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玉米磷脂酰肌醇代谢途径中酶的基因克隆及其功能鉴定

中文摘要第1-10页
Abstract第10-15页
符号说明第15-17页
第一章 前言第17-40页
   ·肌醇磷脂信号系统简介第17-23页
   ·磷脂酰肌醇合成酶研究进展第23-30页
     ·酵母中的磷脂酰肌醇合成酶第23-26页
     ·哺乳动物组织中的磷脂酰肌醇合成酶第26-30页
     ·植物中的PIS第30页
   ·磷脂酶C研究进展第30-38页
     ·PI-PLC的类型、结构及活性调节第31-33页
     ·植物PI-PLC研究进展第33-38页
   ·本研究的目的和意义第38-40页
第二章 材料与方法第40-58页
   ·植物材料和菌株及质粒第40页
   ·实验方法第40-58页
     ·玉米总RNA的提取第40-41页
     ·mRNA的分离第41页
     ·玉米cDNA文库构建第41-45页
     ·编码玉米PIS及PLC基因的cDNA片段的分离第45-46页
     ·玉米cDNA文库筛选第46-48页
     ·Southern blot分析第48-50页
     ·Northern blot分析第50页
     ·胁迫条件下PIS、PLC转录水平变化的检测第50-51页
     ·酵母突变体功能互补分析第51-58页
第三章 结果与分析第58-87页
   ·玉米cDNA文库的构建第58-59页
     ·酸酚-异硫氰酸胍-氯仿提取法从玉米黄化叶片中制备总RNA第58页
     ·玉米cDNA文库的滴度、重组率及插入cDNA片段的长度第58-59页
   ·玉米PIS基因的克隆及功能分析第59-73页
     ·玉米PIS基因cDNA片段的分离第59页
     ·玉米cDNA文库的筛选及ZmPIS基因的克隆第59-62页
     ·ZmPIS基因的Southern blot分析第62页
     ·ZmPIS基因的Northern blot分析及其在胁迫条件下转录水平的变化第62-64页
     ·酵母突变体互补实验第64-65页
     ·转ZmPIS基因烟草植株的获得第65-67页
     ·转ZmPIS基因烟草植株的耐旱性分析第67-71页
     ·转ZmPIS基因烟草植株的耐盐性分析第71-73页
   ·玉米PLC基因的克隆及功能分析第73-87页
     ·玉米PLC基因cDNA片段的分离第73页
     ·玉米ZmPLC基因的克隆第73-76页
     ·ZmPLC基因的Southern blot分析第76页
     ·ZmPLC基因在玉米植株中的表达分析第76-77页
     ·ZmPLC互补酵母plcl突变体的功能分析第77-79页
     ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达和抗体制备第79-80页
     ·转ZmPLC基因烟草植株的获得第80-82页
     ·转ZmPLC基因烟草植株的抗逆性分析第82-87页
第四章 讨论第87-96页
   ·ZmPIS和ZmPLC基因的克隆和验证第87-88页
   ·ZmPIS和ZmPLC基因原核表达及表达蛋白的纯化第88-89页
   ·ZmPIS和ZmPLC基因对逆境条件的响应第89-90页
   ·转基因烟草的抗逆性分析第90-96页
附录第96-98页
 附录1 ZmPIS的核苷酸序列和推测的氨基酸序列第96-97页
 附录2 ZmPLC的核苷酸序列和推测的氨基酸序列第97-98页
参考文献第98-116页
致谢第116-117页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第117页

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