| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一部分 前言 | 第8-18页 |
| 1 人工染色体的研究进展 | 第8-14页 |
| ·着丝粒的研究概况 | 第8-9页 |
| ·端粒的研究概况 | 第9-10页 |
| ·复制起点 | 第10-11页 |
| ·酵母人工染色体 | 第11-12页 |
| ·人类人工染色体及人工染色体研究的新进展 | 第12-14页 |
| 2 模式植物拟南芥的研究概述 | 第14-15页 |
| ·拟南芥的生物学特性 | 第14页 |
| ·拟南芥全基因组测序 | 第14-15页 |
| ·拟南芥资源 | 第15页 |
| 3 植物遗传转化方法的研究概述 | 第15-16页 |
| ·植物转基因方法 | 第15-16页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第16页 |
| 4 酵母的基因组及筛选体系 | 第16-17页 |
| 5 本课题提出的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第18-27页 |
| 1 实验材料 | 第18-22页 |
| ·所用载体 | 第18-20页 |
| ·拟南芥资源 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·试剂及仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-27页 |
| ·载体构建 | 第22页 |
| ·大肠杆菌的培养基及培养条件 | 第22页 |
| ·质粒DNA分离及操作 | 第22页 |
| ·PCR反应条件 | 第22-23页 |
| ·酵母同源重组 | 第23-24页 |
| ·酵母小量总DNA的抽提 | 第23页 |
| ·酵母的高效转化 | 第23页 |
| ·脉冲电泳分离制备包埋于琼脂糖胶块中的酵母染色体 | 第23-24页 |
| ·原生质体培养 | 第24-27页 |
| ·无菌苗培育 | 第24页 |
| ·原生质体分离 | 第24-25页 |
| ·转化YAC DNA进入植物原生质体 | 第25-26页 |
| ·原生质体培养 | 第26-27页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第27-41页 |
| 1 含有拟南芥着丝粒区的YAC克隆的选择 | 第27-29页 |
| 2 拟南芥端粒DNA的克隆和左臂修饰载体pRL108的构建 | 第29-33页 |
| 3 拟南芥ARS序列的克隆和右臂修饰载体pCR109的构建 | 第33-36页 |
| 4 利用同源重组进行YAC修饰 | 第36-40页 |
| 5 将PAC1片段转化植物原生质体 | 第40-41页 |
| 第四部分 讨论 | 第41-44页 |
| 1 拟南芥的着丝粒 | 第41页 |
| 2 穿梭载体 | 第41-42页 |
| 3 植物大片段DNA的遗传转化 | 第42页 |
| 4 构建人工染色体的方法 | 第42-43页 |
| 5 花椰菜花叶病毒35S启动子在酵母细胞中的表达 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录一 E-Kit for Plasmid软件 | 第50-53页 |
| 附录二 各种溶液试剂配方 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56页 |