| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-14页 |
| 一 肺癌早期诊断的重要性 | 第9页 |
| 二 蛋白质组学研究的技术体系 | 第9-11页 |
| 三 肺癌早期诊断标志物研究现状 | 第11-12页 |
| 四 本课题研究的意义和目标 | 第12-14页 |
| 第一部分 SDS-PAGE与MALDI-TOF-MS联用方法的建立及在无血清培养肺癌细胞差异蛋白质组研究中的应用 | 第14-28页 |
| 1 设计思想 | 第14-15页 |
| 2 实验材料与方法 | 第15-19页 |
| ·实验材料与仪器 | 第15页 |
| ·组织细胞的培养 | 第15-16页 |
| ·培养基的获取 | 第16页 |
| ·培养基的脱盐处理 | 第16页 |
| ·SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第16-17页 |
| ·分离及染色 | 第16-17页 |
| ·凝胶脱色 | 第17页 |
| ·蛋白质酶切 | 第17-18页 |
| ·胶上蛋白还原、烷基化 | 第17页 |
| ·胶内酶切及肽片段提取 | 第17-18页 |
| ·肽混合物的质谱分析 | 第18-19页 |
| ·参数设置 | 第18页 |
| ·质谱分析 | 第18页 |
| ·数据库检索 | 第18-19页 |
| ·临床样本的免疫组化分析 | 第19页 |
| ·肺癌病人血清Western-Blotting方法 | 第19页 |
| 3 实验结果 | 第19-23页 |
| ·无血清培养基分泌蛋白SDS-PAGE分离 | 第19-20页 |
| ·差异蛋白质的鉴定 | 第20-22页 |
| ·MMP1的临床验证结果 | 第22-23页 |
| ·MMP1免疫组化结果 | 第22-23页 |
| ·MMP1差异蛋白的Western-blotting验证 | 第23页 |
| 4 讨论 | 第23-28页 |
| ·无血清培养体系的选取 | 第23-24页 |
| ·培养基的透析 | 第24-25页 |
| ·2-DE分离效果 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE分离样品的优点 | 第26页 |
| ·适用于SDS-PAGE分离蛋白质的酶切方法 | 第26-27页 |
| ·差异蛋白质的寻找 | 第27-28页 |
| 第二部分 SDS-PAGE与nanoLC-ESI-MS-MS联用方法的建立及肺癌蛋白质标志物的筛选 | 第28-48页 |
| 1 设计思想 | 第28页 |
| 2 实验部分 | 第28-31页 |
| ·实验材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·样品处理 | 第29页 |
| ·液相色谱流动相的配置方法 | 第29页 |
| ·液相色谱梯度参数的选择 | 第29-30页 |
| ·串联质谱分析 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-41页 |
| ·对照样品的SDS-PAGE电泳结果 | 第31页 |
| ·肿瘤样品nanoLC-ESI-MS-MS鉴定信息 | 第31-41页 |
| 4 讨论 | 第41-48页 |
| ·MALDI-TOF-MS与nanoLC-ESI-MS-MS两种方法的比较 | 第41-42页 |
| ·差异表达分泌蛋白质的生物学意义 | 第42-45页 |
| ·成对样品与随机配对样品共同存在的差异 | 第45-46页 |
| ·分泌蛋白质的pI与Mw的分布 | 第46-48页 |
| 结语 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 研究生期间撰写与发表的文章 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 文献综述 | 第54-64页 |
