| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-32页 |
| ·类弹性蛋白介绍 | 第10-14页 |
| ·类弹性蛋白的研究历程 | 第10-11页 |
| ·类弹性蛋白的相变特性及机理 | 第11-13页 |
| ·类弹性蛋白的合成方法 | 第13-14页 |
| ·类弹性蛋白的应用 | 第14-30页 |
| ·类弹性蛋白在组织工程方面的应用 | 第14-18页 |
| ·类弹性蛋白在药物载体方面的应用 | 第18-23页 |
| ·类弹性蛋白在重组蛋白分离纯化方面的应用 | 第23-30页 |
| ·研究内容及意义 | 第30-32页 |
| 2 类弹性蛋白基因的克隆 | 第32-45页 |
| ·实验材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·载体质粒和菌株 | 第32页 |
| ·主要实验试剂 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| ·全基因合成法合成ELP Block | 第33页 |
| ·克隆载体的构建 | 第33-37页 |
| ·递归定向连接技术克隆不同长度的类弹性蛋白基因 | 第37-41页 |
| ·测定克隆片段序列 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·克隆载体修饰的检测结果 | 第41-42页 |
| ·双酶切反应检测克隆载体 | 第42-43页 |
| ·双酶切反应检测表达载体 | 第43-44页 |
| ·测定重组质粒的序列 | 第44-45页 |
| 3 类弹性蛋白基因的表达和分离纯化 | 第45-53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第45页 |
| ·菌株 | 第45页 |
| ·主要实验试剂 | 第45页 |
| ·主要实验仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·制备电转化感受态 | 第45-46页 |
| ·电击转化重组质粒 | 第46页 |
| ·过夜诱导表达菌体 | 第46-47页 |
| ·Western blot | 第47-48页 |
| ·表达蛋白可溶性与不溶性状态检测 | 第48-49页 |
| ·镍柱分离纯化类弹性蛋白 | 第49-50页 |
| ·ITC纯化类弹性蛋白 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·类弹性蛋白表达的检测 | 第50-51页 |
| ·分离纯化类弹性蛋白的检测 | 第51-53页 |
| 4 类弹性蛋白相变温度及不同因素对其影响 | 第53-59页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·类弹性蛋白溶液的超滤 | 第53页 |
| ·类弹性蛋白的定量 | 第53-54页 |
| ·类弹性蛋白相变温度的测定 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·类弹性蛋白的相变温度测定 | 第54-55页 |
| ·类弹性蛋白浓度对相变温度的影响 | 第55-56页 |
| ·NaCl和(NH_4)_2SO_4对类弹性蛋白相变温度的影响 | 第56-58页 |
| ·PEG8000对类弹性蛋白相变温度的影响 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录A 重组质粒基因序列和编码氨基酸序列 | 第67-73页 |
| 附录B 重组质粒图谱 | 第73-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |