Abbreviations | 第1-9页 |
第一部分 Nudel 参与dynein 介导的内膜系统运输 | 第9-10页 |
摘要 | 第9-10页 |
Part Ⅰ Nudel is involved in dynein-mediated membrane traffic | 第10-46页 |
Abstract | 第10-11页 |
1、引言 | 第11-14页 |
2、材料与方法 | 第14-23页 |
·实验试剂和所用抗体 | 第14-15页 |
·常用的缓冲液配方 | 第14页 |
·抗体 | 第14-15页 |
·实验方法 | 第15-23页 |
·质粒构建 | 第15-18页 |
·细胞培养和转染 | 第18页 |
·免疫共沉淀实验 | 第18-19页 |
·微管解聚实验 | 第19页 |
·免疫荧光技术和荧光显微缩时术(time-lapse microscopy) | 第19-20页 |
·细胞囊泡内吞检测 | 第20页 |
·内膜组分纯化 | 第20-21页 |
·分泌试验 | 第21页 |
·RNA干扰 | 第21-23页 |
3、结果 | 第23-38页 |
·构建分别与Lis1 和DHC不结合的Nudel突变体 | 第23-25页 |
·Nudel参与dynein 介导的内膜系统运输 | 第25-29页 |
·内膜囊泡的弥散与微管的相关性 | 第29-30页 |
·囊泡微管负向运动的影响 | 第30-32页 |
·Nudel突变体抑制蛋白的分泌 | 第32-34页 |
·磷酸化调节Nudel与内膜系统的结合 | 第34-35页 |
·抑制内源Nudel的表达导致高尔基体的弥散分布 | 第35-38页 |
4、讨论 | 第38-41页 |
5、结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
第二部分 Nudel在有丝分裂中的功能 | 第46-47页 |
摘要 | 第46-47页 |
Part Ⅱ Nudel fuctions in mitosis | 第47-87页 |
Abstract | 第47-48页 |
1、引言 | 第48-50页 |
2、材料与方法 | 第50-56页 |
·实验试剂和所用抗体 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-56页 |
·质粒的构建 | 第50-51页 |
·细胞培养和转染 | 第51-52页 |
·免疫荧光技术 | 第52-53页 |
·激光共聚焦技术 | 第53页 |
·荧光显微缩时术和活细胞荧光观测 | 第53-54页 |
·RNA干扰 | 第54页 |
·流式细胞术 | 第54-56页 |
3、结果 | 第56-77页 |
·Nudel在M期的亚细胞定位 | 第56-59页 |
·抑制 Nudel的表达导致细胞有丝分裂的阻滞 | 第59-62页 |
·Nudel 有助于建立和维持微管和动粒的结合 | 第62-66页 |
·Nudel帮助dynein/ Lis1/CLIP-170 定位到动粒 | 第66-68页 |
·ZW10 对与Nudel的动粒定位不是必需的 | 第68-70页 |
·Nudel参与纺锤体的组装 | 第70-74页 |
·Nudel-RNAi影响中心粒锚定和数目,诱导多极纺锤体形成 | 第74-77页 |
4、讨论 | 第77-81页 |
5、结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
专业综述 | 第87-101页 |
Publications | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |