| 1 文献综述 | 第1-21页 |
| 1．1 植物基因转移技术的研究进展 | 第7-12页 |
| 1．1．1 目的基因的分离 | 第7页 |
| 1．1．2 植物表达载体的构建 | 第7-8页 |
| 1．1．3 植物转基因方法 | 第8-10页 |
| 1．1．4 转基因植物的筛选与鉴定 | 第10-12页 |
| 1．2 利用植物表达系统生产药用蛋白的研究进展 | 第12-15页 |
| 1．2．1 植物表达系统生产外源蛋白的方式 | 第12-15页 |
| 1．3 植物表达系统生产药用蛋白的可行性 | 第15-17页 |
| 1．3．1 植物表达系统生产药用蛋白的优点 | 第15-16页 |
| 1．3．2 植物表达系统生产药用蛋白的医学依据 | 第16-17页 |
| 1．4 植物表达系统生产药用蛋白存在的问题及解决途径 | 第17-18页 |
| 1．4．1 口服药用蛋白能否耐受胃酸和各种消化酶的作用 | 第17页 |
| 1．4．2 提高转基因植物中药用蛋白的表达水平 | 第17页 |
| 1．4．3 转基因植物的风险性和安全性 | 第17-18页 |
| 1．5 降钙素研究进展 | 第18-20页 |
| 1．5．1 降钙素的应用 | 第19页 |
| 1．5．2 降钙素的生产 | 第19-20页 |
| 1．6 本研究的目的、意义及主要内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-27页 |
| 2．1 材料 | 第21页 |
| 2．1．1 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2．1．2 植物品种 | 第21页 |
| 2．1．3 各种工具酶和化学试剂 | 第21页 |
| 2．1．4 培养基 | 第21页 |
| 2．2 方法 | 第21-27页 |
| 2．2．1 质粒DNA的碱裂解法小量制备 | 第21-22页 |
| 2．2．2 试剂盒抽提质粒DNA并纯化 | 第22页 |
| 2．2．3 DNA的限制性酶切 | 第22页 |
| 2．2．4 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| 2．2．5 DNA片段的回收 | 第22页 |
| 2．2．6 线性质粒DNA的去磷酸化 | 第22-23页 |
| 2．2．7 DNA片段的连接 | 第23页 |
| 2．2．8 感受态细胞的制备 | 第23页 |
| 2．2．9 细菌的转化 | 第23-24页 |
| 2．2．10 DNA引物合成 | 第24页 |
| 2．2．11 重组质粒目的基因DNA片段的测序 | 第24页 |
| 2．2．12 sCT基因DNA片段的PCR扩增 | 第24页 |
| 2．2．13 生菜植株高频率再生转化体系的建立 | 第24-25页 |
| 2．2．14 外源基因转化植物 | 第25页 |
| 2．2．15 胡萝卜愈伤组织粗蛋白的提取 | 第25-26页 |
| 2．2．16 酶联免疫（ELISA）检测sCT的瞬时表达 | 第26页 |
| 2．2．17 植物基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 2．2．18 PCR检测转基因烟草和生菜 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 3．1 SCT基因植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 3．1．1 中间表达载体pART7-sCT的构建和酶切鉴定 | 第28页 |
| 3．1．2 植物表达载体pART27-sCT的构建和酶切鉴定 | 第28-29页 |
| 3．1．3 重组质粒pART27-sCT的测序 | 第29页 |
| 3．1．4 重组质粒pART27-sCT转化至根癌农杆菌 | 第29页 |
| 3．2 SCT基因在胡萝卜愈伤组织中的瞬时表达 | 第29-30页 |
| 3．3 大速生散叶生菜再生体系的建立 | 第30-32页 |
| 3．3．1 生菜品种的选择 | 第30页 |
| 3．3．2 不同激素浓度对大速生散叶生菜子叶再生率的影响 | 第30-31页 |
| 3．3．3 大速生散叶生菜抗生素敏感性测定 | 第31-32页 |
| 3．4 SCT基因向烟草及生菜的遗传转化 | 第32-34页 |
| 3．4．1 转基因烟草及生菜抗性植株的获得 | 第32-33页 |
| 3．4．2 转基因烟草及生菜植株的分子检测 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 4．1 SCT基因植物表达载体的构建 | 第34页 |
| 4．2 影响生菜再生的因素 | 第34-35页 |
| 4．3 影响生菜子叶转化的因素 | 第35-36页 |
| 5． 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 附图 | 第43-44页 |
