| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 常用缩写 | 第12-13页 |
| 第一部分 综述 | 第13-41页 |
| 第一节 人红细胞膜概述 | 第13-24页 |
| 一、人红细胞及红细胞膜的基本结构和功能 | 第13-15页 |
| 二、人红细胞膜上的蛋白质 | 第15-19页 |
| 三、脂筏(lipid raft) | 第19-20页 |
| 四、Band 3和cdb3 | 第20-24页 |
| 第二节 人红细胞膜葡萄糖转运蛋白的基本性质 | 第24-31页 |
| 一、葡萄糖转运蛋白家族 | 第24-26页 |
| 二、GLUT1的基因和蛋白质结构分析 | 第26-31页 |
| 第三节 葡萄糖转运蛋白在人红细胞膜上的功能分析 | 第31-41页 |
| 一、在人红细胞膜上的葡萄糖转运模型 | 第31-33页 |
| 二、葡萄糖跨膜运输的调节 | 第33-35页 |
| 三、人红细胞上葡萄糖转运蛋白的相互作用 | 第35-39页 |
| 四、相关疾病 | 第39-41页 |
| 第二部分 引言 | 第41-43页 |
| 第三部分 实验材料、原理和方法 | 第43-64页 |
| 第一节 材料、试剂、和仪器设备 | 第43-47页 |
| 一、血样 | 第43页 |
| 二、物质运输测量相关试剂及配制 | 第43页 |
| 三、SDS-PAGE,Western blot,Co-IP和Pull-down相关试剂及配制 | 第43-45页 |
| 四、菌株,质粒和培养基 | 第45页 |
| 五、克隆实验相关试剂 | 第45页 |
| 六、表达和纯化实验相关试剂 | 第45-46页 |
| 七、鼠多抗制备的相关材料 | 第46页 |
| 八、主要仪器设备 | 第46-47页 |
| 第二节 实验原理、方法和步骤 | 第47-64页 |
| 一、血样的准备和血影膜的制备 | 第47页 |
| 二、红细胞生理状态下物质运输的测量 | 第47-56页 |
| 三、SDS-PAGE | 第56-57页 |
| 四、Western blot | 第57页 |
| 五、克隆GLUT1全长及其片断至不同载体 | 第57-58页 |
| 六、表达和纯化重组GLUT1片断 | 第58-60页 |
| 七、表达和纯化重组cdb3蛋白 | 第60-61页 |
| 八、表达和纯化重组Ankyrin氨基端 | 第61页 |
| 九、免疫共沉淀法研究蛋白质间相互作用 | 第61-62页 |
| 十、Pull-down Assay研究蛋白质间相互作用 | 第62页 |
| 十一、鼠多抗的制备 | 第62-63页 |
| 十二、蛋白质浓度和纯度的测定 | 第63-64页 |
| 第四部分 结果与讨论 | 第64-100页 |
| 第一节 生理状态下的红细胞膜上GLUT1和Band 3相互作用的研究 | 第64-78页 |
| 一、关于BS~3对红细胞作用的预实验 | 第64-68页 |
| 二、BS~3处理后红细胞膜上Band 3蛋白阴离子运输的测量 | 第68-71页 |
| 三、BS~3处理后红细胞膜上葡萄糖运输的测量 | 第71-76页 |
| 四、BS~3处理后红细胞膜蛋白的SDS—PAGE电泳 | 第76-78页 |
| 第二节 GLUT1全长及片段的克隆、表达与纯化 | 第78-87页 |
| 一、GLUT1全长及片段的克隆与表达 | 第78-85页 |
| 二、GLUT1重组蛋白片段的纯化 | 第85-87页 |
| 第三节 利用重组蛋白对GLUT1与Band 3相互作用的研究 | 第87-97页 |
| 一、实验相关的cdb3和ankyrin D34的表达与纯化 | 第87-90页 |
| 二、作为实验系统阳性对照的cdb3和ankyrin D34相互作用的研究 | 第90-93页 |
| 三、免疫共沉淀法研究GLUT1片段与cdb3的相互作用 | 第93-95页 |
| 四、Pull-down assay研究GLUT1片段与cdb3的相互作用 | 第95-97页 |
| 第四节 免疫小鼠抗体实验 | 第97-100页 |
| 第五部分 总结和展望 | 第100-106页 |
| 参考文献 | 第106-127页 |
| 论文发表情况 | 第127-128页 |
| 附录一 GLUT1全长cDNA及氨基酸序列 | 第128-129页 |
| 附录二 GLUT1-Nt的cDNA及氨基酸序列 | 第129页 |
| 附录三 GLUT1-Ct的cDNA及氨基酸序列 | 第129页 |
| 附录四 GLUT1-loop的cDNA及氨基酸序列 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
