中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-6页 |
致谢 | 第6-17页 |
前言 | 第17-20页 |
第一部分 文献综述 | 第20-75页 |
第一章 动物细胞核移植技术研究进展 | 第20-75页 |
1 哺乳动物细胞核移植的原理 | 第22-23页 |
·胚胎细胞核移植的基本原理 | 第22-23页 |
·体细胞核移植的基本原理 | 第23页 |
2 哺乳动物细胞核移植发展史上的重大历史事件 | 第23-25页 |
3 哺乳动物细胞核移植研究概况 | 第25-34页 |
·小鼠 | 第25-27页 |
·小鼠胚胎细胞核移植研究 | 第25-26页 |
·小鼠体细胞核移植研究 | 第26-27页 |
·兔 | 第27-29页 |
·兔胚胎细胞核移植研究 | 第27-29页 |
·兔体细胞核移植研究 | 第29页 |
·羊 | 第29-31页 |
·羊胚胎细胞核移植研究 | 第29-30页 |
·羊体细胞核移植研究 | 第30-31页 |
·猪 | 第31-33页 |
·猪胚胎细胞细胞核移植研究 | 第31-32页 |
·猪体细胞核移植研究 | 第32-33页 |
·牛 | 第33-34页 |
·牛胚胎细胞核移植研究 | 第33页 |
·牛体细胞核移植研究 | 第33-34页 |
4 异种动物细胞核移植研究概况 | 第34-36页 |
5 种间妊娠 | 第36-40页 |
·种间妊娠的免疫学问题 | 第36-37页 |
·妊娠期间存在母体针对胎儿的免疫反应 | 第37页 |
·妊娠期间的抗原来源 | 第37-38页 |
·母体对孕体的免疫反应的发生 | 第38页 |
·母体免疫反应的作用 | 第38-39页 |
·种间妊娠失败的原因和成功的关键 | 第39-40页 |
6 细胞核移植技术程序 | 第40-52页 |
·供体细胞的选择 | 第40-43页 |
·胎儿成纤维细胞 | 第41页 |
·成年动物体细胞与处理 | 第41页 |
·供体细胞同步化处理 | 第41-42页 |
·供体细胞的时龄和细胞周期时相对核移植胚发育的影响 | 第42-43页 |
·受体卵母细胞的选择与处理 | 第43-44页 |
·受体卵母细胞的去核方法 | 第44-46页 |
·卵母细胞和重组胚的激活 | 第46-48页 |
·核质互作 | 第48-49页 |
·线粒体的命运 | 第49-50页 |
·端粒与体细胞核移植 | 第50-52页 |
7 细胞核移植存在的问题 | 第52-53页 |
8 细胞核移植的应用前景 | 第53-56页 |
·促进基础生物科学的发展 | 第53页 |
·为移植手术提供合适器官 | 第53-54页 |
·生产转基因动物和产品 | 第54页 |
·治疗性克隆 | 第54-55页 |
·作为辅助生殖手段,使不孕不育患者得到自己的后代 | 第55页 |
·在畜牧业生产和濒危、珍稀动物保护上的应用 | 第55-56页 |
结束语 | 第56页 |
参考文献 | 第56-75页 |
第二部分 实验研究 | 第75-119页 |
第二章 小鼠卵母细胞孤雌激活研究 | 第75-84页 |
1 材料和方法 | 第75-76页 |
·材料 | 第75页 |
·实验动物 | 第75页 |
·试剂药品 | 第75页 |
·仪器设备 | 第75页 |
·方法 | 第75-76页 |
·冲胚液及培养液配制 | 第75-76页 |
·公鼠结扎 | 第76页 |
·超排处理 | 第76页 |
·卵母细胞采集 | 第76页 |
·卵母细胞激活处理 | 第76页 |
·卵母细胞培养和发育观察 | 第76页 |
·统计分析 | 第76页 |
2 结果 | 第76-79页 |
·Eth.激活和6-DMAP激活效果比较 | 第76-78页 |
·不同培养液对孤雌胚体外发育的影响 | 第78-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
·不同激活方法对小鼠卵母细胞激活效果比较 | 第79-80页 |
·不同培养液对孤雌胚体外发育的影响 | 第80-81页 |
·取卵时间的确定 | 第81页 |
4 小结 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-84页 |
第三章 山羊卵母细胞体外成熟培养 | 第84-91页 |
1 材料和方法 | 第84-85页 |
·发情羊血清制备 | 第84页 |
·卵母细胞采集 | 第84页 |
·COC体外成熟培养 | 第84-85页 |
·卵母细胞体外培养成熟检查 | 第85页 |
·数据处理 | 第85页 |
2 结果 | 第85-86页 |
·血清对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第85页 |
·不同激素和因子对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
·血清对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第86-87页 |
·激素对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第87页 |
·生长因子对山羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第87-88页 |
4 小结 | 第88页 |
参考文献 | 第88-91页 |
第四章 山羊卵母细胞孤雌激活研究 | 第91-98页 |
1 材料和方法 | 第91-92页 |
·山羊卵母细胞采集 | 第91页 |
·卵母细胞的成熟培养 | 第91页 |
·卵母细胞成熟培养 | 第91页 |
·卵母细胞成熟检查 | 第91页 |
·成熟卵母细胞的激活及孤雌胚的体外培养 | 第91-92页 |
·温度激活 | 第92页 |
·Eth.联合6-DMAP激活 | 第92页 |
·Ino.联合6-DMAP激活 | 第92页 |
·数据处理 | 第92页 |
2 结果 | 第92-94页 |
·温度对山羊卵母细胞激活及孤雌胚胎体外发育的影响 | 第92页 |
·Eth.联合6-DMAP激活对山羊卵母细胞激活及孤雌胚体外发育的影响 | 第92-93页 |
·Ino.联合6-DMAP对山羊卵母细胞激活及孤雌胚体外发育的影响 | 第93-94页 |
3 讨论 | 第94-95页 |
·温度对山羊卵母细胞激活及孤雌胚胎体外发育的影响 | 第94页 |
·Eth.联合6-DMAP对山羊卵母细胞激活及孤雌胚体外发育的影响 | 第94页 |
·Ino.联合6-DMAP对山羊卵母细胞激活及孤雌胚体外发育的影响 | 第94-95页 |
4 小结 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-98页 |
第五章 小鼠-山羊异种核移植研究 | 第98-112页 |
1 材料和方法 | 第98-100页 |
·材料 | 第98页 |
·实验动物 | 第98页 |
·药品试剂 | 第98页 |
·主要仪器 | 第98页 |
·方法 | 第98-100页 |
·供体核的获得 | 第98-99页 |
·受核卵母细胞的获得 | 第99页 |
·山羊颗粒细胞单层制备 | 第99页 |
·显微操作 | 第99页 |
·卵母细胞去核的荧光检测 | 第99页 |
·小鼠-山羊核移胚的激活 | 第99页 |
·小鼠-山羊核移胚的体外培养 | 第99-100页 |
·数据处理 | 第100页 |
2 结果 | 第100-103页 |
·山羊卵母细胞去核效果 | 第100页 |
·小鼠-山羊核移胚的构建及激活效果 | 第100-101页 |
·不同培养液对核移胚体外发育的影响 | 第101页 |
·不同培养方式对核移胚发育的影响 | 第101-102页 |
·供体细胞处理方式对核移胚发育的影响 | 第102页 |
·小鼠-山羊核移胚发育率 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-107页 |
·山羊卵母细胞去核时间及方法 | 第103-104页 |
·小鼠-山羊核移胚的构建及激活效果 | 第104-105页 |
·不同培养液对核移胚体外发育的影响 | 第105-106页 |
·不同培养方式对核移胚发育的影响 | 第106页 |
·供体细胞处理方式对核移胚发育的影响 | 第106-107页 |
·小鼠-山羊核移胚的发育率 | 第107页 |
4 小结 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-112页 |
第六章 山羊-小鼠异种核移植研究 | 第112-119页 |
1 材料和方法 | 第112-113页 |
·材料 | 第112页 |
·实验动物 | 第112页 |
·药品试剂 | 第112页 |
·主要仪器 | 第112页 |
·方法 | 第112-113页 |
·供体核的获得 | 第112页 |
·受体卵母细胞的获得 | 第112页 |
·小鼠颗粒细胞单层制备 | 第112-113页 |
·显微操作 | 第113页 |
·卵母细胞去核的荧光检测 | 第113页 |
·山羊-小鼠核移胚的激活 | 第113页 |
·山羊-小鼠核移胚的体外培养 | 第113页 |
·统计分析 | 第113页 |
2 结果 | 第113-114页 |
·不同培养液对核移胚体外发育的影响 | 第113页 |
·山羊-小鼠核移胚发育率 | 第113-114页 |
3 讨论 | 第114-116页 |
·卵母细胞的去核与注核操作 | 第114-115页 |
·不同培养液对核移胚发育的影响 | 第115页 |
·核质互作 | 第115-116页 |
4 小结 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-119页 |
结论 | 第119-120页 |
作者简介 | 第120-121页 |