缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-33页 |
实验一 非标记型SERS技术用于肺腺癌组织的EGFR突变检测研究 | 第33-46页 |
1 材料 | 第33-34页 |
1.1 主要试剂及来源 | 第33页 |
1.2 主要仪器及来源 | 第33-34页 |
2 方法 | 第34-38页 |
2.1 细胞培养与爬片 | 第34页 |
2.2 DNA、RNA、总蛋白提取 | 第34-35页 |
2.3 肺癌组织标本获取 | 第35页 |
2.4 sARMS法检测EGFR突变基因 | 第35-36页 |
2.5 肿瘤组织蜡块制作与切片 | 第36页 |
2.6 H&E及IHC染色 | 第36页 |
2.7 拉曼光谱测定及数据处理 | 第36-37页 |
2.8 PCA/SVM模型的构建及统计学分析 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-42页 |
3.1 临床患者EGFR突变检测情况 | 第38页 |
3.2 入组患者的一般情况 | 第38-40页 |
3.4 主成分分析 | 第40-42页 |
3.5 PCA/SVM判别模型的构建和检测 | 第42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
小结 | 第45-46页 |
实验二 金纳米细胞探针用于肺癌胸腔积液脱落细胞EGFR突变检测的研究 | 第46-61页 |
1 材料 | 第46-47页 |
1.1 主要试剂及来源 | 第46-47页 |
1.2 主要仪器及来源 | 第47页 |
2 方法 | 第47-51页 |
2.1 “海胆样”金纳米颗粒的制备 | 第47-48页 |
2.2 “海胆样”金纳米颗粒的物理学表征 | 第48页 |
2.3 金纳米细胞探针的合成 | 第48-49页 |
2.4 肺癌细胞培养与爬片 | 第49页 |
2.5 胸腔积液标本收集 | 第49-50页 |
2.6 sARMS法检测EGFR突变基因 | 第50页 |
2.7 肿瘤组织蜡块制作与切片 | 第50页 |
2.8 H&E染色、IHC染色及免疫荧光染色 | 第50页 |
2.9 拉曼光谱测定及信号数据预处理 | 第50-51页 |
2.10 PCA/SVM模型的构建及统计学分析 | 第51页 |
3 结果 | 第51-58页 |
3.1 金纳米细胞探针的构建及表征 | 第51-54页 |
3.2 肺癌细胞的靶向功能检测及细胞内分布 | 第54-56页 |
3.3 金纳米细胞探针检测灵敏度 | 第56-57页 |
3.4 金纳米细胞探针在肺癌胸腔积液脱落细胞中的检测应用 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
小结 | 第60-61页 |
实验三 金纳米核酸探针用于肺癌外周血CTDNA EGFR突变检测的研究 | 第61-72页 |
1 材料 | 第61-62页 |
1.1 主要试剂及来源 | 第61页 |
1.2 主要仪器及来源 | 第61-62页 |
2 方法 | 第62-66页 |
2.1 “海胆样”金纳米颗粒的制备 | 第62-63页 |
2.2 “海胆样”金纳米颗粒的物理学表征 | 第63页 |
2.3 茎环状DNA分子信标及扩增引物合成 | 第63-64页 |
2.4 金纳米核酸探针的自组装合成 | 第64页 |
2.5 肺癌细胞培养 | 第64页 |
2.6 DNA提取 | 第64-65页 |
2.7 血液标本收集 | 第65页 |
2.8 sARMS法检测EGFR突变基因 | 第65页 |
2.9 不对称PCR | 第65页 |
2.10 拉曼光谱测定及信号数据预处理 | 第65-66页 |
3 结果 | 第66-69页 |
3.1 金纳米核酸探针的构建与表征 | 第66-67页 |
3.2 金纳米核酸探针在肺癌细胞中的检测研究 | 第67-68页 |
3.3 金纳米核酸探针在肺癌患者外周血ctDNA中的检测研究 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-84页 |
附录 | 第84-85页 |
个人简历和研究成果 | 第85-90页 |
致谢 | 第90页 |