| 摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-48页 |
| ·肝再生增强子基因的综述 | 第13-21页 |
| ·ALR的国内外研究动态及趋势 | 第13-15页 |
| ·ALR的分类、命名及功能 | 第15-18页 |
| ·ALR的基因家族 | 第18-19页 |
| ·ALR的临床应用研究 | 第19-21页 |
| ·hALR的克隆及序列分析 | 第21-26页 |
| ·概述基因克隆技术 | 第21-22页 |
| ·基因克隆技术研究的新近展 | 第22-23页 |
| ·hALR的研究 | 第23-26页 |
| ·hALR的原核表达和目的蛋白的纯化及复性 | 第26-37页 |
| ·hALR原核表达-外源基因在大肠杆菌中高效表达的研究 | 第26-34页 |
| ·目的蛋白的纯化和复性 | 第34-37页 |
| ·rhALR原核表达产物的生物活性检测及应用 | 第37-48页 |
| ·rhALR对人血清白蛋白免疫损伤性肝纤维化预防作用 | 第37-43页 |
| ·rhALR对乙硫氨酸引起的小鼠脂肪肝的治疗作用 | 第43-45页 |
| ·ELISA法检测肝病患者血清中ALR水平及意义 | 第45-48页 |
| 2 材料和方法 | 第48-70页 |
| ·实验材料 | 第48-54页 |
| ·ALR的克隆及序列分析 | 第48-50页 |
| ·ALR的原核表达和目的蛋白的纯化及复性 | 第50-53页 |
| ·ALR原核表达产物的生物活性检测及应用 | 第53-54页 |
| ·仪器 | 第54页 |
| ·实验方法: | 第54-70页 |
| ·ALR的克隆及序列分析 | 第54-59页 |
| ·ALR的原核表达构建和目的蛋白的纯化及复性 | 第59-66页 |
| ·ALR原核表达产物的生物活性检测及应用 | 第66-70页 |
| 3 实验结果 | 第70-89页 |
| ·hALR基因克隆及序列分析 | 第70-74页 |
| ·胎肝总RNA浓度与质量检测 | 第70页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第70页 |
| ·PCR产物单酶切鉴定 | 第70页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第70-72页 |
| ·阳性重组子的核苷酸序列分析 | 第72-74页 |
| ·hALR基因原核表达载体的构建 | 第74-75页 |
| ·PET28a(+)(+)原核表达载体双酶切 | 第74页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第74页 |
| ·重组子的鉴定 | 第74-75页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第75-76页 |
| ·hALR基因的原核诱导表达 | 第76-82页 |
| ·重组质粒在BL21中的诱导表达及表达蛋白的定量分析 | 第76-81页 |
| ·表达蛋白质的免疫印迹检测-Western-blot检测 | 第81-82页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第82-83页 |
| ·ALR表达蛋白质的纯化 | 第82页 |
| ·纯化蛋白质的定量分析 | 第82-83页 |
| ·ALR原核表达产物的生物活性检测及应用 | 第83-89页 |
| ·rhALR对人血清白蛋白免疫损伤性肝纤维化的预防作用 | 第83-85页 |
| ·rhALR对乙硫氨酸引起的小鼠脂肪肝的治疗作用 | 第85-86页 |
| ·ELISA法检测肝病患者血清中ALR水平及意义 | 第86-89页 |
| 4 讨论 | 第89-98页 |
| ·hALR的克隆及序列分析 | 第89-91页 |
| ·总RNA的提取 | 第89页 |
| ·关于RT-PCR扩增: | 第89-90页 |
| ·PCR反应影响因素 | 第90-91页 |
| ·克隆产物的酶切鉴定 | 第91页 |
| ·ALR基因的序列分析 | 第91页 |
| ·hALR的原核表达和目的蛋白的分离、纯化及复性 | 第91-94页 |
| ·影响目的蛋白诱导表达的因素 | 第91-92页 |
| ·表达蛋白质的免疫印迹检测-Western blot检测 | 第92-93页 |
| ·目的蛋白的大小 | 第93页 |
| ·目的蛋白的分离和纯化 | 第93-94页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第94页 |
| ·hALR原核表达产物的生物活性检测及应用 | 第94-98页 |
| ·rhALR对人血清白蛋白免疫损伤性肝纤维化的预防作用 | 第94-95页 |
| ·rhALR对乙硫氨酸引起的小鼠脂肪肝的治疗作用 | 第95-96页 |
| ·ELISA法检测肝病患者血清中ALR水平及意义 | 第96-98页 |
| 5 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第109-110页 |
