中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
第一部分 前言与文献综述 | 第8-30页 |
1 基因工程技术在现代农药中的应用 | 第8-10页 |
·新农药的概念 | 第8-9页 |
·基因工程农药 | 第9-10页 |
·基因工程农药展望 | 第10页 |
2 昆虫神经肽 | 第10-20页 |
·主要神经肽种类 | 第10-14页 |
·昆虫神经肽保幼激素抑制素(Allatostatin, AST)的研究进展 | 第14-19页 |
·神经肽研究应用于害虫防治的可能性和前景分析 | 第19-20页 |
3 大肠杆菌表达系统 | 第20-28页 |
·表达量 | 第20-22页 |
·表达活性 | 第22-26页 |
·简化实验步骤、提高实验的可操纵性 | 第26-27页 |
·成本问题 | 第27-28页 |
4 pQE表达系统 | 第28页 |
5 本实验的研究目的和意义 | 第28-29页 |
6 本实验的技术路线 | 第29-30页 |
第二部分 神经肽AST_(13)基因串联体的构建与表达 | 第30-61页 |
材料与方法 | 第30-43页 |
1 材料与试剂 | 第30页 |
·质粒与菌种 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·引物合成与DNA测序 | 第30页 |
2 神经肽AST_(13)基因串联体的构建 | 第30-37页 |
·引物设计与合成 | 第30页 |
·自身模板引物法构建AST_(13)基因串联体 | 第30-32页 |
·PCR拼接产物的克隆 | 第32-37页 |
3 神经肽AST_(13)基因串联体的表达 | 第37-42页 |
·表达载体的构建 | 第37-40页 |
·神经肽AST_(13)基因串联体在SG13009中的表达 | 第40-41页 |
·表达产物的SDS-PAGE | 第41-42页 |
4 抗虫实验 | 第42-43页 |
结果与分析 | 第43-58页 |
1 串联体的拼接 | 第43-45页 |
·引物的设计 | 第43页 |
·神经肽AST_(13)基因串联体的拼接 | 第43-45页 |
2 神经肽AST_(13)基因串联体的克隆 | 第45-48页 |
3 神经肽AST_(13)基因串联体的表达分析 | 第48-53页 |
·表达载体的构建 | 第48-52页 |
·表达分析 | 第52-53页 |
4 抗虫实验 | 第53-58页 |
结论 | 第58页 |
讨论 | 第58-61页 |
1 神经肽AST_(13)基因串联体的构建 | 第58-59页 |
2 神经肽AST_(13)基因串联体的表达 | 第59-60页 |
3 抗虫实验 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |