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马铃薯Y病毒湖南分离物株系鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 引言第10-24页
   ·马铃薯病毒病的发生和危害第10-11页
   ·马铃薯病毒病防治策略的研究进展第11-15页
     ·马铃薯脱毒种薯生产第11-13页
       ·通过茎尖培养或者热处理脱除病毒第11-12页
       ·传毒媒介的控制第12-13页
       ·种薯认证第13页
     ·马铃薯抗病毒品种选育第13-14页
       ·利用已有的抗源材料第13-14页
       ·马铃薯抗病基因工程第14页
     ·利用抗病毒物质控制马铃薯病毒第14-15页
   ·马铃薯Y病毒的研究进展第15-23页
     ·PVY的生物学特征第16-17页
       ·寄主范围第16页
       ·传播方式第16页
       ·症状第16-17页
       ·病毒粒子第17页
     ·PVY的分子生物学特性第17页
     ·PVY分离物株系分化与核酸性质的研究第17-19页
     ·PVY鉴定方法的研究第19-23页
       ·生物学测定法第19-20页
       ·免疫学检测技术第20-21页
         ·双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)第20页
         ·三抗体夹心酶联免疫吸附法(TAS-ELISA)第20-21页
       ·分子生物学检测方法第21-23页
         ·RT-PCR检测第21页
         ·m-RT-PCR检测第21-22页
         ·核酸探针杂交技术第22-23页
         ·实时荧光定量PCR技术第23页
   ·研究的目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-30页
   ·材料第24-26页
     ·供试病毒材料第24页
     ·酶、试剂及仪器第24页
     ·试验菌株及与克隆载体质粒第24页
     ·PCR引物第24-25页
     ·培养基第25-26页
   ·试验方法第26-30页
     ·马铃薯Y病毒RNA的提取第26页
     ·马铃薯Y病毒的RT-PCR扩增检测第26-27页
     ·PCR扩增产物的凝胶电泳观察第27页
     ·湖南省PVY分离物全序列克隆第27-29页
       ·RT-PCR扩增产物的纯化第27页
       ·纯化产物的克隆第27-28页
         ·PCR扩增片段的克隆第27-28页
         ·鉴定克隆结果第28页
       ·阳性克隆测序第28页
       ·生物信息学分析第28-29页
     ·ELISA检测方法第29-30页
       ·DAS-ELISA检测第29-30页
       ·TAS-ELISA检测第30页
3 结果与分析第30-44页
   ·RT-PCR检测湖南PVY分离物株系第30-33页
   ·PVY-HN2的序列测定第33-37页
   ·PVY-HN2基因序列与报道的PVY分离物同源性比较第37-39页
   ·PVY-HN2基因结构特征分析第39-41页
   ·一种新的RJ鉴定的检测方法第41-43页
   ·ELISA检测湖南PVY分离物株系第43-44页
     ·DAS-ELISA检测PVY~N第43页
     ·TAS-ELISA检测 PVY~o第43-44页
4 讨论第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-59页
缩略词表第59-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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