1 TAIL-PCR的引物设计第119-120页
    2.2 TAIL-PCR产物的电泳检测第120页
    2.3 TAIL-PCR产物的序列测定与分析第120-122页
   3 讨论第122-129页
全文总结以及研究的创新点第129-130页
攻读学位期间发表的与本研究相关的论文第130-132页
攻读学位期间获奖情况第132-133页
致谢第133页

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