| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-17页 |
| ·蜡蚧轮枝菌的研究与应用现状 | 第12-13页 |
| ·相关增效基因在虫生真菌中的研究现状 | 第13-15页 |
| ·虫生真菌基因改良的途径 | 第13页 |
| ·蝎毒的应用 | 第13-14页 |
| ·虫生真菌的其它毒力增效基因的应用 | 第14-15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第15-17页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| ·技术路线图 | 第16-17页 |
| 第二章 蝎毒基因的克隆 | 第17-23页 |
| ·材料与方法 | 第17-20页 |
| ·材料与仪器 | 第17页 |
| ·东亚钳蝎总 RNA 的提取 | 第17-18页 |
| ·反转录合成 BmkIT 基因 | 第18-19页 |
| ·产物的测序验证 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-22页 |
| ·东亚钳蝎总 RNA 的提取 | 第20页 |
| ·反转录合成 BmKIT 基因 | 第20-21页 |
| ·BmKIT 基因的测序验证 | 第21-22页 |
| ·结论与讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 表达载体的构建 | 第23-32页 |
| ·材料与方法 | 第23-29页 |
| ·材料与仪器 | 第23-24页 |
| ·真核表达载体构建示意图 | 第24页 |
| ·BmKIT 基因与启动子的连接 | 第24-26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第26-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·连接产物转进农杆菌感受态细胞 | 第28-29页 |
| ·农杆菌转化子的 PCR 验证 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·BmKIT 基因与启动子的连接 | 第29-30页 |
| ·连接产物转化进大肠杆菌感受态 | 第30页 |
| ·连接产物转进农杆菌感受态 | 第30-31页 |
| ·结论与讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 农杆菌介导的蜡蚧轮枝菌的转化及转化子的验证 | 第32-39页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料与仪器 | 第32-33页 |
| ·农杆菌介导的蜡蚧轮枝菌的转化 | 第33页 |
| ·对假定转化子进行单孢分离 | 第33-34页 |
| ·假定转化子基因组的提取及 PCR 检测 | 第34-35页 |
| ·假定转化子的 RT-PCR 验证 | 第35-36页 |
| ·转化子的遗传稳定性验证 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·假定转化子基因组的提取 | 第36-37页 |
| ·转化子的 RT-PCR 验证 | 第37-38页 |
| ·转化子的遗传稳定性验证 | 第38页 |
| ·结论与讨论 | 第38-39页 |
| 第五章 转化子的生物活性测定 | 第39-42页 |
| ·材料与方法 | 第39-40页 |
| ·供试菌株和材料 | 第39页 |
| ·孢子悬浮液的制备 | 第39-40页 |
| ·浸渍法测定蜡蚧轮枝菌的杀蚜效果 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·转化子和原始菌株对蚜虫的侵染结果 | 第40-41页 |
| ·转化子和原始菌株对蚜虫的室内毒力测定结果 | 第41页 |
| ·结论与讨论 | 第41-42页 |
| 第六章 全文结论与讨论 | 第42-44页 |
| ·克隆得到了 BmKIT 基因 | 第42页 |
| ·构建了能在真菌中表达 BmKIT 基因的载体 | 第42页 |
| ·得到转化子及对转化子的验证 | 第42-43页 |
| ·转化子的生物活性测定 | 第43页 |
| ·本研究的创新点 | 第43页 |
| ·问题讨论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50页 |