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玉米大斑病菌交配型基因的克隆与两性菌株的育性分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 引言第10-14页
2 材料和方法第14-25页
   ·试验材料第14-16页
     ·供试菌株和寄主第14页
     ·供试培养基第14-15页
     ·主要仪器设备第15页
     ·供试试剂第15页
     ·试验所需缓冲液第15-16页
   ·玉米大斑病菌有性态的诱导第16-17页
     ·菌种复壮与分离纯化第16页
     ·玉米大斑病菌有性态的诱导第16-17页
   ·玉米大斑病菌交配型MAT基因同源片段的克隆第17-19页
     ·玉米大斑病菌基因组DNA的提取第17页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第17页
     ·简并引物的设计第17页
     ·交配型基因同源片段的克隆第17-18页
     ·PCR扩增产物的凝胶回收第18页
     ·PCR扩增产物的测序第18-19页
     ·基因片段的同源性分析第19页
   ·GENOME WALKING技术获得MAT基因及其侧翼序列第19-21页
     ·基因组DNA的提取第19页
     ·酶切基因组DNA第19-20页
     ·酶切基因组DNA的纯化第20页
     ·合成接头第20页
     ·连接第20页
     ·PCR扩增交配型基因的全长及侧翼序列第20-21页
   ·交配型MAT基因cDNA全长的获得第21-22页
     ·玉米大斑病菌总RNA的提取第21页
     ·RNA质量的检测第21页
     ·第一链cDNA的合成第21-22页
     ·交配型基因cDNA全长的克隆第22页
   ·SOUTHERN杂交验证交配型基因的拷贝数第22-24页
     ·探针制备第22-23页
     ·限制性内酶酶切基因组DNA第23页
     ·转膜第23页
     ·杂交第23-24页
   ·玉米大斑病菌菌株交配型的分子生物学测定第24-25页
3 结果与分析第25-42页
   ·有性态诱导与两性菌株自交的育性分析第25-26页
   ·病菌基因组DNA与总RNA的提取及第一链cDNA的合成第26页
   ·交配型MAT1基因的克隆与生物信息学分析第26-33页
     ·交配型MAT1基因片段的获得第26-27页
     ·交配型MAT1基因全长及侧翼序列的获得第27-29页
     ·交配型MAT1基因cDNA全长的获得及生物信息学分析第29-33页
   ·交配型MAT2基因的克隆与生物信息学分析第33-39页
     ·交配型MAT2基因全长及侧翼序列的获得第33-35页
     ·交配型MAT2基因cDNA全长的获得及生物信息学分析第35-39页
   ·交配型MAT1基因和MAT2基因侧翼序列的同源性分析第39页
   ·SOUTHERN杂交验证MAT基因拷贝数第39-40页
   ·玉米大斑病菌各菌株交配型测定结果第40-42页
4 讨论第42-43页
5 结论第43-44页
参考文献第44-49页
在读期间发表的学术论文第49-50页
作者简历第50-51页
致谢第51-52页
发表文章第52-62页

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