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人血小板生成素乳腺表达载体的构建

致谢第1-7页
摘要第7-8页
1. 文献综述第8-23页
   ·哺乳动物乳腺生物反应器的研究进展第8-16页
     ·哺乳动物乳腺生物反应器的构建第8-10页
     ·乳腺生物反应器调控元件第10-13页
     ·影响外源基因表达效率的因素及提高措施第13-15页
     ·应用前景与展望第15-16页
   ·血小板生成素的研究进展第16-23页
     ·TPO 的分子生物学特性第17-18页
     ·TPO与C-MPL的产生及其生物学作用第18-20页
     ·TPO 发挥生物学作用的机理第20-21页
     ·TPO的活性检测方法第21页
     ·应用前景与展望第21-23页
2. 引言第23-24页
试验一:小鼠β-酪蛋白、奶牛β-酪蛋白和人血小板生成素基因的克隆及序列分析第24-36页
 3. 材料与方法第24-32页
   ·材料第24-26页
   ·实验方法第26-28页
   ·PCR 反应第28-29页
   ·琼脂糖凝胶的配制与电泳分析第29页
   ·PCR 产物的回收和纯化第29-30页
   ·感受态细胞的制备第30-31页
   ·质粒 DNA 的提取第31-32页
 4. 结果与分析第32-36页
   ·基因组 DNA 的提取第32页
   ·牛β-酪蛋白、小鼠β-酪蛋白和人血小板生成素基因的克隆第32-34页
   ·测序分析第34页
   ·分析与讨论第34-36页
试验二:载体构建第36-43页
 5. 含酶切位点目的片段基因的克隆第36-39页
   ·添加酶切位点第36-37页
   ·PCR反应第37页
   ·琼脂糖凝胶的配制与电泳分析第37页
   ·PCR 产物的回收和纯化第37页
   ·感受态细胞的制备第37-38页
   ·质粒 DNA 的提取第38-39页
 6. 结果与分析第39-43页
   ·牛β-酪蛋白、小鼠β-酪蛋白和人血小板生成素基因的克隆第39-41页
   ·酶切鉴定第41-42页
   ·小鼠β-酪蛋白、牛β-酪蛋白和人血小板生成素基因与载体pcDNA3.1(+)的连接第42-43页
7. 分析与讨论第43页
8. 后继研究展望第43-44页
参考文献第44-50页
英文摘要第50-51页

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