| 目录 | 第1-10页 |
| 图表目录 | 第10-12页 |
| 第一部分 纳米材料PAMAM G3诱导小鼠急性肺损伤的致病机理研究 | 第12-41页 |
| 中文摘要 | 第12-13页 |
| 英文摘要 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 一、实验材料与方法 | 第18-27页 |
| 第一节 纳米材料PAMAM对人肺上皮细胞(A549细胞)的毒性 | 第18-20页 |
| 1 材料 | 第18页 |
| ·细胞 | 第18页 |
| ·纳米材料 | 第18页 |
| ·细胞培养用耗材 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·实验设备 | 第18页 |
| 2 方法 | 第18-20页 |
| ·PAMAM纳米材料的处理 | 第18-19页 |
| ·MTT方法测定PAMAM纳米材料对细胞活性的影响 | 第19页 |
| ·细胞全DNA基因组提取 | 第19页 |
| ·Caspase-3活性测定 | 第19-20页 |
| 第二节 纳米材料PAMAM诱导人肺上皮细胞(A549细胞)自噬性死亡 | 第20-23页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| ·细胞 | 第20页 |
| ·纳米材料 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20页 |
| ·细胞培养用耗材 | 第20页 |
| ·实验药物及试剂 | 第20-21页 |
| ·实验设备 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-23页 |
| ·PAMAM G3导致A549细胞产生自噬的电镜实验 | 第21-22页 |
| ·PAMAM G3引起A549细胞EGFP-LC3聚集实验 | 第22页 |
| ·Western blotting检测A549细胞自噬标志性蛋白LC3的表达水平变化 | 第22页 |
| ·MTT方法测定PAMAM纳米材料对细胞活性的影响 | 第22页 |
| ·RNAi技术干扰自噬关键基因ATG6的表达后,测定A549细胞活性 | 第22-23页 |
| 第三节 纳米材料PAMAM G3激活Akt-TSC2-mTOR通路诱导人肺上皮细胞(A549细胞)自噬性死亡 | 第23-25页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| ·细胞 | 第23页 |
| ·纳米材料 | 第23页 |
| ·质粒 | 第23页 |
| ·细胞培养用耗材 | 第23页 |
| ·实验药物及试剂 | 第23页 |
| ·实验设备 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| ·Western blotting检测A549细胞白噬性死亡信号通路蛋白表达水平的变化 | 第24页 |
| ·RNAi技术干扰TSC2基因表达后,检测A549细胞中EGFP-LC3的聚集 | 第24页 |
| ·RNAi技术干扰TSC2基因表达后,测定PAMAM G3对细胞活性影响 | 第24-25页 |
| 第四节 纳米材料PAMAM G3诱导自噬性细胞死亡致小鼠急性肺损伤 | 第25-27页 |
| 1 材料 | 第25页 |
| ·动物 | 第25页 |
| ·纳米材料 | 第25页 |
| ·实验药物及试剂 | 第25页 |
| ·实验设备 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-27页 |
| ·小鼠气管内注射PAMAM G3后,肺组织病理观察 | 第25-26页 |
| ·小鼠气管内注射PAMAM G3后,肺组织湿干比变化 | 第26页 |
| ·小鼠气管内注射PAMAM G3后,肺弹性变化 | 第26页 |
| ·小鼠气管内注射PAMAM G3后,死亡率变化 | 第26-27页 |
| 二、实验结果 | 第27-37页 |
| 第一节 纳米材料PAMAM对人肺上皮细胞(A549细胞)的毒性 | 第27-29页 |
| ·纳米材料PAMAM对A549细胞活性的影响 | 第27页 |
| ·纳米材料PAMAM G3处理的A549细胞全DNA基因组电泳结果 | 第27-28页 |
| ·纳米材料PAMAM G3处理的A549细胞Caspase-3活性测定结果 | 第28-29页 |
| 第二节 纳米材料PAMAM诱导人肺上皮细胞(A549细胞)自噬性死亡 | 第29-32页 |
| ·PAMAM G3导致A549细胞产生自噬的电镜照片 | 第29页 |
| ·激光共聚焦分析PAMAM G3引起A549细胞发生自噬EGFP-LC3聚集 | 第29-30页 |
| ·PAMAM G3引起的A549细胞中LC3蛋白的表达变化 | 第30页 |
| ·自噬抑制剂3MA改善PAMAM G3引起的自噬性细胞死亡 | 第30-31页 |
| ·抑制自噬关键基因ATG6的表达后,加入PAMAM G3测定A549细胞活性 | 第31-32页 |
| 第三节 PAMAM G3激活Akt-TSC2-mTOR通路诱导细胞自噬性死亡 | 第32-35页 |
| ·Western blotting检测A549细胞自噬性死亡信号通中mTOR表达变化 | 第32页 |
| ·Western blotting检测A549细胞自噬性死亡信号通中S6表达变化 | 第32-33页 |
| ·抑制TSC2基因表达后,加入PAMAM G3检测细胞EGFP-LC3的聚集 | 第33页 |
| ·抑制TSC2基因表达,加入PAMAM G3后测定A549细胞的活性 | 第33-34页 |
| ·Western blotting检测A549细胞自噬性死亡的信号通路Akt表达变化 | 第34页 |
| ·PAMAM G3引起A549细胞自噬性死亡的信号通路模式图 | 第34-35页 |
| 第四节 纳米材料PAMAM G3诱导自噬性细胞死亡致小鼠急性肺损伤 | 第35-37页 |
| ·PAMAM G3引起小鼠肺组织的病理改变 | 第35页 |
| ·PAMAM G3引起小鼠肺组织湿干比变化 | 第35-36页 |
| ·PAMAM G3引起小鼠肺弹性的变化 | 第36页 |
| ·PAMAM G3对小鼠存活情况的影响以及3MA的改善作用 | 第36-37页 |
| 三、结论 | 第37-38页 |
| 四、讨论 | 第38-39页 |
| 五、参考文献 | 第39-41页 |
| 第二部分 甲型H1N1流感病毒致小鼠急性肺损伤的致病机理研究 | 第41-98页 |
| 中文摘要 | 第41-42页 |
| 英文摘要 | 第42-43页 |
| 前言 | 第43-47页 |
| 一、实验材料与方法 | 第47-64页 |
| 第一节 甲型H1N1流感病毒的培养、浓缩 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·病毒 | 第47页 |
| ·动物 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| ·活胚检查 | 第47页 |
| ·鸡胚尿囊腔接种 | 第47-48页 |
| ·甲型H1N1流感病毒的收获 | 第48页 |
| ·鸡胚尿囊液中病毒的粗离 | 第48页 |
| ·超速离心法浓缩流感病毒 | 第48页 |
| 第二节 甲型H1N1流感病毒的血凝单位及50%培养组织感染剂量测定 | 第48-51页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·仪器 | 第48-49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·病毒 | 第49页 |
| ·细胞 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·制备1%鸡红细胞悬液 | 第49页 |
| ·MDCK细胞的培养 | 第49-50页 |
| ·甲型H1N1流感病毒的血凝单位测定 | 第50页 |
| ·甲型H1N1流感病毒50%培养组织感染剂量(TCID50)的测定 | 第50-51页 |
| 第三节 甲型H1N1流感病毒感染小鼠及50%致死剂量(LD50)的测定 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·仪器 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·病毒 | 第51页 |
| ·动物 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·甲型H1N1流感病毒鼻腔内感染小鼠 | 第51-52页 |
| ·小鼠50%致死剂量(LD50)的测定 | 第52页 |
| 第四节 甲型H1N1流感病毒(BJ株)致小鼠急性肺损伤模型的建立 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·病毒 | 第52页 |
| ·动物 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-55页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)致小鼠死亡率 | 第53页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠后肺脏中病毒的滴度测定 | 第53页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠后的肺组织病理 | 第53-54页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠后的肺组织湿干比 | 第54页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染后支气管肺泡灌洗液炎症因子检测 | 第54-55页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠后IκB-α激活 | 第55页 |
| 第五节 不同株甲型H1N1流感病毒对4周龄C57 BL/6小鼠致病性比较 | 第55-59页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·仪器 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55-56页 |
| ·病毒 | 第56页 |
| ·动物 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒致小鼠死亡率 | 第56页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染后小鼠肺脏中病毒的滴度测定 | 第56-57页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠的肺组织病理 | 第57页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠的肺组织湿干比 | 第57页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染后支气管肺泡灌洗液炎症因了检测 | 第57-58页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染后NF-κB和IκB-α的表达分析 | 第58-59页 |
| 第六节 甲型H1N1流感病毒对不同品系,不同周龄小鼠致病性比较 | 第59-62页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·仪器 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·病毒 | 第59页 |
| ·动物 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·不同种系,不同周龄小鼠50%致死剂量(LD50)的测定 | 第59-60页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)致小鼠死亡率 | 第60页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染后小鼠的肺组织湿干比 | 第60页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染小鼠的支气管肺泡灌洗液炎症因子的测定 | 第60-61页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染后IκB-α表达水平检测 | 第61-62页 |
| 第七节 药物治疗甲型H1N1流感病毒感染引起的小鼠急性肺损伤 | 第62-64页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·病毒 | 第62页 |
| ·动物 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·药物治疗降低甲型H1N1流感病毒(BJ株)病毒致小鼠死亡率 | 第62页 |
| ·药物治疗甲型H1N1流感病毒(BJ株)病毒感染小鼠的肺组织病理 | 第62-63页 |
| ·药物缓解甲型H1N1流感病毒(BJ株)病毒感染后小鼠的肺组织水肿 | 第63-64页 |
| 二、实验结果 | 第64-94页 |
| 第二节 血凝单位及50%培养组织感染剂量TCID50测定 | 第64页 |
| ·甲型H1N1流感病毒的血凝单位测定结果 | 第64页 |
| ·甲型H1N1流感病毒50%培养组织感染剂量的测定结果 | 第64页 |
| 第三节 甲型H1N1流感病毒感染小鼠及50%致死剂量的测定 | 第64-65页 |
| ·甲型H1N1流感病毒对4周龄C57BL/6小鼠50%致死(测定结果 | 第64-65页 |
| 第四节 甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染致小鼠急性肺损伤模型的建立 | 第65-77页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)致小鼠死亡率 | 第65页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染后小鼠肺脏中病毒的滴度 | 第65-66页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠的肺组织病理结果 | 第66-68页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染后小鼠的肺组织湿干比 | 第68-69页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染后炎症因子的测定 | 第69-76页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠IκB-α激活 | 第76-77页 |
| 第五节 甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)对小鼠致病性比较 | 第77-83页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒致小鼠死亡率结果 | 第77-78页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染后小鼠肺脏中病毒的滴度测定 | 第78-79页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠的肺组织病理 | 第79-81页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠的肺组织湿干比 | 第81页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠的支气管肺泡灌洗液炎症因子检测 | 第81页 |
| ·不同株甲型H1N1流感病毒感染小鼠NF-κB和IκB-α的激活 | 第81-83页 |
| 第六节 甲型H1N1流感病毒对不同种系,不同周龄小鼠致病性比较 | 第83-90页 |
| ·不同种系、不同周龄小鼠50%致死剂量(LD_(50))的测定 | 第83页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)致小鼠死亡率 | 第83-84页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染小鼠的肺组织干湿十比 | 第84-85页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染小鼠的支气管肺泡灌洗液炎症因子的测定 | 第85-89页 |
| ·甲型H1N1流感病毒(BJ株,CA07株)感染小鼠的IκB-α的激活 | 第89-90页 |
| 第七节 药物治疗甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染引起的小鼠急性肺损伤 | 第90-94页 |
| ·药物治疗降低甲型H1N1流感病毒(BJ株)病毒致小鼠死亡率 | 第90-91页 |
| ·药物治疗甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染小鼠的肺组织病理变化 | 第91-93页 |
| ·药物缓解甲型H1N1流感病毒(BJ株)感染后小鼠的肺组织水肿 | 第93-94页 |
| 三、结论 | 第94-95页 |
| 四、讨论 | 第95-96页 |
| 五、参考文献 | 第96-98页 |
| 综述一 | 第98-110页 |
| 参考文献 | 第107-110页 |
| 综述二 | 第110-119页 |
| 参考文献 | 第115-119页 |
| 英文略语表 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 个人简历 | 第122-123页 |
