| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·芳环羟基化酶的介绍 | 第11-15页 |
| ·芳环羟基化酶的微生物来源 | 第11-12页 |
| ·芳环羟基化酶的结构和分类 | 第12-15页 |
| ·联苯双加氧酶的相关研究 | 第15-21页 |
| ·联苯双加氧酶的结构分析 | 第15-18页 |
| ·联苯双加氧酶中末端氧化酶的关键氨基酸分析 | 第18-19页 |
| ·联苯双加氧酶中末端氧化酶的分子改造 | 第19-20页 |
| ·联苯双加氧酶的纯化方法 | 第20-21页 |
| ·微量热仪的原理和方法 | 第21-23页 |
| 2 联苯双加氧酶的克隆与表达 | 第23-45页 |
| ·引言 | 第23-24页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·菌株、质粒和试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·降解菌LY402的复壮及驯化 | 第27页 |
| ·质粒提取 | 第27-29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第29页 |
| ·联苯双加氧酶基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·PCR产物凝胶回收 | 第30-31页 |
| ·产物与载体的双酶切及连接 | 第31页 |
| ·重组载体的转化 | 第31-32页 |
| ·序列测定 | 第32页 |
| ·联苯双加氧酶在大肠杆菌中的表达 | 第32-34页 |
| ·实验结果与讨论 | 第34-44页 |
| ·联苯双加氧酶各基因和表达框架EFw基因的PCR扩增 | 第34-37页 |
| ·联苯双加氧酶各基因和表达框架EFw基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·联苯双加氧酶的的表达 | 第40-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 3 末端氧化酶的分离纯化 | 第45-51页 |
| ·引言 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·材料和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·细胞破碎 | 第45页 |
| ·聚乙烯亚胺沉淀 | 第45-46页 |
| ·Q柱阴离子交换层析 | 第46页 |
| ·苯基疏水作用层析 | 第46-47页 |
| ·考马斯亮蓝蛋白定量法 | 第47页 |
| ·实验结果与讨论 | 第47-50页 |
| ·Q柱阴离子交换层析 | 第47-48页 |
| ·苯基疏水作用层析 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 4 末端氧化酶底物选择性的研究 | 第51-59页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·材料和试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·考马斯亮蓝蛋白定量法 | 第52页 |
| ·微量热检测芳香环污染物与末端氧化酶相互作用后能量的变化 | 第52页 |
| ·降解菌LY402的复壮及驯化 | 第52页 |
| ·六种芳香环污染物标准曲线的测定 | 第52页 |
| ·六种芳香环污染物溶解度的检测 | 第52页 |
| ·LY402对六种芳香环污染物的降解能力检测 | 第52-53页 |
| ·分子对接的方法 | 第53页 |
| ·实验结果与讨论 | 第53-58页 |
| ·末端氧化酶与底物的结合焓与LY402对底物降解能力的关系 | 第53-54页 |
| ·末端氧化酶与底物结合后的底物分子特征与LY402对底物降解速率的关系 | 第54-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
