| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一部分 前言 | 第8-12页 |
| ·研究背景 | 第8-10页 |
| ·凝血酶研究进展 | 第8-9页 |
| ·PTEN 研究进展 | 第9-10页 |
| ·研究目的及意义 | 第10-11页 |
| ·目前该领域存在的问题及本课题研究内容 | 第11-12页 |
| 第二部分 实验材料与常用实验方法 | 第12-19页 |
| ·实验材料 | 第12-16页 |
| ·细胞和菌株 | 第12页 |
| ·克隆载体和干涉质粒 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12-13页 |
| ·主要溶液的配制 | 第13-15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·常用实验方法 | 第16-19页 |
| 第三部分 凝血酶促进肺癌细胞生长转移及机制研究 | 第19-39页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·肿瘤细胞中 PTEN 的组成性表达及凝血酶对 PTEN 表达影响 | 第19页 |
| ·目的基因片段 PTEN 与 T 克隆载体连接、鉴定、测序 | 第19-22页 |
| ·凝血酶对 Glc-82 细胞增殖的影响 | 第22页 |
| ·凝血酶对 Glc-82 细胞周期进程的影响 | 第22-23页 |
| ·凝血酶对 Glc-82 细胞的凋亡影响 | 第23页 |
| ·凝血酶对 Glc-82 细胞 PTEN 及相关分子表达活化影响 | 第23页 |
| ·荧光实时定量 PCR（RT-PCR）检测 PTEN | 第23-24页 |
| ·凝血酶通过 PTEN 对 PI3K/AKT 信号通路的活化作用 | 第24页 |
| ·实验结果与分析 | 第24-39页 |
| ·肿瘤细胞中 PTEN 组成性表达及凝血酶对 PTEN 表达影响 | 第24-25页 |
| ·PCR 法扩增 PTEN 基因全长序列 | 第25页 |
| ·阳性克隆质粒的 PCR 鉴定 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第26页 |
| ·阳性克隆质粒测序鉴定 | 第26-28页 |
| ·凝血酶促进 Glc-82 细胞增殖 | 第28页 |
| ·凝血酶促进 Glc-82 细胞周期由 G1 期向 S 期过渡 | 第28-29页 |
| ·凝血酶抑制饥饿诱导的 Glc-82 细胞凋亡 | 第29-30页 |
| ·不同浓度凝血酶对 Glc-82 细胞内信号分子 PTEN 表达及活化影响 | 第30-33页 |
| ·凝血酶（0.5U/ml）不同作用时间对 Glc-82 细胞内 PTEN 及其相关分子表达及活化影响 | 第33-36页 |
| ·RT-PCR 检测凝血酶下调 PTEN mRNA 水平 | 第36-37页 |
| ·凝血酶通过下调 PTEN 促进 PI3K/AKT 信号通路的活化 | 第37-39页 |
| 第四部分 凝血酶通过下调 PTEN 而影响 Glc-82 功能及其相关机制 | 第39-49页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·PTEN-shRNA 干涉质粒转染 Glc-82 细胞、干涉效率鉴定 | 第39-40页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶对 Glc-82 细胞周期进程影响 | 第40页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶对 Glc-82 细胞凋亡影响 | 第40页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶对 Glc-82 细胞迁移影响 | 第40-41页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶对 PI3K/AKT 信号通路影响 | 第41页 |
| ·PAR1 介导凝血酶对 PTEN 表达影响 | 第41页 |
| ·实验结果与分析 | 第41-49页 |
| ·PTEN 稳定干涉 Glc-82 细胞株建立 | 第41-42页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶促进 Glc-82 细胞周期进程 | 第42-43页 |
| ·PTEN 对凝血酶抑制 Glc-82 细胞凋亡的影响 | 第43-44页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶促进 Glc-82 细胞迁移 | 第44-45页 |
| ·PTEN 介导的凝血酶对 PI3K/AKT 信号途径活化作用 | 第45-47页 |
| ·PAR1 介导的凝血酶抑制 Glc-82 细胞 PTEN 的表达 | 第47-49页 |
| 讨论与结论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读硕士学位期间已发表和待发表的论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
