第一章 文献综述 | 第1-34页 |
第一节 蜘蛛丝概况和研究进展 | 第7-25页 |
·蜘蛛丝的组成及大小 | 第8-9页 |
·蜘蛛丝蛋白基因研究 | 第9-11页 |
·蜘蛛丝蛋白组成特点 | 第11-15页 |
·蜘蛛丝蛋白氨基酸组成 | 第15-16页 |
·蜘蛛纺丝 | 第16页 |
·关于蜘蛛丝产生的进化假设 | 第16页 |
·环境对蜘蛛产生蜘蛛拖丝的影响 | 第16-17页 |
·蜘蛛丝的机械性能 | 第17-18页 |
·蜘蛛拖丝 | 第18-25页 |
第二节 外源基因在大肠杆菌中的表达 | 第25-30页 |
·前言 | 第25页 |
·影响大肠杆菌中外源重组基因表达的因素 | 第25-30页 |
第三节 外源基因在哺乳动物细胞的表达 | 第30-34页 |
·载体类型 | 第30-31页 |
·表达载体的结构元件 | 第31-32页 |
·宿主细胞 | 第32页 |
·提高外源蛋白表达的措施 | 第32-34页 |
第二章 实验材料与方法 | 第34-57页 |
·菌株、细胞和表达载体 | 第34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
·分析工具软件及网址 | 第34-35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·常规溶液及试剂配制 | 第35-37页 |
·试剂及其它材料 | 第37-38页 |
·寡聚核苷酸、引物和多肽合成 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-57页 |
第三章 结果 | 第57-98页 |
第一节 类蜘蛛牵丝Ⅰ型蛋白基因的设计与合成 | 第57-69页 |
·目的基因的设计 | 第57-58页 |
·拟合成基因与Ⅰ型牵丝蛋白部分基因的比较 | 第58-63页 |
·聚合体基因的合成 | 第63-69页 |
第二节 蜘蛛牵丝Ⅰ型蛋白检测抗体的制备 | 第69-71页 |
·免疫多肽的合成 | 第69页 |
·抗原制备 | 第69-70页 |
·免疫结果 | 第70-71页 |
第三节 类蜘蛛牵丝Ⅰ型蛋白基因在大肠杆菌中的表达 | 第71-81页 |
·目的基因在原核表达载体中的克隆 | 第71-74页 |
·大肠杆菌表达载体构建鉴定 | 第74-77页 |
·合成基因在大肠杆菌中的表达 | 第77-79页 |
·[~3H]释放实验 | 第79-80页 |
·~(35)S标记实验检测目的蛋白的表达 | 第80-81页 |
第四节 类蜘蛛牵丝Ⅰ型蛋白基因在哺乳动物细胞中的表达 | 第81-98页 |
·真核细胞表达载体构建 | 第81-82页 |
·目的基因克隆真核表达载体 | 第82-83页 |
·目的基因分别在CHO、293T、NBK、CV-1细胞中的瞬时表达 | 第83-88页 |
·目的基因在CHO细胞中的稳定表达 | 第88-98页 |
第五章 讨论 | 第98-104页 |
第六章 结论与展望 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
附录 | 第113-127页 |
个人简历 | 第127页 |