中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
符号说明 | 第15-17页 |
第一章 前言 | 第17-40页 |
·肌醇磷脂信号系统简介 | 第17-23页 |
·磷脂酰肌醇合成酶研究进展 | 第23-30页 |
·酵母中的磷脂酰肌醇合成酶 | 第23-26页 |
·哺乳动物组织中的磷脂酰肌醇合成酶 | 第26-30页 |
·植物中的PIS | 第30页 |
·磷脂酶C研究进展 | 第30-38页 |
·PI-PLC的类型、结构及活性调节 | 第31-33页 |
·植物PI-PLC研究进展 | 第33-38页 |
·本研究的目的和意义 | 第38-40页 |
第二章 材料与方法 | 第40-58页 |
·植物材料和菌株及质粒 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-58页 |
·玉米总RNA的提取 | 第40-41页 |
·mRNA的分离 | 第41页 |
·玉米cDNA文库构建 | 第41-45页 |
·编码玉米PIS及PLC基因的cDNA片段的分离 | 第45-46页 |
·玉米cDNA文库筛选 | 第46-48页 |
·Southern blot分析 | 第48-50页 |
·Northern blot分析 | 第50页 |
·胁迫条件下PIS、PLC转录水平变化的检测 | 第50-51页 |
·酵母突变体功能互补分析 | 第51-58页 |
第三章 结果与分析 | 第58-87页 |
·玉米cDNA文库的构建 | 第58-59页 |
·酸酚-异硫氰酸胍-氯仿提取法从玉米黄化叶片中制备总RNA | 第58页 |
·玉米cDNA文库的滴度、重组率及插入cDNA片段的长度 | 第58-59页 |
·玉米PIS基因的克隆及功能分析 | 第59-73页 |
·玉米PIS基因cDNA片段的分离 | 第59页 |
·玉米cDNA文库的筛选及ZmPIS基因的克隆 | 第59-62页 |
·ZmPIS基因的Southern blot分析 | 第62页 |
·ZmPIS基因的Northern blot分析及其在胁迫条件下转录水平的变化 | 第62-64页 |
·酵母突变体互补实验 | 第64-65页 |
·转ZmPIS基因烟草植株的获得 | 第65-67页 |
·转ZmPIS基因烟草植株的耐旱性分析 | 第67-71页 |
·转ZmPIS基因烟草植株的耐盐性分析 | 第71-73页 |
·玉米PLC基因的克隆及功能分析 | 第73-87页 |
·玉米PLC基因cDNA片段的分离 | 第73页 |
·玉米ZmPLC基因的克隆 | 第73-76页 |
·ZmPLC基因的Southern blot分析 | 第76页 |
·ZmPLC基因在玉米植株中的表达分析 | 第76-77页 |
·ZmPLC互补酵母plcl突变体的功能分析 | 第77-79页 |
·融合蛋白在大肠杆菌中的表达和抗体制备 | 第79-80页 |
·转ZmPLC基因烟草植株的获得 | 第80-82页 |
·转ZmPLC基因烟草植株的抗逆性分析 | 第82-87页 |
第四章 讨论 | 第87-96页 |
·ZmPIS和ZmPLC基因的克隆和验证 | 第87-88页 |
·ZmPIS和ZmPLC基因原核表达及表达蛋白的纯化 | 第88-89页 |
·ZmPIS和ZmPLC基因对逆境条件的响应 | 第89-90页 |
·转基因烟草的抗逆性分析 | 第90-96页 |
附录 | 第96-98页 |
附录1 ZmPIS的核苷酸序列和推测的氨基酸序列 | 第96-97页 |
附录2 ZmPLC的核苷酸序列和推测的氨基酸序列 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第117页 |