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Nudel在内膜系统运输及有丝分裂中的功能

Abbreviations第1-9页
第一部分 Nudel 参与dynein 介导的内膜系统运输第9-10页
 摘要第9-10页
Part Ⅰ Nudel is involved in dynein-mediated membrane traffic第10-46页
 Abstract第10-11页
 1、引言第11-14页
 2、材料与方法第14-23页
   ·实验试剂和所用抗体第14-15页
     ·常用的缓冲液配方第14页
     ·抗体第14-15页
   ·实验方法第15-23页
     ·质粒构建第15-18页
     ·细胞培养和转染第18页
     ·免疫共沉淀实验第18-19页
     ·微管解聚实验第19页
     ·免疫荧光技术和荧光显微缩时术(time-lapse microscopy)第19-20页
     ·细胞囊泡内吞检测第20页
     ·内膜组分纯化第20-21页
     ·分泌试验第21页
     ·RNA干扰第21-23页
 3、结果第23-38页
   ·构建分别与Lis1 和DHC不结合的Nudel突变体第23-25页
   ·Nudel参与dynein 介导的内膜系统运输第25-29页
   ·内膜囊泡的弥散与微管的相关性第29-30页
   ·囊泡微管负向运动的影响第30-32页
   ·Nudel突变体抑制蛋白的分泌第32-34页
   ·磷酸化调节Nudel与内膜系统的结合第34-35页
   ·抑制内源Nudel的表达导致高尔基体的弥散分布第35-38页
 4、讨论第38-41页
 5、结论第41-42页
 参考文献第42-46页
第二部分 Nudel在有丝分裂中的功能第46-47页
 摘要第46-47页
Part Ⅱ Nudel fuctions in mitosis第47-87页
 Abstract第47-48页
 1、引言第48-50页
 2、材料与方法第50-56页
   ·实验试剂和所用抗体第50页
   ·实验方法第50-56页
     ·质粒的构建第50-51页
     ·细胞培养和转染第51-52页
     ·免疫荧光技术第52-53页
     ·激光共聚焦技术第53页
     ·荧光显微缩时术和活细胞荧光观测第53-54页
     ·RNA干扰第54页
     ·流式细胞术第54-56页
 3、结果第56-77页
   ·Nudel在M期的亚细胞定位第56-59页
   ·抑制 Nudel的表达导致细胞有丝分裂的阻滞第59-62页
   ·Nudel 有助于建立和维持微管和动粒的结合第62-66页
   ·Nudel帮助dynein/ Lis1/CLIP-170 定位到动粒第66-68页
   ·ZW10 对与Nudel的动粒定位不是必需的第68-70页
   ·Nudel参与纺锤体的组装第70-74页
   ·Nudel-RNAi影响中心粒锚定和数目,诱导多极纺锤体形成第74-77页
 4、讨论第77-81页
 5、结论第81-82页
 参考文献第82-87页
专业综述第87-101页
Publications第101-102页
致谢第102页

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