| 前言 | 第1-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·低温保存技术的发展历史 | 第13-14页 |
| ·低温保存方法 | 第14页 |
| ·慢速冷冻法 | 第14页 |
| ·玻璃化法 | 第14页 |
| ·玻璃化冷冻过程 | 第14-18页 |
| ·玻璃化概念及其热力学基础 | 第14-15页 |
| ·玻璃化冷冻过程 | 第15-17页 |
| ·导入阶段 | 第16页 |
| ·降温复温阶段 | 第16-17页 |
| ·洗脱阶段 | 第17页 |
| ·玻璃化法存在的问题 | 第17-18页 |
| ·反玻璃化 | 第17-18页 |
| ·低温断裂 | 第18页 |
| ·低温损伤机理及两因素假说 | 第18-19页 |
| ·冷冻保护剂 | 第19-20页 |
| ·冷冻保护剂类型 | 第20-22页 |
| ·玻璃化溶液 | 第22-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第二章 玻璃化冷冻保护剂的配制 | 第25-36页 |
| ·概述 | 第25-26页 |
| ·实验部分 | 第26-30页 |
| ·实验仪器 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·培养基配制与灭菌 | 第29页 |
| ·碳酸氢钠配制与灭菌 | 第29页 |
| ·冷冻保护剂配制与灭菌 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·DSC测玻璃化温度 | 第29-30页 |
| ·低温显微镜降温升温 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-33页 |
| ·冷冻保护剂的玻璃化能力 | 第30-31页 |
| ·玻璃化转变温度 | 第31-32页 |
| ·断裂温度 | 第32-33页 |
| ·讨论与分析 | 第33-35页 |
| ·误差分析 | 第35-36页 |
| 第三章 玻璃化溶液对成骨细胞活性的影响 | 第36-54页 |
| ·概述 | 第36-38页 |
| ·实验部分 | 第38-44页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验流程 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·平衡盐溶液配制与灭菌 | 第39-40页 |
| ·胰蛋白酶配制与灭菌 | 第40页 |
| ·胶原酶配制与灭菌 | 第40-41页 |
| ·台盼蓝溶液配制 | 第41页 |
| ·MTT溶液配制与灭菌 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·成骨细胞的原代培养 | 第41-42页 |
| ·成骨细胞的传代培养 | 第42页 |
| ·细胞计数法 | 第42-43页 |
| ·碱性磷酸酶鉴定方法 | 第43页 |
| ·渗透压测定 | 第43页 |
| ·细胞活性检测法 | 第43-44页 |
| ·方差分析及检验 | 第44页 |
| ·实验结果与讨论 | 第44-53页 |
| ·成骨细胞的鉴定 | 第44-45页 |
| ·成骨细胞经平衡、洗脱后培养24hr和48hr的MTT检测结果 | 第45-46页 |
| ·平衡时间延长到10min细胞活性的变化 | 第46-48页 |
| ·玻璃化溶液洗脱后渗透压检测结果 | 第48-49页 |
| ·三种渗透性冷冻保护剂对细胞活性的影响 | 第49-50页 |
| ·加入糖类对细胞活性的影响 | 第50-53页 |
| ·PD中加入糖类对细胞活性的影响 | 第50-52页 |
| ·DMSO中加入糖类对细胞活性的影响 | 第52-53页 |
| ·误差分析 | 第53-54页 |
| 第四章 细胞膜的渗透特性对细胞活性的影响 | 第54-60页 |
| ·概述 | 第54页 |
| ·K-K模型 | 第54-56页 |
| ·CPA导入过程中成骨细胞体积变化 | 第56-60页 |
| ·单浓度一次性导入 | 第56-58页 |
| ·多浓度分步导入 | 第58-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士期间完成和发表的学术论文 | 第68-70页 |