专业名词缩写中英文对照表 | 第1-18页 |
实验技术路线图 | 第18-19页 |
前言 | 第19-21页 |
第一章 TSARG2基因的克隆与序列分析 | 第21-45页 |
1 材料和方法 | 第21-27页 |
1.1 材料与试剂 | 第21页 |
1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
1.3 GenBank数据库检索和EST序列拼接 | 第22页 |
1.4 PCR引物 | 第22页 |
1.5 巢式PCR扩增 | 第22-23页 |
1.6 人类基因组草图搜索法 | 第23-24页 |
1.7 阅读框架的确定 | 第24页 |
1.8 质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
1.9 大肠杆菌感受态的制备 | 第25页 |
1.10 DNA序列分析 | 第25-26页 |
1.11 Northern杂交 | 第26-27页 |
1.12 染色体定位 | 第27页 |
1.13 序列同源性和功能区的计算机分析 | 第27页 |
2 结果 | 第27-43页 |
2.1 GenBank数据库检索和EST序列拼接 | 第27-28页 |
2.2 PCR扩增和序列分析 | 第28-30页 |
2.3 Northern杂交 | 第30页 |
2.4 TSARG2染色体定位 | 第30-32页 |
2.5 TSARG2基因cDNA序列的限制性内切酶位点分析 | 第32-38页 |
2.6 序列同源性和功能区的计算机分析 | 第38-43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
第二章 TSARG2基因功能的初步研究 | 第45-78页 |
1 材料与方法 | 第45-65页 |
1.1 病例 | 第45页 |
1.2 细胞株和组织 | 第45页 |
1.3 实验动物 | 第45页 |
1.4 目的基因 | 第45-46页 |
1.5 pGEX-4T-2载体 | 第46页 |
1.6 pGEX-KG载体 | 第46页 |
1.7 pEGFP-N1载体 | 第46页 |
1.8 pcDNA3.1(-)载体 | 第46页 |
1.9 酶及主要试剂 | 第46-47页 |
1.10 引物 | 第47-48页 |
1.11 主要仪器 | 第48-49页 |
1.12 DNA的抽提和胶回收 | 第49-51页 |
1.13 RNA的抽提 | 第51页 |
1.14 TSARG2基因编码区点突变的检测 | 第51-52页 |
1.15 正常人睾丸与无精症、隐睾症睾丸组织石蜡切片比较 | 第52页 |
1.16 人睾丸组织原位杂交 | 第52-55页 |
1.17 TSARG2蛋白的亚细胞定位 | 第55-58页 |
1.18 pGEX-KG/TSARG2与pGEX-4T-2/TSARG2融合蛋白的原核表达与纯化 | 第58-63页 |
1.19 TSARG2基因稳定表达的人类乳腺癌MCF-7细胞株的建立及其对人类乳腺癌MCF-7细胞生长的影响 | 第63-65页 |
2 结果 | 第65-76页 |
2.1 TSARG2基因编码区点突变的检测 | 第65-66页 |
2.2 正常人睾丸与无精症、隐睾症睾丸组织石蜡切片比较 | 第66-68页 |
2.3 人睾丸组织原位杂交 | 第68-70页 |
2.4 pEGFP-N1/TSARG2融合基因表达载体的构建及其在活细胞中的定位 | 第70-72页 |
2.5 pGEX-KG/TSARG2与pGEX-4T-2/TSARG2融合蛋白的原核表达与纯化 | 第72-75页 |
2.6 TSARG2基因稳定表达的人类乳腺癌MCF-7细胞株的建立及其对人类乳腺癌MCF-7细胞生长的影响 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
第三章 SRG2基因的分子克隆、序列分析及其在小鼠隐睾中的表达特征 | 第78-107页 |
1 材料和方法 | 第78-83页 |
1.1 材料 | 第78页 |
1.2 主要仪器 | 第78-79页 |
1.3 GenBank数据库检索和EST序列拼接 | 第79页 |
1.4 PCR引物 | 第79页 |
1.5 PCR扩增 | 第79-80页 |
1.6 DNA序列分析 | 第80页 |
1.7 序列同源性和功能区的计算机分析 | 第80页 |
1.8 多组织Northern杂交 | 第80页 |
1.9 Northern杂交检测SRG2在睾丸发育不同时段的表达 | 第80-81页 |
1.10 正常小鼠睾丸发育不同时段的组织石蜡切片比较 | 第81页 |
1.11 实验性小鼠隐睾模型的建立 | 第81页 |
1.12 总RNA抽提 | 第81页 |
1.13 RT-PCR | 第81-82页 |
1.14 小鼠睾丸组织原位杂交 | 第82页 |
1.15 分子信标检测实验性小鼠隐睾SRG2基因的表达 | 第82页 |
1.16 Southern杂交 | 第82-83页 |
1.17 甲基化检测 | 第83页 |
2 结果 | 第83-105页 |
2.1 GenBank数据库检索和EST序列拼接 | 第83-84页 |
2.2 PCR扩增和序列分析 | 第84-91页 |
2.3 SRG2染色体定位 | 第91-92页 |
2.4 SRG2基因cDNA序列的限制性内切酶位点分析 | 第92-97页 |
2.5 多组织Northern杂交 | 第97-98页 |
2.6 SRG2在小鼠睾丸发育不同时段的表达 | 第98页 |
2.7 正常小鼠睾丸发育不同时段的组织石蜡切片比较 | 第98-100页 |
2.8 多组织RT-PCR | 第100-101页 |
2.9 原位杂交结果 | 第101-103页 |
2.10 分子信标检测实验性小鼠隐睾SRG2基因的表达 | 第103-104页 |
2.11 Southern杂交 | 第104-105页 |
2.12 甲基化检测 | 第105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-115页 |
小结 | 第115-116页 |
综述 | 第116-135页 |
1 人类睾丸生殖细胞凋亡相关基因的分子遗传学研究进展 | 第116-121页 |
2 变性梯度凝胶电泳的原理、应用及其进展 | 第121-124页 |
3 影响人类基因在大肠杆菌中表达因素分析 | 第124-127页 |
4 蛋白质的分离纯化战略(兼哲学论文) | 第127-131页 |
5 双向电泳技术原理及其应用 | 第131-135页 |
在读博士期间发表的论文目录 | 第135-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
个人简历 | 第138页 |