葫芦科植物病毒研究--Ⅰ：主要病毒鉴定与基因组分析 Ⅱ：病毒生态学和致病性研究
| 摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-19页 |
| 第一章 文献综述:葫芦科作物病毒研究进展 | 第19-40页 |
| ·植物病毒研究的发展概况 | 第19-21页 |
| ·病毒的基因组核酸研究 | 第21-25页 |
| ·植物病毒核酸组成 | 第21-23页 |
| ·植物病毒基因组结构和功能 | 第23-25页 |
| ·植物病毒研究的方法学 | 第25-29页 |
| ·寄主生物学方法 | 第25-26页 |
| ·细胞病理学方法 | 第26页 |
| ·血清学方法 | 第26-27页 |
| ·病毒dsRNA分析 | 第27-28页 |
| ·PCR和RT-PCR技术 | 第28页 |
| ·核酸杂交方法 | 第28-29页 |
| ·基因芯片方法 | 第29页 |
| ·异源双链泳动分析法 | 第29页 |
| ·葫芦科植物的分布特征与作物生产现状 | 第29-31页 |
| ·葫芦科作物病毒及其研究进展 | 第31-36页 |
| ·葫芦科作物病毒病的发生 | 第31-34页 |
| ·侵染葫芦科作物的2种主要病毒 | 第34-36页 |
| ·小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV) | 第34-35页 |
| ·黄瓜花叶病毒(CMV) | 第35-36页 |
| ·植物病毒控制的理论与实践 | 第36-39页 |
| ·农业防治措施 | 第36-37页 |
| ·化学防治措施 | 第37页 |
| ·选育和利用抗病品种 | 第37页 |
| ·脱毒和繁育无病毒苗木 | 第37页 |
| ·交叉保护 | 第37-38页 |
| ·抗植物病毒基因工程 | 第38页 |
| ·强化植物检疫措施 | 第38-39页 |
| ·研究目的及内容 | 第39-40页 |
| 第二章 2种葫芦科作物病毒的分离鉴定 | 第40-54页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·毒源采集与保存 | 第40页 |
| ·寄主反应测定 | 第40-41页 |
| ·病毒dsRNA提取与分析 | 第41页 |
| ·病毒粒子部分提纯 | 第41-43页 |
| ·提取病毒的变性蛋白电泳(SDS-PAGE) | 第43页 |
| ·病毒形态学与组织病变观察 | 第43-44页 |
| ·病叶组织中病毒粒子的观察(直接负染法) | 第43页 |
| ·提纯病毒粒子的形态学观察 | 第43-44页 |
| ·感病植物组织的病变观察 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-52页 |
| ·寄主生物学检测结果 | 第44-45页 |
| ·病毒dsRNA分析结果 | 第45-48页 |
| ·提纯病毒SDS-PAGE分析结果 | 第48页 |
| ·电镜观察结果 | 第48-52页 |
| ·结论与讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 ZYMV 3'末端序列的多态性研究 | 第54-77页 |
| ·材料和方法 | 第54-60页 |
| ·毒源与病毒分离 | 第54-55页 |
| ·酶与试剂 | 第55页 |
| ·RNA模板制备 | 第55页 |
| ·引物设计 | 第55页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第55-57页 |
| ·试剂盒回收目的片段 | 第57页 |
| ·连接反应 | 第57页 |
| ·感受态细胞的制备和重组质粒的转化 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第58页 |
| ·碱法裂解提取质粒 | 第58-59页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第59页 |
| ·序列测定及分析 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-75页 |
| ·3'末端序列的RT-PCR结果 | 第60页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第60-61页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第61-62页 |
| ·序列分析结果 | 第62-75页 |
| ·CP基因核苷酸序列分析结果 | 第62-64页 |
| ·CP氨基酸序列分析结果 | 第64-68页 |
| ·CP N端氨基酸序列分析结果 | 第68-69页 |
| ·CP核心区及C端氨基酸序列分析结果 | 第69-70页 |
| ·3'-UTR核苷酸序列分析结果 | 第70-75页 |
| ·结论与讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 CMV CP基因序列多态性分析 | 第77-89页 |
| ·材料和方法 | 第77-80页 |
| ·病毒分离物 | 第77-78页 |
| ·酶与试剂 | 第78页 |
| ·RNA模板制备 | 第78页 |
| ·引物设计 | 第78页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第78-79页 |
| ·CP基因的克隆和重组克隆的筛选 | 第79-80页 |
| ·序列测定和分析 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-87页 |
| ·RT-PCR结果 | 第80页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第80-81页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第81-82页 |
| ·序列测定及分析 | 第82-87页 |
| ·结论与讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 2种葫芦科侵染病毒发生的生态学研究 | 第89-101页 |
| ·材料和方法 | 第90-93页 |
| ·病毒分离物与质粒保存 | 第90页 |
| ·样品采集 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90页 |
| ·探针模板的制备 | 第90-91页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第91页 |
| ·RNA样品的变性与点膜 | 第91页 |
| ·杂交反应 | 第91-92页 |
| ·预杂交 | 第91-92页 |
| ·~(32)P标记DNA探针的制备 | 第92页 |
| ·杂交反应和洗膜 | 第92页 |
| ·点杂交条件试验的建立 | 第92-93页 |
| ·杂交准确度检测 | 第92-93页 |
| ·杂交灵敏度检测 | 第93页 |
| ·结果与分析 | 第93-99页 |
| ·样品采集 | 第93页 |
| ·探针模板的制备 | 第93-95页 |
| ·点杂交条件试验结果 | 第95-96页 |
| ·杂交准确度检测 | 第95-96页 |
| ·杂交灵敏度检测 | 第96页 |
| ·杂交检测结果 | 第96-99页 |
| ·结论与讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 2种葫芦科侵染病毒的致病性和品种抗性研究 | 第101-117页 |
| ·材料与方法 | 第102-104页 |
| ·致病性检测 | 第102-104页 |
| ·材料 | 第102页 |
| ·育苗 | 第102页 |
| ·接种 | 第102页 |
| ·症状观察 | 第102-103页 |
| ·病毒含量检测 | 第103页 |
| ·点杂交检测 | 第103页 |
| ·双抗体夹心酶联(DAS-ELISA) | 第103-104页 |
| ·抗病性检测 | 第104页 |
| ·材料 | 第104页 |
| ·方法 | 第104页 |
| ·结果与分析 | 第104-115页 |
| ·致病性检测结果 | 第104-112页 |
| ·病情指数统计 | 第104-109页 |
| ·病毒核酸负荷量的杂交检测结果 | 第109-110页 |
| ·DAS-ELISA检测结果 | 第110-112页 |
| ·抗病性鉴定结果 | 第112-115页 |
| ·结论与讨论 | 第115-117页 |
| 总讨论 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-126页 |
| 附件1 侵染葫芦科作物常见病毒的主要特征 | 第126-128页 |
| 附件2 重要溶液的配制 | 第128-130页 |
| 附件3 在读硕士期间的研究论文 | 第130页 |
| 附件4 在读硕士期间申请的专利和鉴定的成果 | 第130页 |
| 附件5 在读硕士期间获得的荣誉奖励 | 第130页 |
