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桦褐孔菌甾类化合物的分析及深层液态发酵条件的优化

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 引言第9-17页
   ·桦褐孔菌简介第9-10页
     ·桦褐孔菌生物学特性与人工培养第9-10页
     ·桦褐孔菌的药理作用与其次级代谢产物的研究现状第10页
   ·甾类化合物的概述第10-15页
     ·甾类化合物的结构性状、来源及理化性质第11页
     ·甾类化合物的分析方法第11-13页
       ·可见光比色法第12页
       ·薄层色谱法第12页
       ·气相色谱法第12-13页
       ·高效液相色谱法第13页
     ·甾类化合物的生物学活性第13-14页
       ·抗炎和退热作用第13-14页
       ·降胆固醇作用第14页
       ·抗癌作用第14页
     ·甾类化合物的应用第14-15页
       ·临床医学第14-15页
       ·甾体药物原料第15页
       ·化妆品第15页
       ·食品工业第15页
   ·本课题的立题背景及研究意义第15-16页
   ·课题的研究任务第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-24页
   ·试剂与仪器、设备第17-18页
     ·主要试剂第17-18页
     ·主要设备第18页
   ·实验菌种第18-19页
     ·菌种来源第18页
     ·菌种保藏与活化第18-19页
     ·培养基第19页
     ·培养条件第19页
   ·桦褐孔菌菌株的形态学鉴定方法第19页
     ·平板培养特性的观察第19页
     ·形态学鉴定第19页
   ·桦褐孔菌菌株的分子生物学学鉴定方法第19-20页
     ·DNA 提取第19页
     ·18S rDNA 和 ITS 区的 PCR 特异性扩增反应第19-20页
     ·目的片段的切胶回收及克隆第20页
     ·核酸序列数据的分析和系统树构建第20页
   ·桦褐孔菌发酵优化分析方法第20-21页
     ·菌丝体干重测定第20页
     ·还原糖含量的测定第20-21页
   ·桦褐孔菌发酵菌丝体中甾类化合物定量分析方法第21-24页
     ·桦褐孔菌发酵菌丝体的GC-MS 分析第21页
       ·样品处理第21页
       ·桦褐孔菌发酵菌丝体的GC-MS 分析条件第21页
     ·HPLC 分析方法第21页
     ·标准曲线制作第21-22页
     ·精密度第22页
     ·准确度第22页
     ·桦褐孔菌菌丝体和子实体中甾体类化合物分析第22-23页
     ·甾体类化合物提取的重复性实验第23页
     ·加标回收率第23-24页
第三章 结果与讨论第24-52页
   ·菌种鉴定第24-28页
     ·菌株的形态学鉴定第24-26页
       ·平板培养特性的观察第24-25页
       ·发酵培养特性的观察第25-26页
       ·形态学特征第26页
     ·菌株的分子生物学鉴定第26-28页
   ·桦褐孔菌子实体和发酵菌丝体中甾类化合物的定量测定第28-36页
     ·桦褐孔菌发酵菌丝体的GC-MS 分析第28-31页
     ·甾类化合物分析方法的建立第31页
       ·检测条件的选择第31页
       ·柱温的选择第31页
       ·流动相的选择第31页
     ·甾类化合物分析方法的评价第31-36页
       ·甾类化合物的标准曲线第31-32页
       ·甾类化合物HPLC 分析方法的评价第32-35页
       ·桦褐孔菌发酵菌丝体与子实体甾类化合物的HPLC 分析第35-36页
   ·桦褐孔菌深层发酵培养基的优化第36-44页
     ·最佳碳源的确定第37页
     ·最佳氮源的确定第37-38页
     ·最佳碳氮比的确定第38-39页
     ·最佳无机盐的确定第39-40页
     ·最佳初始pH 的确定第40页
     ·最佳接种量的确定第40-41页
     ·培养基及培养条件优化的正交试验第41-42页
     ·桦褐孔菌液态发酵过程中的动态变化第42-44页
       ·桦褐孔菌液态培养过程中pH 值和残糖的变化第43页
       ·桦褐孔菌液态培养过程中菌丝体干重与单位菌丝体和单位发酵液中甾体类化合物的变化第43-44页
   ·桦褐孔菌深层发酵相关功能性甾体类化合物的研究第44-52页
     ·桦褐孔菌液态培养过程中甾体类化合物的变化第45-47页
     ·添加天然成分对桦褐孔菌液态培养过程中甾体类化合物的影响第47-52页
       ·石油醚提取液对甾体类化合物含量及生物量的影响第47-48页
       ·乙酸乙酯提取液对甾体类化合物含量及生物量的影响第48-49页
       ·甲醇提取液对甾体类化合物发酵的影响第49-50页
       ·水提取液对甾体类化合物发酵的影响第50-51页
       ·桦树皮和桦木的不同提取液对甾体类化合物发酵影响的比较第51-52页
第四章 结论与展望第52-54页
   ·主要结论第52-53页
   ·展望第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-60页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第60-61页
附录 1 桦褐孔菌菌株 18S rDNA 测序结果第61-62页
附录 2 桦褐孔菌菌株 ITS rDNA 测序结果第62-63页
附录 3 用于多孔菌科真菌 18S rDNA 序列分析的菌株信息第63-64页
附录 4 用于樟芝 ITS rDNA 序列分析的菌株信息第64页

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