第一章 文献综述 | 第1-35页 |
1. 植物抗病毒基因工程研究进展 | 第11-27页 |
1.1 利用病毒源基因获得抗病毒转基因植物 | 第11-21页 |
1.2 利用植物源基因获得抗病毒转基因植物 | 第21-25页 |
1.3 利用其它来源的基因获得抗病毒转基因植物 | 第25-26页 |
1.4 抗病毒植物基因工程的发展趋势 | 第26-27页 |
2. 美洲商陆抗病毒蛋白研究进展 | 第27-33页 |
2.1 核糖体失活蛋白(RIPs)的研究 | 第27-30页 |
2.1.1 核糖体失活蛋白的分类和结构 | 第27-28页 |
2.1.2 核糖体失活蛋白的生物学特性 | 第28-29页 |
2.1.3 核糖体失活蛋白与植物病毒病的防治 | 第29-30页 |
2.2 美洲商陆抗病毒蛋白(PAP)的研究 | 第30-33页 |
2.2.1 PAP研究的历史及意义 | 第30-31页 |
2.2.2 PAP的研究现状 | 第31-33页 |
3. 本研究的主要目的及研究内容 | 第33-35页 |
第二章 美洲商陆抗病毒蛋白基因的克隆及序列分析 | 第35-45页 |
1. 材料与方法 | 第35-40页 |
2. 结果与分析 | 第40-44页 |
2.1 商陆叶片总RNA的提取 | 第40页 |
2.2 RT—PCR扩增PAP基因 | 第40-41页 |
2.3 重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
2.4 基因序列的测定与分析 | 第42-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
第三章 PAP基因原核表达载体的构建、表达及其产物的活性检测 | 第45-53页 |
1. 材料与方法 | 第45-48页 |
2. 结果与分析 | 第48-52页 |
2.1 PAP原核表达载体的构建及鉴定 | 第48-49页 |
2.2 表达蛋白SDS-PAGE分析 | 第49页 |
2.3 表达蛋白Western-blot分析 | 第49-50页 |
2.4 原核表达产物抗血清的制备及其特异性鉴定 | 第50页 |
2.5 原核表达产物的活性检测 | 第50-52页 |
3. 讨论 | 第52-53页 |
第四章 烟草的遗传转化研究 | 第53-67页 |
1. 材料与方法 | 第53-60页 |
2. 结果与分析 | 第60-66页 |
2.1 植物表达载体的构建 | 第60-62页 |
2.2 农杆菌的转化及鉴定 | 第62页 |
2.3 烟草的转化 | 第62-63页 |
2.4 转基因烟草的分子鉴定 | 第63-64页 |
2.5 转基因烟草Western-blot分析 | 第64-65页 |
2.6 转基因烟草抗病毒活性检测 | 第65-66页 |
3. 讨论 | 第66-67页 |
第五章 玉米抗玉米矮花叶病害的遗传转化研究 | 第67-87页 |
一. 序言 | 第67-74页 |
1. 国内外研究玉米矮花叶病的基本概况 | 第67-69页 |
1.1 国外玉米矮花叶病研究之简史 | 第67-68页 |
1.2 国内玉米矮花叶病的简要回顾 | 第68-69页 |
2. SCMV生物学特性及分子生物学研究进展 | 第69-73页 |
2.1 玉米矮花叶病田间症状 | 第69页 |
2.2 病生理生化及组织病理学 | 第69-70页 |
2.3 SCMV的分类、分子生物学特性及基因组结构 | 第70-73页 |
3. 玉米矮花叶病的流行与防治 | 第73-74页 |
4. 本研究的意义 | 第74页 |
二. 玉米的遗传转化 | 第74-87页 |
1. 材料与方法 | 第74-78页 |
2. 结果与分析 | 第78-84页 |
2.1 含有PAP基因的重组质粒的构建及鉴定 | 第78-79页 |
2.2 转基因玉米植株的PCR检测 | 第79-80页 |
2.3 转基因玉米PCR-Southern-blot分析 | 第80页 |
2.4 转基因玉米RT-PCR鉴定 | 第80-81页 |
2.5 转基因玉米RT-PCR-Southern-blot鉴定 | 第81页 |
2.6 转基因玉米Western-blot鉴定 | 第81-82页 |
2.7 转基因玉米对甘蔗花叶病毒(SCMV)抗性鉴定 | 第82页 |
2.8 基因枪转化结果 | 第82-84页 |
3. 讨论 | 第84-87页 |
第六章 小麦抗病毒的遗传转化研究 | 第87-97页 |
一. 序言 | 第87-91页 |
1. 小麦抗病毒基因工程研究进展 | 第87-89页 |
1.1 CP介导的抗性 | 第87-88页 |
1.2 复制酶介导的抗性 | 第88-89页 |
2. 小麦抗病毒基因工程研究策略的展望 | 第89-90页 |
3. 本研究的意义 | 第90-91页 |
二. 小麦的转化 | 第91-97页 |
1. 材料与方法 | 第91-92页 |
2. 结果与分析 | 第92-95页 |
2.1 质粒的大量纯化 | 第92页 |
2.2 转基因小麦的分子检测 | 第92-95页 |
3. 讨论 | 第95-97页 |
第七章 棉花抗黄萎病的遗传转化研究 | 第97-108页 |
一. 序言 | 第97-100页 |
1. 棉花黄萎病的分布及为害 | 第97-98页 |
2. 棉花黄萎病菌种的鉴定 | 第98页 |
3. 棉花黄萎病菌的致病机理 | 第98-99页 |
4. 棉花黄萎病的防治 | 第99-100页 |
二. 棉花的转化 | 第100-108页 |
1. 材料与方法 | 第100-102页 |
2. 结果与分析 | 第102-106页 |
2.1 表达载体的构建及鉴定 | 第102-104页 |
2.2 转基因棉花的鉴定 | 第104-106页 |
3. 讨论 | 第106-108页 |
第八章 美洲商陆抗病毒蛋白真核表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达 | 第108-116页 |
1. 材料和方法 | 第109-111页 |
2. 结果与分析 | 第111-114页 |
2.1 表达载体pPIC9K-P的鉴定 | 第111-112页 |
2.2 PAP基因的诱导表达及表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第112-113页 |
2.3 表达蛋白的鉴定 | 第113页 |
2.4 表达蛋白抗病毒活性检测 | 第113-114页 |
3. 讨论 | 第114-116页 |
结论 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
作者简历 | 第144页 |