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美洲商陆抗病毒蛋白基因克隆、表达和遗传转化研究

第一章 文献综述第1-35页
 1. 植物抗病毒基因工程研究进展第11-27页
  1.1 利用病毒源基因获得抗病毒转基因植物第11-21页
  1.2 利用植物源基因获得抗病毒转基因植物第21-25页
  1.3 利用其它来源的基因获得抗病毒转基因植物第25-26页
  1.4 抗病毒植物基因工程的发展趋势第26-27页
 2. 美洲商陆抗病毒蛋白研究进展第27-33页
  2.1 核糖体失活蛋白(RIPs)的研究第27-30页
   2.1.1 核糖体失活蛋白的分类和结构第27-28页
   2.1.2 核糖体失活蛋白的生物学特性第28-29页
   2.1.3 核糖体失活蛋白与植物病毒病的防治第29-30页
  2.2 美洲商陆抗病毒蛋白(PAP)的研究第30-33页
   2.2.1 PAP研究的历史及意义第30-31页
   2.2.2 PAP的研究现状第31-33页
 3. 本研究的主要目的及研究内容第33-35页
第二章 美洲商陆抗病毒蛋白基因的克隆及序列分析第35-45页
 1. 材料与方法第35-40页
 2. 结果与分析第40-44页
  2.1 商陆叶片总RNA的提取第40页
  2.2 RT—PCR扩增PAP基因第40-41页
  2.3 重组质粒的鉴定第41-42页
  2.4 基因序列的测定与分析第42-44页
 3 讨论第44-45页
第三章 PAP基因原核表达载体的构建、表达及其产物的活性检测第45-53页
 1. 材料与方法第45-48页
 2. 结果与分析第48-52页
  2.1 PAP原核表达载体的构建及鉴定第48-49页
  2.2 表达蛋白SDS-PAGE分析第49页
  2.3 表达蛋白Western-blot分析第49-50页
  2.4 原核表达产物抗血清的制备及其特异性鉴定第50页
  2.5 原核表达产物的活性检测第50-52页
 3. 讨论第52-53页
第四章 烟草的遗传转化研究第53-67页
 1. 材料与方法第53-60页
 2. 结果与分析第60-66页
  2.1 植物表达载体的构建第60-62页
  2.2 农杆菌的转化及鉴定第62页
  2.3 烟草的转化第62-63页
  2.4 转基因烟草的分子鉴定第63-64页
  2.5 转基因烟草Western-blot分析第64-65页
  2.6 转基因烟草抗病毒活性检测第65-66页
 3. 讨论第66-67页
第五章 玉米抗玉米矮花叶病害的遗传转化研究第67-87页
 一. 序言第67-74页
  1. 国内外研究玉米矮花叶病的基本概况第67-69页
   1.1 国外玉米矮花叶病研究之简史第67-68页
   1.2 国内玉米矮花叶病的简要回顾第68-69页
  2. SCMV生物学特性及分子生物学研究进展第69-73页
   2.1 玉米矮花叶病田间症状第69页
   2.2 病生理生化及组织病理学第69-70页
   2.3 SCMV的分类、分子生物学特性及基因组结构第70-73页
  3. 玉米矮花叶病的流行与防治第73-74页
  4. 本研究的意义第74页
 二. 玉米的遗传转化第74-87页
  1. 材料与方法第74-78页
  2. 结果与分析第78-84页
   2.1 含有PAP基因的重组质粒的构建及鉴定第78-79页
   2.2 转基因玉米植株的PCR检测第79-80页
   2.3 转基因玉米PCR-Southern-blot分析第80页
   2.4 转基因玉米RT-PCR鉴定第80-81页
   2.5 转基因玉米RT-PCR-Southern-blot鉴定第81页
   2.6 转基因玉米Western-blot鉴定第81-82页
   2.7 转基因玉米对甘蔗花叶病毒(SCMV)抗性鉴定第82页
   2.8 基因枪转化结果第82-84页
  3. 讨论第84-87页
第六章 小麦抗病毒的遗传转化研究第87-97页
 一. 序言第87-91页
  1. 小麦抗病毒基因工程研究进展第87-89页
   1.1 CP介导的抗性第87-88页
   1.2 复制酶介导的抗性第88-89页
  2. 小麦抗病毒基因工程研究策略的展望第89-90页
  3. 本研究的意义第90-91页
 二. 小麦的转化第91-97页
  1. 材料与方法第91-92页
  2. 结果与分析第92-95页
   2.1 质粒的大量纯化第92页
   2.2 转基因小麦的分子检测第92-95页
  3. 讨论第95-97页
第七章 棉花抗黄萎病的遗传转化研究第97-108页
 一. 序言第97-100页
  1. 棉花黄萎病的分布及为害第97-98页
  2. 棉花黄萎病菌种的鉴定第98页
  3. 棉花黄萎病菌的致病机理第98-99页
  4. 棉花黄萎病的防治第99-100页
 二. 棉花的转化第100-108页
  1. 材料与方法第100-102页
  2. 结果与分析第102-106页
   2.1 表达载体的构建及鉴定第102-104页
   2.2 转基因棉花的鉴定第104-106页
  3. 讨论第106-108页
第八章 美洲商陆抗病毒蛋白真核表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达第108-116页
 1. 材料和方法第109-111页
 2. 结果与分析第111-114页
  2.1 表达载体pPIC9K-P的鉴定第111-112页
  2.2 PAP基因的诱导表达及表达蛋白的SDS-PAGE分析第112-113页
  2.3 表达蛋白的鉴定第113页
  2.4 表达蛋白抗病毒活性检测第113-114页
 3. 讨论第114-116页
结论第116-117页
参考文献第117-143页
致谢第143-144页
作者简历第144页

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