| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-35页 |
| ·微量元素和糖尿病 | 第19-21页 |
| ·铬及GTF和糖尿病 | 第21-27页 |
| ·铬与糖尿病 | 第21-23页 |
| ·GTF—高活性的铬补充剂 | 第23-24页 |
| ·GTF 作用机理 | 第24-27页 |
| ·微生物发酵生产GTF | 第27-30页 |
| ·酵母发酵生产GTF的研究 | 第27页 |
| ·GTF的结构研究 | 第27-29页 |
| ·国内研究进展 | 第29-30页 |
| ·GTF的检测 | 第30-32页 |
| ·铬的检测 | 第30-31页 |
| ·GTF功能活性的检测 | 第31-32页 |
| ·GTF研究中一些问题 | 第32-33页 |
| ·酵母对铬的富集 | 第32页 |
| ·铬源的选择 | 第32页 |
| ·GTF的有效提取 | 第32-33页 |
| ·研究内容及实验设计 | 第33-35页 |
| 第二章 GTF提取及检测方法的确定 | 第35-43页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·仪器与试剂 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·培养基的制备方法 | 第36页 |
| ·蛋白质含量的测定方法 | 第36页 |
| ·富铬酵母的培养方法 | 第36页 |
| ·GTF的提取方法 | 第36-37页 |
| ·微波消解方法 | 第37页 |
| ·普通加热消解方法 | 第37页 |
| ·铬的测定方法 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-42页 |
| ·GTF中的铬的测定 | 第37-38页 |
| ·GTF的提取 | 第38-41页 |
| ·GTF提取及检测方法的验证 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 GTF高产量酵母菌株筛选与诱变育种 | 第43-51页 |
| ·前言 | 第43-44页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·仪器与试剂 | 第44页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·培养基的制备方法 | 第44页 |
| ·太空搭载飞行参数 | 第44页 |
| ·耐铬性酵母平板初筛方法 | 第44-45页 |
| ·液体发酵复筛方法 | 第45页 |
| ·传代稳定性试验 | 第45页 |
| ·菌体内有机铬的测定方法 | 第45页 |
| ·菌体内总铬的测定方法 | 第45-46页 |
| ·菌体生物量测定方法 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·添加铬液的灭菌方式 | 第46-47页 |
| ·耐铬性GTF高产菌初筛 | 第47页 |
| ·耐铬性GTF高产菌复筛 | 第47-48页 |
| ·筛选菌种遗传稳定性 | 第48页 |
| ·出发菌株和诱变后菌株生长比较 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 GTF高产菌株发酵条件及富铬动态变化研究 | 第51-61页 |
| ·前言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·仪器与试剂 | 第51-52页 |
| ·菌种 | 第52页 |
| ·培养基的制备方法 | 第52页 |
| ·摇瓶发酵方法 | 第52页 |
| ·50L发酵罐发酵工艺 | 第52-53页 |
| ·菌体内有机铬的测定方法 | 第53页 |
| ·菌体内总铬的测定方法 | 第53页 |
| ·菌体生物量测定方法 | 第53页 |
| ·发酵液pH 测定方法 | 第53页 |
| ·发酵液中葡萄糖的测定方法 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-59页 |
| ·铬离子对YS-3 生长和富铬的影响 | 第53-54页 |
| ·不同培养基对菌体生长和富铬的影响 | 第54-55页 |
| ·YS-3 在含铬和无铬条件下的生长特性比较 | 第55-56页 |
| ·铬离子存在下发酵液中葡萄糖消减动态变化 | 第56页 |
| ·菌体富铬动态变化 | 第56-57页 |
| ·不同加铬方式对GTF产量的影响 | 第57-58页 |
| ·50L发酵罐分批补料发酵实验 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 第五章 铬对菌体蛋白结构的影响 | 第61-72页 |
| ·前言 | 第61-62页 |
| ·材料与方法 | 第62-64页 |
| ·仪器与试剂 | 第62页 |
| ·菌种 | 第62页 |
| ·富铬菌体细胞的培养与收集 | 第62页 |
| ·无铬菌体细胞的培养与收集 | 第62-63页 |
| ·氨水提取富铬酵母GTF及浓缩处理 | 第63页 |
| ·氨水提取空白酵母及浓缩处理 | 第63页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析 | 第63页 |
| ·层析液中金属Cr含量的测定 | 第63-64页 |
| ·中红外测定方法 | 第64页 |
| ·红外光谱数据处理技术 | 第64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-71页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第64-67页 |
| ·中红外图谱分析 | 第67-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第六章 酵母源性葡萄糖耐量因子的分离纯化研究 | 第72-97页 |
| ·前言 | 第72-73页 |
| ·蛋白质分离纯化技术 | 第72-73页 |
| ·酵母源性葡萄糖耐量因子分离纯化方法 | 第73页 |
| ·材料与方法 | 第73-77页 |
| ·仪器与试剂 | 第73-74页 |
| ·菌种 | 第74页 |
| ·富铬菌体细胞的培养与收集 | 第74页 |
| ·氨水提取富铬酵母GTF及浓缩处理 | 第74页 |
| ·100kD、50kD、10KD超滤离心 | 第74页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析 | 第74页 |
| ·Sephadex G-25 凝胶过滤层析 | 第74-75页 |
| ·Sephadex G-15 凝胶过滤层析 | 第75页 |
| ·HPLC-ICP- MS/AES微量分析金属铬和蛋白的分布 | 第75页 |
| ·紫外全波长扫描 | 第75-76页 |
| ·层析液中金属Cr含量的测定 | 第76页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第76页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第76页 |
| ·生物质谱分析 | 第76页 |
| ·蛋白质/多肽-N末端序列分析-自动Edman降解法 | 第76-77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-96页 |
| ·HPLC-ICP- MS/AES微量分析 Sephadex G-75 凝胶层析 Peak1、Peak2 中金属铬和蛋白的分布 | 第79-81页 |
| ·超滤离心 | 第81-82页 |
| ·Sephadex G-25 凝胶过滤层析 | 第82-83页 |
| ·Sephadex G-15 凝胶脱盐层析 | 第83-84页 |
| ·紫外全波长扫描 | 第84页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第84-85页 |
| ·HPLC-ICP-MS/AES联用分析PP1 分离纯度 | 第85-87页 |
| ·MALDI-TOF-TOF-MS质谱分析 | 第87-92页 |
| ·蛋白质/多肽-N末端序列分析 | 第92-94页 |
| ·LC-ESI-MS质谱分析 | 第94-96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 第七章 GTF对糖尿病降糖降脂的研究 | 第97-109页 |
| ·前言 | 第97-98页 |
| ·材料与方法 | 第98-100页 |
| ·实验材料 | 第98页 |
| ·菌种 | 第98页 |
| ·试验动物 | 第98页 |
| ·仪器和试剂 | 第98页 |
| ·糖尿病造模方法 | 第98页 |
| ·试验动物分组及处理 | 第98页 |
| ·日常血糖测定 | 第98-99页 |
| ·糖耐量试验 | 第99页 |
| ·血清中铬的测定 | 第99页 |
| ·菌体内有机铬的测定方法 | 第99页 |
| ·血液生化指标测定 | 第99页 |
| ·胰腺病理学检查 | 第99-100页 |
| ·数据分析 | 第100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-107页 |
| ·饲喂期间体重和血糖的变化 | 第100-101页 |
| ·血清中铬的水平 | 第101-102页 |
| ·血脂水平 | 第102页 |
| ·血清胰岛素和糖基化血红蛋白的水平 | 第102-103页 |
| ·糖耐量试验 | 第103-104页 |
| ·胰腺组织病理学检查 | 第104-107页 |
| ·小结 | 第107-109页 |
| 第八章 全文结论与工作展望 | 第109-113页 |
| ·本文实验研究总结 | 第109-111页 |
| ·GTF提取及检测方法的建立 | 第109页 |
| ·GTF高产菌的筛选 | 第109页 |
| ·GTF高产菌发酵条件及富铬动态变化研究 | 第109-110页 |
| ·铬对菌体蛋白结构影响的研究 | 第110页 |
| ·GTF的分离纯化 | 第110页 |
| ·GTF对糖尿病动物降糖降脂的研究 | 第110-111页 |
| ·论文的创新点 | 第111页 |
| ·工作展望 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 作者简历 | 第124页 |
