| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 综述 RNA干扰药物的研究进展 | 第9-22页 |
| 1 RNAi的作用机制 | 第9-10页 |
| 2 RNAi作用的特点 | 第10-11页 |
| 3 RNAi治疗药物的临床应用 | 第11-16页 |
| ·RNAi的抗病毒作用 | 第12页 |
| ·RNAi在肿瘤治疗中的应用 | 第12-14页 |
| ·RNAi在治疗基因病中的应用 | 第14-15页 |
| ·RNAi技术中应关注的问题 | 第15-16页 |
| ·体内导入途经问题 | 第15页 |
| ·脱靶效应 | 第15-16页 |
| ·免疫反应 | 第16页 |
| ·对siRNA作用的抵抗 | 第16页 |
| 4 不对称双链小干扰RNA(asymmetric interfering RNA,asiRNA) | 第16-17页 |
| 5 前景展望 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 第二章 靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA的稳定性和体内分布研究 | 第22-33页 |
| 1 绪言 | 第22-23页 |
| 2 材料 | 第23页 |
| 3 方法与结果 | 第23-30页 |
| ·asiRNA的合成 | 第23-24页 |
| ·内皮抑素-脂质胶束-asiRNA混合物的制备 | 第24-25页 |
| ·内皮抑素-脂质胶束-asiRNA组合物的粒径和Zeta电位测定 | 第25-26页 |
| ·asiRNA体外稳定性测试 | 第26-27页 |
| ·ELISA方法检测QasiRNA在小鼠体内的分布 | 第27-28页 |
| ·活体荧光成像法检测CyasiRNA的荧光分布 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-33页 |
| 第三章 不对称小RNA干扰抑制BGC-803细胞中VEGF基因功能的实验研究 | 第33-49页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·肿瘤细胞 | 第34页 |
| ·siRNA和asiRNA | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·siRNA和asiRNA序列的设计和合成 | 第35-36页 |
| ·BGC-803细胞的培养 | 第36页 |
| ·小干扰片段的转染 | 第36-37页 |
| ·转染后的细胞总RNA的提取 | 第37页 |
| ·cDNA合成 | 第37-38页 |
| ·Q-RT-PCR检测VEGF基因mRNA表达水平 | 第38页 |
| ·流式细胞术检测转染后细胞表面VEGF蛋白表达水平 | 第38-40页 |
| ·小干扰RNA的转染 | 第38-39页 |
| ·BGC-803细胞的处理 | 第39-40页 |
| ·CCK8检测asiRNA和siRNA对BGC-803细胞毒性影响及IC50值的测定 | 第40-41页 |
| ·连续转染小干扰RNA对BGC-803细胞的生长的影响 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·不对称siRNA的序列 | 第41-42页 |
| ·Q-RT-PCR检测小干扰RNA转染BGC-803细胞对VEGF的mRNA表达水平的影响#41 | 第42页 |
| ·流式细胞术检测RNA干扰后细胞中VEGF蛋白水平的变化 | 第42-44页 |
| ·转染人鼠23/23siRNA和人鼠21/23asiRNA后对BGC-803细胞毒性的影响 | 第44-45页 |
| ·连续转染小干扰RNA对BGC-803细胞的生长的影响 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第四章 bcl2和VEGF基因的不对称siRNA对BGC-803胃癌裸鼠移植瘤抑制试验 | 第49-62页 |
| 1 绪言 | 第49-50页 |
| 2 研究目的 | 第50-51页 |
| 3 材料与方法 | 第51-55页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·siRNA和asiRNA | 第51页 |
| ·裸鼠 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·肿瘤模型的建立 | 第51-52页 |
| ·药品配制 | 第52-53页 |
| ·各组给药途径、方法、体积、频率及期限 | 第53-54页 |
| ·症状观察与检测指标 | 第54页 |
| ·动物尸体及废弃物处理 | 第54-55页 |
| 4 结果 | 第55-59页 |
| ·bcl2和VEGF基因RNA干扰对人体胃癌BGC-803裸鼠体重的影响 | 第55-56页 |
| ·bcl2-asiRNA和bcl2-asiRNA联合治疗对人体胃癌BGC-803裸鼠移植瘤的抑制作用#55 | 第56-58页 |
| ·VEGF小RNA干扰和VEGF小RNA干扰联合治疗对人体胃癌BGC-803裸鼠移植瘤的抑制作用 | 第58-59页 |
| 5 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 附录 就读硕士研究生期间发表、投寄的论文和申请的专利 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
